Анализ крови на anti-HEV IgM, ИФА

Серологическое исследование крови на anti-HEV IgM, ИФА – это лабораторный анализ крови, проводимый для выявления гепатита Е. Вирус гепатита Е (HEV) относится к семейству Caliciviridae. Частица вируса размером около 33 нм представляет собой однонитевую РНК. HEV может быть ликвидирован кипячением или воздействием антисептиков, неустойчив во внешней среде. Однако, долгое время сохраняет жизнеспособность в пресной воде. Длительность инкубационного периода варьирует от 15 до 75 дней.

Появление иммуноглобулинов класса М является первой ответной реакцией организма на попадание вируса. Антитела появляются в течение первых недель после инфицирования. Обнаружение anti-HEV класса IgM зафиксировано в 90 % случаев через 8 – 30 дней. По происшествии трех месяцев после заражения иммуноглобулины обнаруживаются у 50% больных, а через семь месяцев – у 7 %.

Подготовка к исследованию:

сдавать кровь необходимо натощак утром;
с последнего приема пищи должно пройти не менее 8 часов;
исключить прием алкоголя не менее чем за 24 часа до взятия биоматериала;
не рекомендуется сдавать кровь на серологию после флюорографии, рентгена, физиотерапевтических процедур.

Характеристики исследования:

Тип биоматериала: венозная кровь.
Синонимы (rus): Еnzyme-linked immunosorbent assay.
Синонимы (eng): Analysis of Total Thyroxine, Analysis of Total Tetraiodothyronine.
Методы исследования: иммуноферментный анализ.
Сроки выполнения: 4-6 дней.

Способы передачи и симптомы гепатита Е

Возбудитель гепатита Е передается фекально-оральным путем с загрязненной питьевой водой, не соответствующей санитарным нормам. Наибольшее распространение он приобрел в развивающихся странах Африки, Центральной Америки, Азии. Риск передачи инфекции от больного человека минимальный. В странах Западной Европы распространенность антител к вирусу составляет около 2 %, источник заражения не выявлен. Возможна передача вируса вертикальным путем.

Симптоматика заболевания схожа с гепатитом А. Отличие заключается в том, что при гепатите Е при появлении желтушности симптомы начинают угасать, а при гепатите Е – прогрессируют. На первом этапе заболевания, который длится до 10 дней, появляется недомогание, снижение аппетита, боли в правом подреберье. На следующей стадии к перечисленным симптомам добавляется обесцвечивание кала, появление желтого оттенка кожных покровов и склер глаз, зуд, увеличение печени. Этот период длится до 2 недель. Затем заболевание перетекает в стадию выздоровления продолжительностью до 2 месяцев.

Как правило, взрослые люди 20 – 40 лет хорошо переносят гепатит Е, смертность составляет 1 – 3 %. Исключением являются беременные женщины, летальный исход может достигать 25%. Практически всегда беременность заканчивается выкидышем. Особенно тяжело женщины переносят гепатит Е на сроке более 24 недель. Вероятно развитие печеночной энцефалопатии, повышенной кровоточивости в родах, печеночной комы, печеночно-почечного синдрома.

Интересная информация о вирусе

Вирус гепатита E чаще всего проникает в организм человека фекально-оральным путем. Но также есть случаи массового заражения через загрязненные водоемы. Для него характерен ряд особенностей, о которых знают немногие пациенты:

чаще всего патология встречается в мужском организме;
у пациентов с ослабленным иммунитетом или хроническими заболеваниями возможно повторное инфицирование на стадии выздоровления;
после заболевания формируется защитный иммунитет, но временно, впоследствии иммуноглобулины G полностью устраняются, поэтому появляется риск повторного заражения;
инфекция наиболее опасна для беременных женщин, она чревата фиброзом и циррозом печени, риском гибели плода и преждевременного прерывания беременности, а также летальным исходом.

Защититься от вируса гепатита E можно только профилактическими методами. Специфическая вакцина против инфекции не разработана.

Особенности определения IgM

IgM – это защитный белок, который продуцируют лейкоциты в ответ на вторжение инфекции, в том числе вируса гепатита E. Они специфичны, направлены именно на данный патогенный микроорганизм, имеют ряд особенностей:

вырабатываются B-лимфоциты иммунной системы;
формируются сразу же после вторжения инфекции, максимальная концентрация обнаруживается через 5-7 дней;
сохраняются на протяжении 2 месяцев, затем постепенно начинают уменьшаться, так как иммунитет продуцирует IgG.

Защитные иммуноглобулина M – это маркер, по которому можно определить острую стадию развития гепатита E. Если врач подозревает патологию на ранних стадиях, определяют именно его. Но когда болезнь упущена и перешла в хронический этап или период постепенного выздоровления, данные могут быть ложноотрицательными, так как в этот период IgM постепенно снижаются, а IgG нарастают.

Важность своевременной диагностики

Вирус гепатита E менее опасен по сравнению с другими разновидностями воспалительных процессов печени. Но если своевременно провести исследование, можно предупредить и устранить массу осложнений:

сниженная функция гепатоцитов печени по устранению токсических веществ, метаболизму различных компонентов, поступающих в организм;
формирование соединительнотканных волокон на месте воспалительного процесса, что приводит к фиброзу части паренхимы (эти волокна полностью теряют функциональность);
повышенное содержание билирубина в системном кровотоке, что вызывает желтушность склер и кожных покровов;
злокачественное перерождение тканей печени (цирроз) с развитием метастазов в соседние органы и риском летального исхода.

Если в первые 2 месяца провести анализ на обнаружение anti-HEV IgM, врач получит достоверные данные по наличию или отсутствию патогенного микроорганизма в системном протоке.

Показания к сдаче анализа

Серологическое определение антител к белкам класса IgM методом ИФА проводится в случаях:

повышения уровня печеночных ферментов;
подозрения на гестоз при беременности;
появления симптомов гепатита;
переливания крови;
жалоб на пищеварительную систему у лиц, которые пребывали на территории с низкими санитарными условиями.

Методика исследования

Иммуноферментный анализ основан на обнаружении взаимодействия между антителами и антигенами определенного штамма вируса. Для этой цели используются специальные ферментные системы, выявляющие комплексы взаимодействия. Техника анализа основана на изменении оптической плотности исходного субстрата.

Этапы проведения анализа

Обнаружить иммуноглобулины M в системном кровотоке можно при помощи иммуноферментного анализа. Это тестирование, проводимое в образце венозной крови. После забора ее помещают в пробирку с антикоагулянтом, препятствующим образованию кровеносного сгустка. Затем отправляют в лабораторию, выполняя исследование по этапам:

пробирки с венозной кровью устанавливают в прибор для центрифугирования, прокручивая на 1.000 оборотах, чтобы разделить содержимое на прозрачную плазму и оставшиеся форменные элементы;
для анализа берут только фракцию плазмы, отделяя ее при помощи специального лабораторного шприца;
плазму из шприца выдавливают в лунки планшета, добавляя конъюгат для формирования реакции «антиген-антитело»;
рядом ставят контрольный образец, чтобы исключить риск ошибочных сведений;
переносят планшет в инкубационный прибор, который ускоряет появление реакции «антиген-антитело»;
планшет вставляют в фотокалориметр, который самостоятельно подсчитывает данные титра антител, выдавая их на бумаге.

Самостоятельно врач-лаборант выполняет только подготовительный этап. Подсчет осуществляется полуавтоматическим прибором, поэтому риск получения ложных данных минимален.

Интерпретация результатов

Результат ИФА может быть отрицательным или положительным. В первом случае он может говорить об отсутствии гепатита Е, инкубационном периоде или окончании острой стадии болезни. Положительный результат трактуется как острая фаза заболевания.

Развернутая характеристика результатов

Если антител не обнаружено, значение будет отрицательным. Это означает, что пациент не болеет вирусом гепатита E в острой фазе. Положительный результат обнаруживается в пределах 0-0,99. Следующие причины его появления:

первичное заражение вирусом гепатита E;
период развития инфекции на протяжении 2 месяцев.

Отрицательные данные могут появиться по разным причинам:

отсутствие вируса гепатита в системном кровотоке;
слабая реакция иммунитета или иммунодефицит, из-за чего защитные белки не появляются;
первые 5 суток после вторжения инфекции, когда вирус уже есть в крови, но иммунитет еще не успел среагировать;
заражение свыше 2 месяцев, когда острая фаза уже завершилась;
индивидуальные особенности организма, когда иммунитет работает в нормальном режиме, но к вирусу гепатита E антитела не вырабатываются.

Также возможны ложноотрицательные или ложноположительные результаты. Они появляются в следующих случаях:

неправильная подготовка к исследованию;
проведение терапии радиационными методами (например, облучение для лечения злокачественных новообразований);
врачебная ошибка на этапе подготовки или проведения самого анализа.

Для исключения риска недостоверных данных важно правильно пройти подготовку к анализу, выполнить все этапы исследования в заданном порядке. Многие инфекционисты советуют проводить тест дважды, чтобы результаты были точными. Дополнительно IgM оценивают вместе с IgG, чтобы выявлять острую фазу или ее переход в этап выздоровления, хронического процесса.

Вирус гепатита E менее опасен по сравнению с другими патологиями печени. Но для появления положительного прогноза важна своевременная диагностика при помощи обнаружения anti-HEV IgM. Этот маркер позволяет установить патологию в острой стадии, своевременно начав прием специфических противовирусных препаратов.