Сальмонеллез (Salmonella)

Анализ кала на наличие антигенов сальмонелл представляет собой иммунохроматографическое диагностирование, при котором на тестовую пластинку, содержащую специфичные к сальмонелле антитела, наносится несколько капель биоматериала с последующим проявлением на ней результатов анализа. Тестирование разработано для быстрого определения зараженности сальмонеллезом.

Анализ на наличие антигенов сальмонеллы в фекалиях делают при подозрении на гастроинтестинальный сальмонеллез. Инфекция проявляет себя следующими симптомами:

• резкое ухудшение самочувствия;
• повышение температуры;
• головная и абдоминальная боль;
• тошнота, рвота;
• понос.

Важность анализа

Сальмонелла – это опасная зоонозная инфекция, которая быстро проникает в ЖКТ пациента после употребления пиши, распространяется по всей системе и частично выделяется с фекалиями. Часто патология приводит к осложнениям, при продолжительном отсутствии терапии может вызывать даже летальный исход. Поэтому требуется своевременно установить диагноз и провести лечение. Если времени на продолжительную диагностику нет, врач назначает определение антигенов сальмонелл в фекалиях посредством экспресс-метода. Так можно быстро перейти к терапии.

Благодаря прохождению анализа врач и пациент могут выполнить следующие действия:

• определить наличие или отсутствие сальмонеллы в образцах фекалий;
• провести дифференциальную диагностику с другими патологиями, которые имеют общие симптомы, так как они часто встречаются и при других пищевых инфекциях;
• быстро назначить методы терапии в тот же день, когда и проводится исследование, так как результаты можно получить уже через несколько часов;
• оценить качество проведенного лечения, экспресс-метод можно повторять несколько раз, он с точностью выявляет наличие или отсутствие сальмонеллы в кишечнике и биоматериале.

Назначение на анализ получают у лечащего врача, например, терапевта, педиатра, инфекциониста, гастроэнтеролога. При получении результата экспресс-диагностики пациент обязан передать его лечащему врачу, чтобы он смог назначить действенные препараты, быстро устраняющие саму бактерию, а также отклонения, которые она вызвала.

Преимущества анализа

Многие врачи предпочитают назначать определение антигенов сальмонелл в фекалиях именно посредством хроматографического экспресс-метода, так как он имеет ряд преимуществ:

• небольшая цена за счет потребности в минимальном оборудовании, дешевых тест-полосках, реагентах (дорогостоящее полуавтоматическое оборудование не требуется);
• выполнение анализа минимальное время, на это требуется не более 30 минут, поэтому уже в течение нескольких часов пациент сможет получить правильное лечение и начать прием антибактериальных препаратов, направленных на уничтожение именно сальмонеллы;
• отслеживание качества полученного лечения, при приеме правильных лекарств следов бактерий в образцах фекалий больше обнаруживаться не будет;
• простота выполнения методики, для ее проведения не требуется специального обучения врача-лаборанта, достаточно подготавливать реагент и наносить его на тест-систему;
• получение точных результатов, минимальные риски ложноположительных или ложноотрицательных данных, в основном они встречаются при неправильной подготовке, сборе биоматериала, выполнении теста;
• специфичность метода, при его проведении невозможно получить положительный образец при наличии другой инфекции, так как на тест-полосках находятся антитела, направленные на взаимодействие только с антигенами сальмонеллы.

Врачи рекомендуют повторять тест 2-3 раза. Первый раз его проводят для дифференциальной диагностики, подтверждения диагноза сальмонеллеза. Затем его можно выполнять в процессе терапии, чтобы оценивать правильность назначенного препарата. В этом случае тест-система покажет отрицательный результат. Затем исследование можно повторить через несколько недель после завершения лечения, чтобы выявить риск сохранности бактерии сальмонеллы в кишечнике. Если результаты этой системы окажутся положительными, высок риск рецидива патологии, в этом случае терапию проходят повторно.

Сбор биоматериала

Рекомендуется перед сбором фекалий не употреблять антибиотики за 7-10 дней до исследования. Также нужно отказаться от алкоголя накануне теста. В отличие от других методов диагностики, при этом анализе собирать фекалии можно в любое время, так как лаборанту не требуется продолжительно выполнять анализ, он осуществляет это всего за 20-30 минут. Кал собирают по следующей схеме:

• покупают стерильный одноразовый контейнер с крышкой и ложкой в комплекте;
• подмывают наружные половые органы бактерицидным мылом, чтобы в образец не попали посторонние бактерии;
• следят, чтобы в образец фекалий не попала моча;
• собирают несколько участков кала из всего образца;
• если обнаруживается кровь, слизь и гной, обязательно добавляют их в контейнер, так как в этих выделениях бактерии содержатся в большом количестве;
• закручивают контейнер крышкой, чтобы внутрь не попадали посторонние микроорганизмы и вещества;
• передают кал на анализ в лабораторию.

Рекомендуется передавать образец фекалий в лабораторию в короткие сроки, чтобы получить максимально достоверные данные. Если медлить и продолжительно хранить биоматериал, результаты могут стать ложноположительными или ложноотрицательными.

Хранение и транспортировка образца

Важно правильно хранить и транспортировать собранные фекалии в контейнере, чтобы не испортить биоматериал. Это выполняют по правилам:

• температура хранения в помещении составляет 22-23°, на дверце холодильника 4-5°;
• при комнатной температуре образец хранят не более 1 часа, если устанавливать его в холодильник, время удлиняется максимум до 2 часов, затем биоматериал требуется доставить в лабораторию;
• при всех этапах хранения и транспортировки недопустимо попадание прямых солнечных лучей на образец фекалий, иначе начнутся процессы разложения и гниения в ускоренном темпе;
• образец транспортируют в плотно закрытой упаковке, чтобы содержимое не попало в окружающую среду.

Врач-лаборант обязан начать исследование сразу же, как образец биоматериала поступит в лабораторию. Продолжительное хранение в медучреждении недопустимо. На контейнере должна быть указана фамилия и инициалы пациента. Эти данные переносят на образец тест системы, чтобы не произошло ошибки. Тогда определение антигенов сальмонелл в фекалиях посредством хроматографической экспресс-диагностики окажется правильным.

В состав диагностического комплекта входит:

• несколько упакованных в пакетики тест-систем – пластин, с нанесенными на них специфическими моноклональными антителами, специфичными по отношению к антигенам сальмонеллы;
• набор пластмассовых пробирок-капельниц с буфером для разведения биоматериала (кала).

Технология исследования на наличие антигенов сальмонеллы в фекалиях включает:

1. Подготовку биоматериала к тестированию. Образец фекалий (около 150 мг) разводится в буфере, содержащимся в пробирке-капельнице.
2. Тестирование. Из упаковки извлекается тестовая пластина, и маркируется индивидуальным номером пациента или его инициалами. Пробирка-капельница с биопробой энергично встряхивается, ее кончик отламывается, и несколько капель биоматериала наносится на пластину в зону внесения пробы.

Принцип тестирования заключается в следующем. При нанесении биоматериала с антигенами сальмонеллы на тестовую пластину, содержащую антитела на микроорганизмы, образуются комплексы «антиген-антитело», проявляющиеся на пластине красной линией. Цветная кодировка обеспечивается окрашенными частицами латекса. Непрореагировавший биоматериал распространяется далее по пластине, и захватывается поликлональными антиантителами, образуя зеленую линию. Ее появление свидетельствует о корректности тестирования.

Результат считывается по истечении нескольких минут после нанесения биоматериала на пластину.
Примечание: При тестировании температура тестовых пластинок должна соответствовать комнатной.

Результат анализа определяют по появлению или отсутствию красной и зеленой полосы в тестовой зоне пластины. Интерпретация диагностирования производится следующим образом:

• имеется красная и зеленая полоса – диагноз положительный (сальмонеллы присутствуют в организме тестируемого);
• присутствует зеленая полоса, красная отсутствует – результат анализа отрицательный (сальмонелла отсутствует);
• есть только красная полоса, или полосы вообще отсутствуют – тест не действителен и требует повторения.

Интенсивность окраски красной линии говорит о количестве антигенов в пробах.