Антинуклеарные антитела к антигенам (ANA)

Дифференциальная диагностика аутоиммунных заболеваний

Анализ на специфические антинуклеарные антитела методом иммуноблоттинга — это высокоточный лабораторный тест для выявления и дифференциации аутоиммунных заболеваний, таких как системная красная волчанка (СКВ), склеродермия, синдром Шегрена и полимиозит.

Ключевые аспекты:

1. Что определяет анализ? Метод иммуноблоттинга выявляет спектр специфических аутоантител к 15+ антигенам (например, dsDNA, Sm, Scl-70, Jo-1, Ro-52), что позволяет точно определить конкретное аутоиммунное заболевание.
2. Зачем проводится? Тест используется для дифференциальной диагностики болезней со схожими симптомами, мониторинга активности заболевания и оценки эффективности проводимой терапии.
3. Кому назначают? Тест особенно важен для пациентов с неспецифическими симптомами: женщин и мужчин с необъяснимой болью в суставах и мышцах, кожными высыпаниями, синдромом Рейно, постоянной усталостью или лихорадкой.
4. Соответствие ключевых аутоантител заболеваниям:

Анализ ANA методом иммуноблоттинга — это ключевой тест для точной диагностики конкретного аутоиммунного заболевания по спектру специфических антител.

Источники:

1. Клинические рекомендации «Системная красная волчанка» (Минздрав России).
2. Antinuclear Antibodies in Systemic Sclerosis (2020).

Подробнее об этом — ниже:

Антинуклеарные антитела к антигенам (ANA): AMA-M2, CENT B, dsDNA, Jo-1, nRNP, PCNA, PM-Scl, Ro-52, Scl-70, Sm, SS-A, SS-B, нуклеосомам, гистономам, рибосомальному протеину Р9 (иммуноблот) – защитные комплексы иммунитета, которые в норме не должны присутствовать в организме, они выделяются на собственные клетки и их компоненты, вызывая аутоиммунные заболевания разного вида.

Характеристики исследования:

• Тип биоматериала: венозная кровь
• Синонимы (rus): антитела к антигенам, специфичные АНА, антитела при аутоиммунных заболеваниях
• Синонимы (eng): antibodies to antigens, specific ANA, antibodies in autoimmune diseases
• Метод исследования: иммуноблотинг

Антинуклеарные антитела выявляют для получения следующей информации:

• дифференциальная диагностика между аутоиммунными патологиями различного вида, так как часто они могут иметь схожее течение, но отличающиеся методы терапии;
• отслеживание риска развития аутоиммунного заболевания в динамике, чтобы судить о степени его тяжести;
• определение качества назначаемого лечения, чтобы своевременно менять виды действующих веществ препаратов или дозировки, назначать вспомогательные тактики;
• составление прогноза при выявленном аутоиммунном заболевании;
• отслеживание пациентов, переходящих в период ремиссии, чтобы вовремя диагностировать обострение и начать лечение до осложнений.

Первоначально исследование назначают для подтверждения диагноза аутоиммунной патологии и выявления ее точного вида. Затем тест рекомендуется повторять по мере терапии, чтобы оценивать тяжесть патологии и результаты препаратов.

Цель исследования

Основная цель исследования заключается в постановке дифференциального диагноза. Так можно выявить аутоиммунную патологию в случае, если ее симптомы не специфичны, поэтому ее можно спутать с системным заболеванием или другим видом повышенной активности иммунитета.

Благодаря анализу определяют не только аутоиммунную патологию, но и ее точную разновидность, так как оценивают сразу большое количество антител. Важно понимать, что при многих аутоимунных патологиях начинают выделяться разные виды антител одновременно. Поэтому требуется изучить сразу комплекс показателей, чтобы правильно определить диагноз и назначить специфическое лечение.

Характеристика показателей анализа

В процессе выполнения анализа изучают одновременно большое количество антител, что и является его основным достоинством.

1. Анти-Sm. Маркер системной красной волчанки, который чаще всего проявляется только при этом заболевании. По критерию оценивают лишь наличие патологии, но не степень ее тяжести.
2. DsDNA. Антитела взаимодействуют с молекулами ДНК, чаще проявляются при системной красной волчанке, а также мононуклеозе и биллиарном холангите.
3. Ro-52. Антитела встречаются при многих аутоиммунных патологиях. Например, системной красной или дисконтной волчанке, синдроме Шегрена, склеродермии, ревматоидном артрите.
4. NRNP. Антитела формируются при системной склеродермии и красной волчанке.
5. Анти RNP. Антитела против малого ядра нуклеотида U-РНК. Специфичны для синдрома Шарпа, при котором формируются смешанные поражения соединительной ткани. Реже проявляются при системной красной волчанке.
6. Анти SS-A. Маркер синдрома Шегрена, системной красной волчанки. Если он обнаруживается у беременной женщины, высок риск развития волчаночного синдрома у ребенка после рождения.
7. Анти SS-B. Антитела, формирующиеся при синдроме Шегрена, а также на ранних стадиях развития системной красной волчанки у лиц старческого возраста.
8. Анти Scl-70. Антитела характерны для CREST-синдрома, часто встречаются при системной склеродермии. При резком повышении уровня маркера требуется отслеживать состояние легких, так как может наступить фиброз в альвеолах.
9. Анти PM/Scl. Маркер системной склеродермии, полимиозита.
10. Антитела к ядерному антигену пролиферирующих клеток. Наиболее чувствительный маркер системной красной волчанки, по которому дополнительно можно отследить степень ее тяжести.
11. Антицентромерные антитела. Маркер специфичен для системной красной волчанки, системной склеродермии, ревматоидного артрита. Выявление антител указывает на благоприятный исход патологии, так как при их наличии редко поражаются внутренние органы.
12. Анти-Jo-1 антитела. Они специфичны для миозита, интерстициальной болезни легких. На основе этого критерия можно судить о степени тяжести патологии и ее прогрессировании.
13. Антитела к гистонам. Маркер системной красной волчанки, который увеличивается при ее постепенном прогрессировании.
14. Антитела к нуклеосомам. Свидетельствуют о развитии системной красной волчанки, для других патологий они не присущи. По постепенному нарастанию можно предположить риск поражения почек.
15. Антитела к рибосомальному белку P9. Их действие направлено против рибосом, что приводит к развитию системной красной волчанки в сочетании с тяжелым поражением головного мозга, печени, почек. По критерию можно судить о риске наступления психоза под действием волчанки.
16. Анти-АМА-М2. Это антитела против митохондрий, которые локализуются на их внутренней мембране. Это маркер цирроза, который указывает на его тяжелое развитие.

На основании данных можно с точностью установить дифференциальный диагноз даже в случае, если клиническая симптоматика ревматоидной патологии отсутствует.

Показания к назначению анализа

Комплекс лабораторных маркеров определяют при наличии следующих показаний:

• выявление повышенного количества одного из маркеров ревматоидного заболевания, которое может увеличиваться при различных патологиях;
• негативная симптоматика, проявляющаяся при аутоиммунных заболеваниях – периодическое повышение температуры тела, болезненность в мышцах и суставах, повышенная чувствительность к свету, синдром Рейно, колебания в уровне форменных элементов крови;
• подтвержденный диагноз аутоиммунного заболевания, чтобы отслеживать степень его тяжести и результаты лечения.

При назначении повторных исследований требуется сравнивать новые результаты с предыдущими показателями, чтобы оценивать риск прогрессирования патологии.

Как подготовиться к анализу

Перед выполнением лабораторного анализа требуется соблюдать общие  правила подготовки:

• при первичной диагностике не используют препараты, которые могут повлиять на состояние иммунитета;
• при повторном тесте употребляют все препараты, назначенные лечащим врачом;
• соблюдают щадящий режим питания за 2-3 дня до теста, чтобы устранить повышенную нагрузку на организм;
• запрещено употреблять алкогольные напитки за 3 суток;
• не рекомендуется использовать инструментальные методы диагностики, сопровождающиеся любыми дозами облучения за 1 неделю;
• непосредственно перед сбором крови не курят.

Ограничения можно устранить после сбора биоматериала. К лечению приступают после получения результатов.

Метод исследования

Для оценки специфических антител используют общий метод – иммуноблотинг. Его проводят по этапам:

• предварительная подготовка фильтра на основе нитроцеллюлозы, на которой распределяют специфические белки в определенной последовательности;
• подготовка образца венозной крови пациента, добавление небольшого объема на поверхности полоски, чтобы спровоцировать образование иммунных комплексов антиген-антитело (при положительной реакции будут появляться полоски-индикаторы);
• отмывка иммунных клеток, которые не связались с реагентом, чтобы оставить только иммунные комплексы антиген-антитело;
• повторное нанесение реагента, который должен связаться в комплекс с вторичными иммунными клетками;
• повторная отмывка лишних компонентов;
• оценка полученного биоматериала при помощи анализатора, который идентифицирует иммунные комплексы по специфической метке на поверхности комплексов антиген-антитело.

После завершения диагностики распечатывают лабораторный бланк, в котором указывают референсные значения и показатель пациента. Их требуется сравнить между собой, чтобы выявить возможную патологию.

Расшифровка анализа

В норме ни одни антинуклеарные антитела определяться не должны. В случае повышения концентрации любого из них можно судить о наличии аутоиммунной патологии. Каждый вид антинуклеарных антител может свидетельствовать о развитии разных видов аутоимунных заболеваний:

• системная красная волоча;
• миопатия, миозит;
• системная склеродермия;
• CREST-синдром;
• синдром Шегрена;
• биллиарный цирроз.

Для идентификации точной патологии требуется учитывать все показатели одновременно, а также клиническую симптоматику.