Антинуклеарный фактор на HEp-2-клетках

Антинуклеарный фактор на HEp-2-клетках, IgG – лабораторный тест, позволяющий обнаружить антинуклеарные антитела к ядрам клеток собственного организма, которые являются маркером системных патологий соединительной ткани. Этот анализ отличается высокой чувствительностью и считается «золотым стандартом» в диагностике аутоиммунных заболеваний.

Иммуноглобулины, или антитела, необходимы для защиты организма от чужеродных агентов. Их синтезируют плазмоциты. Существует несколько классов иммуноглобулинов (A, G, D, E и M), которые различаются между собой структурой и выполняемыми функциямии.

Характеристики исследования:

Тип биоматериала: венозная кровь
Синонимы (rus): антинуклеарные антитела (АНА), АНФ, антиядерные антитела.
Синонимы (eng): Fluorescent AntiNuclear Antibody detection (FANA), ANA-Hep2, antinuclear Antibodies (ANA), Hep-2 Substrate.
Метод исследования: Непрямая реакция иммунофлюоресценции.
Сроки выполнения: 10 дней

Иммуноглобулины IgG – наиболее многочисленная группа антител, которые вырабатываются В-лимфоцитами при повторном контакте с антигеном или к аутоантигенам, которыми могут быть клетки и ткани собственного организма, ставшие частично чужеродными под влиянием различных повреждающих факторов, инфекции, а также в результате нарушений иммунной системы.

При аутоиммунных патологиях продуцируются аутоантитела, направленные против собственных тканей и клеток организма. Несмотря на то, что механизмы развития таких болезней точно не известны, установлен ряд факторов, повышающих их риск развития. Наиболее весомым из них является генетическая предрасположенность.

Антинуклеарный фактор представляет собой целую группу аутоантител к компонентам клеточного ядра (РНК, ДНК, белкам гистонам), поэтому эти иммуноглобулины и называют антинуклеарными, а их группу, в которую входят около 200 разновидностей – фактором. Такие аутоантитела взаимодействуют с различными структурами ядра, что клинически проявляется воспалительными процессами в тканях, суставными и мышечными болями, повышенной утомляемостью, снижением веса и изменениями на коже.

Показания для проведения анализа

Анализ проводят в рамках диагностики системных патологий соединительной ткани, если:

пациент предъявляет жалобы (длительный субфебрилитет, артралгии, потеря веса, изменения состояния кожи);
есть характерные изменения в клиническом и биохимическом анализах крови (повышение СОЭ, увеличение уровня С-реактивного белка, наличие иммунных комплексов).

Благодаря этому исследованию можно заподозрить:

системную красную волчанку;
синдром Шегрена;
системную склеродермию;
воспалительную миопатию (полимиозит, дерматомиозит);
антифосфолипидный синдром;
смешанное заболевание соединительной ткани.

Кроме того, этот анализ необходим для:

оценки эффективности проводимого лечения;
дифференциальной диагностики ревматических заболеваний;
мониторинг течения системных патологий.

Противопоказаний обследование не имеет.

Как подготовиться к анализу

Кровь для анализа сдают утром натощак. Последний прием пищи не позже, чем за 8 часов до теста. Ужин должен быть легким, без жирного и жареного. В течение суток до сдачи анализа запрещено принимать алкогольные напитки. Утром перед сдачей нельзя ничего есть и пить, кроме чистой негазированной воды. Не рекомендуется даже курить.

Нельзя сдавать кровь после физиопроцедур, массажа и любых инструментально-диагностических мероприятий. Если пациент принимает какие-либо лекарственные препараты, необходимо сказать об этом врачу и решить вопрос об их временной отмене.

Методика проведения анализа

Для исследования необходима сыворотка венозной крови. При проведении анализа используют специальную культуру HЕp-2 клеток, полученную из аденокарциномы (злокачественного образования) гортани человека. Эти раковые клетки имеют большое ядро, которое легко различить под микроскопом, и при этом растут в один слой. Их закрепляют на стекле и начинают инкубировать с разведенной сывороткой крови больного. После удаления ее излишков их продолжают выращивать с антителами, помеченными флюоресцеином, после чего промывают и полученный образец изучают под микроскопом.

Тест выполняют по технологии непрямой иммунофлюоресценции с определением титра антител и основных типов свечения ядра, характеризующих наличие в исследуемом образце определенных видов антител, характерных для конкретной аутоиммунной патологии.

Интерпретация результата анализа

Согласно международным рекомендациям диагностически значимым считается титр антител более 1:160. Поэтому при референсных значениях титр составляет менее 1:160.

При обострении аутоиммунных патологий титр превышает показатель 1:640, а во время временного затишья болезни он снижается до 1:160-1:320.

Повышение уровня антинуклеарного фактора может быть при:

дискоидной волчанке;
системной красной волчанке;
лекарственной волчанке;
синдроме Шегрена;
синдроме Шарпа;
синдроме Рейно;
системной склеродермии;
хроническом аутоиммунном гепатите;
дерматомиозите или полимиозите;
первичном билиарном циррозе печени;
миастении тяжелой степени;
ревматоидном артрите;
системном некротическом васкулите.

Кроме того, антинуклеарный фактор может повышаться при заболеваниях неревматической природы:

инфекционном мононуклеозе;
лейкемии и других злокачественных процессах;
эндокардите инфекционного генеза;
туберкулезе;
пневмокониозах;
эндокринных патологиях, таких как сахарный диабет, тиреотоксикоз, тиреоидит, полиэндокринный синдром;
дерматологических заболеваниях, например, при пузырчатке и псориазе;
интерстициальном фиброзе легких.

Иногда антитела повышаются при беременности, а также после трансплантации и на фоне гемодиализа.

Заподозрить конкретное заболевание можно с помощью типа свечения, благодаря которому легче установить клеточные структуры-мишени для атаки антинуклеарных тел и определиться с тактикой дальнейшего обследования.

Гомогенное (диффузное). Признак системной красной волчанки, лекарственной волчанки. При этом в крови выявляют антитела к ДНК (одно- и двуспиральной), ДНП, гистонам (белкам хромосом, тесно связанным с ДНК).
Периферическое (краевое). Характерно для системной красной волчанки. В сыворотке определяются антитела к двуспиральной нативной ДНК (анДНК).
Крапчатое (сетчатое, гранулярное). Встречается чаще всего, поэтому считается наименее специфичным. Такой тип свечения бывает при системной красной волчанке, смешанных заболеваниях соединительной ткани, синдроме Шегрена, полимиозитах и дерматомиозитах. В крови определяются антитела Sm, РНП, SS-A/Ro, SS-B/La, Jo-1.
Сетчатое крапчатое (цитоплазматическое). Свидетельствует о диффузной форме системной склеродермии, полимиозите, дерматомиозите, аутоиммунном гепатите и первичном билиарном циррозе. В крови циркулируют антитела к Scl-70 и тРНК-синтетазе (в частности, к Jo-1).
Дискретное крапчатое (центромерное). Помогает диагностировать синдром Рейно и CREST-синдром (одной из форм системной склеродермии). В сыворотке определяются антицентромерные антитела.
Нуклеарное (ядрышковое). Характерно для диффузной формы системной склеродермии, болезни Шегрена. В исследуемом материале выявляют антитела к РНК-полимеразе 1, PM/Scl, U3РНП.

Негативный результат говорит об отсутствии антинуклеарных антител. Поэтому нет необходимости проводить более глубокое исследование с использованием таких тестов, как определение антинуклеарных антител методом иммуноблота или иммуноферментный анализ с раздельными антигенами, которые назначают для уточнения диагноза.

В некоторых случаях могут быть получены ложноотрицательные результаты. Это касается определенных цитоплазматических антигенов (например, могут отсутствовать антитела к Jo-1 или рибосомальному Р-протеину).

Что может повлиять на результат анализа?

Ложноположительные данные бывают в следующих случаях:

возраст пациента старше 60 лет;
прием лекарственных препаратов, провоцирующих развитие лекарственное волчанки;

Ложноотрицательный результат бывает при лечении глюкокортикоидами.

В любом случае полученные данные интерпретирует только врач в комплексе с клинической картиной и другими лабораторными анализами. Однако следует учитывать, что положительный результат не всегда свидетельствует об аутоиммунной патологии.