Антирезусные антитела

Парсункова Кермен Анатольевна
Парсункова Кермен Анатольевна Заведующая лабораторией Оптимум,

Изосерология – Антирезусные антитела


Данное исследование направлено на выявление специфических антител к поверхностным белкам эритроцитов (резус-фактору).

Цель проведения анализа:

  • Анализ проводится для диагностики резус-конфликта между матерью и ребенком
  • Прогноз вероятности развития гемолитической болезни
  • Перед подготовкой к переливанию крови
  • При невынашивании беременности

Подготовка к исследованию:

  • Кровь сдают не ранее чем через 4 часа после последнего приема пищи
  • Забор крови проводят утром перед выполнением других медицинских процедур (физиотерапии, рентгена и УЗИ)

Тип биоматериала: венозная кровь

Методы исследования: реакция агглютинации (непрямая реакция Кумбса)

Сроки выполнения: 5-7 дней

Что такое антирезусные антитела?

Резус-фактор представляет собой поверхностный белок мембран эритроцитов. Большинство людей (почти 85%) его имеют и поэтому называются резус-позитивными (Rh+), у некоторых он отсутствует – их называют резус-негативными (Rh-). На состояние человеческого организма отрицательный резус-фактор не оказывает абсолютно никакого влияния. Однако, в том случае, когда будущая мать вынашивает ребенка с противоположной резусной принадлежностью, в ее организме вырабатываются специфические антитела, вступающие во взаимодействие с факторами клеток крови плода – возникает резус-конфликт. Несмотря на такую неадекватную реакцию, первенец резус-негативной женщины редко рождается с какой-либо патологией. Это явление обусловлено тем, что иммунная система матери не контактирует с кровью малыша до самого родоразрешения. Антитела, которые были произведены во время первой беременности, обладают способностью преодолевать транс-плацентарный барьер при последующих беременностях и действовать против клеток резус-положительного плода. 

Исследование крови на антирезусные антитела необходимо всем женщин, которые встали на учет по беременности. Резус-негативным будущим мамам тест повторяют на 18-й неделе гестации, затем – каждую неделю. Своевременно проведенная Rh- беременной женщине иммунотерапия анти-D-γ-глобулином позволяет очистить эритроциты ребенка от присутствующих на их поверхности антигенов.   

Для чего используется исследование?

Выявление наличия алло-иммунных антиэритроцитарных антител имеет важное значение в хирургической, акушерской и реанимационной практике – это необходимо для:

Для чего используется исследование1. Подготовки пациентов к гемотрансфузии, пересадки органов и тканей – чтобы предупредить внесосудистый гемолиз, сопровождающийся разрушением эритроцитов в печени и селезенке.

2. Предотвращения резус-конфликта и ассоциированного с ним фетального эритробластоза плода – патологического состояния, которое приводит к:

  • распаду эритроцитов;
  • повреждению тканей головного мозга и почек;
  • увеличению размеров селезенки и печени – в результате ускорения их функциональной деятельности, направленной на выработку новых клеток крови;
  • сильной гипоксии, провоцирующей развитие в организме ребенка необратимых нарушений;
  • внутриутробной гибели плода или развитию у новорожденного младенца гемолитической болезни, которая обусловлена поступлением в кровяное русло большого количества антител и проявляется желтухой и анемией.

3. Установления причин привычного не вынашивания беременности – потери более 2-х подтвержденных беременностей.

4. Проведения профилактических мероприятий осложнений гестационного периода, приводящих к повышению проницаемости либо нарушению целостности плаценты – это состояние увеличивает вероятность проникновения эритроцитов плода.

5. Контроля эффективности иммунизации пациенток, перенесших гемотрансфузии, травмы живота, инвазивные вмешательства на матке и имевших резус-конфликтные беременности, окончившиеся преждевременным родоразрешением.

Когда обнаружение антиэритроцитарных антител нецелесообразно?

Резус-конфликт при беременностиСкрининговый тест, направленный для выявления алло-сенсибилизированных лиц, не проводится в тех случаях, когда:

  • резус-негативная женщина вынашивает ребенка от резус-негативного отца – развитие иммунологического конфликта невозможно;
  • с момента введения антирезусного иммуноглобулина прошло менее шести месяцев – незначительные концентрации антиэритроцитарных антител не поддаются определению.

Однако, несмотря на перечисленные ограничения, тест обладает высокой прогностической ценностью – его итоговые данные позволяют выявить риск и предупредить развитие резус-конфликта.

Как проводят исследование?

Чтобы обнаружить в образце биологического материала антирезусные антитела используют метод Кумбса – непрямой антиглобулиновый тест. Его выполнение заключается в следующих действиях квалифицированного специалиста:

  • маркируется чистая пробирка и вносится в нее 0,1 мл цоликлона анти-D IgG;
  • добавляется 0,1 мл 5% эритроцитарной массы, предварительно отмытой физиологическим раствором;
  • смесь инкубируется на водяной бане при температуре +37°С в течение получаса;
  • пипеткой Пастера добавляется 5 мл физ. раствора;
  • пробирка центрифугируется на 1200 оборотах в течение 60 секунд;
  • удаляется над-осадок (процедура отмывания эритроцитов повторяется еще 2 раза);
  • Как проводят исследованиек полученному осадку добавляются 2 капли анти-глобулиновой сыворотки и перемешиваются;
  • дозатором добавляется 5 капель физ. раствора;
  • визуально оценивается наличие агглютинации – на отсутствие поверхностного антигена эритроцитов указывает непрозрачная суспензия на дне пробирки, о его наличии свидетельствует присутствие выраженных агглютинатов (склеившихся и выпавших в осадок частиц).

Далее исследуемая сыворотка подвергается титрованию – разведению таким образом, что каждый последующий образец отличается от предыдущего в 2 раза (1:2, 1:4, 1:8, 1:16, 1:32), к каждому из них добавляют резус-позитивные эритроциты. Клетки, которые прореагировали с антителами исследуемого образца, обрабатывают анти-глобулиновой сывороткой. В зависимости от титра разведения сыворотки выдают полуколичественные итоговые данные теста.

Расшифровка результатов исследования


Образец результата анализа Положительным считают результат при выявлении высокого титра антирезусных антител (титр 1:32). 
Отрицательный результат – отсутствие антирезусных антител.
На референсное значение указывает отрицательный результат проведения анализа.

В случае выявления высокого титра антител к резус-фактору следует провести такие дополнительные процедуры:

  • Амниоцентез (проведение исследования околоплодных вод);
  • Кордоцентез (изучение пуповинной крови).

Что такое резус-конфликт и его последствия?


Что такое резус-конфликтРезус-конфликтом называют продукцию антител матери с отрицательным резус-фактором к эритроцитам плода с положительным резусом. Это приводит к гемолизу эритроцитов плода с последующим развитием анемического синдрома. Также гемолиз эритроцитов приводит к выделению токсических продуктов, что отрицательно влияют на органы и системы плода.

Последствия гемолитической болезни плода представлены:

  • Повреждением паренхимы почек;
  • Гипоксией головного мозга;
  • Гепатоспленомегалией (увеличение печени и селезенки в объеме);
  • Гибелью плода;
  • Желтухой или анемией новорожденных (в случае легкой степени резус конфликта).