Антитела к нуклеосомам класса IgG

Кошурин Дмитрий Валерьевич
Анализ крови на антитела к нуклеосомам класса IgG
Иммунологическое исследование крови, которое позволяет обнаружить в организме пациента наличие антиядерных антител изотипа G (IgG) к нуклеосомам – ANuA, проводится для диагностирования системной красной волчанки, оценивания степени тяжести ее течения и мониторинга проводимых лечебных мероприятий.
Характеристики исследования:
- Тип биоматериала: венозная кровь
- Синонимы (rus): антитела к нуклеосоме, серологическая диагностика СКВ
- Синонимы (eng): ANuA, Anti-nuc, ANuAbs, Antibodies to nucleosome
- Метод исследования: иммуноферментный анализ (ИФА).
- Сроки выполнения: 15 дней
Когда делают анализ крови?
Анализ крови на антитела к нуклеосомам класса IgG необходим при:
- подозрении на системную аутоиммунную патологию – наличии у пациента жалоб на лихорадку, высыпания на кожных покровах, судорожный синдром, артралгию, пульмонит, поражение почек, перикардит;
- волчаночном гломерулонефрите, который характеризуется артериальной гипертензией, отечностью, уменьшением суточного диуреза;
- положительном результате анализа на антинуклеарные антитела;
- мониторинге состояния пациентов с СКВ.
Как подготовиться к анализу крови?
Биологический материал – образец крови из вены. Венепункцию осуществляют в утреннее время (с 8.00 до 11.00), натощак – «голодный» период должен продлиться не менее 6-ти часов.
Накануне анализа пациенту рекомендуется ограничить курение и отказаться от:
- употребления жирных блюд, сока, кофеин-содержащих, сладких газированных и спиртных напитков;
- приема обезболивающих и нестероидных противовоспалительных средств;
- физического и психоэмоционального перенапряжения.
Важность исследования
- определение наличия или отсутствия антител, вырабатываемых против нуклеосом (это исследование более специфично, чем определение анти-dsDNA, так как иммуноглобулины содержатся в крови у более половины пациентов с системной красной волчанкой и другими аутоиммунными процессами);
- подтверждение диагноза системной красной волчанки в комплексе с другими лабораторными тестами, если у пациента наблюдаются характерные признаки патологии;
- определение риска развития других аутоимунных процессов против соединительной ткани, но с учетом клинических симптомов и данных других лабораторных тестов;
- составление прогноза развития болезни, так как степень нарастания антител напрямую влияет на тяжесть поражения внутренних органов и наружных тканей;
- составление правильных методов терапии, при выявлении аутоиммунных антител обязательно назначают дополнительную иммуносупрессивную терапию, чтобы уменьшить уровень иммуноглобулинов и предотвратить повреждение тканей под их влиянием;
- оценка результата от комплексной терапии, при положительной динамике данный вид антител должен полностью устраниться из кровотока.
С негативными симптомами пациент должен обратиться к терапевту, который направит его к ревматологу. Именно этот врач занимается аутоиммунными процессами, в том числе ведением больных с системной красной волчанкой. Если подозревают патологию, первоначально назначают анализ на антитела к ядерным антигенам. Затем рекомендуется определение анти-dsDNA. По этим тестам подтверждают диагноз. Однако в последнее время было выявлено, что определение антител к нуклеосомам более специфично, так как эти иммуноглобулины содержатся у большинства больных. Поэтому исследование входит в комплекс обязательной диагностики при подозрении системной красной волчанки.
Для чего необходим анализ
Лабораторный метод диагностики на определение антител к нуклеосомам необходим для достижения следующих целей:
- подтверждение диагноза системной красной волчанки в комплексе с другими лабораторными анализами;
- определение степени нарастания антител, чтобы судить о легкой, средней или тяжелой степени тяжести болезни;
- оценка причин сыпи на лице в виде бабочки, повышения температуры тела, боли в мышцах и суставах, воспалительных процессов во внутренних органах;
- отслеживание пациентов в стадии ремиссии, чтобы своевременно выявлять нарастание антител, свидетельствующих о переходе в обострение и потребности повторного назначения иммуносупрессивной терапии.
Данные антитела могут встречаться не только при системной красной волчанке, но и других аутоиммунных патологиях против соединительной ткани. Однако тест выполняют только при подозрении СКВ, так как эти антитела чаще встречаются именно при этой форме аутоиммунного процесса.
Особенности исследования
- методика быстрая, от момента сбора венозной крови до выдачи бланка пациенту проходит не более 3 суток в зависимости от загруженности лаборатории;
- в экстренных случаях можно запросить экстренное тестирование, на которое уйдет не более 1 суток (обычно несколько часов);
- полученную венозную кровь обрабатывают так, чтобы получить только плазму, в которой содержатся антитела всех видов;
- в свободной форме антитела выявить невозможно, поэтому требуется добавление реагента, вступающего во взаимосвязь с этими иммуноглобулинами;
- в основе методики лежит взаимодействие антител из плазмы крови пациента и антигенов из реагента, которые должны вступить во взаимосвязь, сформировав иммунные комплексы (их определяют при помощи анализатора);
- в норме антитела к нуклеосомам не встречаются в организме больного, поэтому при отсутствии аутоиммунного процесса против соединительной ткани их выявлять не должны;
- фотокалориметр выявляет иммунные комплексы через прохождение световых лучей, отражающихся от показателя;
- анализатор выявляет не только наличие антител, но и их точное содержание, по степени нарастания титра можно судить о тяжести патологии.
При правильной подготовке пациента и качественном выполнении всех этапов теста данные всегда получаются точными, поэтому врач может опираться на них при постановке диагноза и отслеживании развития болезни в динамике.
Метод исследования
Исследование многоэтапное, но быстрое. Его проведение начинается в кабинете медсестры, где проводят сбор крови у пациента, прошедшего предварительную подготовку. После накладывания жгута и работой кулаком проводят дезинфекцию кожи, куда вводят иглу. Кровь быстро набирается в пробирку. Благодаря антикоагулянту она остается жидкой, сгусток не образуется. После получения ее сразу отправляют в лабораторию, где выполняют оставшиеся действия.
- Центрифугирование. Это методика прокручивания пробирки с венозной кровью на быстрых оборотах. При ее вращении форменные элементы опускаются вниз. Там остается красная часть крови. Жидкая и полупрозрачная плазма вместе со всеми иммуноглобулинами поднимается наверх. Существует более простая методика для получения сыворотки – применение разделительного геля. Достаточно добавить реагент в венозную кровь, затем немного перемешать. Плазма выделяется в верхнюю часть пробирки. После завершения выбранной процедуры сыворотку набирают шприцем в объеме 1 мл. Ее переносят в лунку планшета.
- Смешивание с реагентом. Сами по себе антитела выявить невозможно. Поэтому лаборант добавляет реагент с мечеными антигенами. Постепенно антитела и антигены взаимодействуют друг с другом, образуя иммунные комплексы. Этот процесс долгий, поэтому рекомендуется инкубация, чтобы иммунные комплексы полностью вошли в взаимосвязь. Рядом с опытными образцами ставят контрольную пробу для проверки качества полученного результата.
- Определение антител. В этих целях используют анализатор в виде фотокалориметра. Готовую жидкость с опытной пробой переносят в кювету прибора. На дисплее выбирают длину волны, с которой можно найти антитела. Нажимают на старт, после чего ожидают не более нескольких минут. За это время световые лучи отражаются от комплексов антиген-антитело, распространяясь на датчик. Он подсчитывает эти данные в зависимости от объема полученных световых лучей. Так определяют точный титр аутоиммунных антител к нуклеосомам.
Результаты приходят в удобной распечатанной форме, в бланке будут содержаться результаты пациента и референсные значения для сравнения.
Что означают результаты анализа крови?
Увеличение показателей – положительный результат, который наблюдается при:
- системной красной волчанке;
- склеродермии;
- синдроме «сухих» слизистых покровов;
- смешанной соединительнотканной патологии;
- антифосфолипидном синдроме;
- ревматоидном артрите;
- волчаночно-подобном синдроме;
- инфекционно-воспалительных процессах;
- злокачественных новообразованиях.
Уменьшение параметров ANuA при повторных обследованиях пациентов с системной красной волчанкой подтверждает правильно выбранную тактику иммуносупрессивной терапии и указывает на положительную динамику – снижение риска повреждения почечной паренхимы и возникновения рецидивов заболевания.