Антитела к нуклеосомам класса IgG

Анализ крови на антитела к нуклеосомам класса IgG

Иммунологическое исследование крови, которое позволяет обнаружить в организме пациента наличие антиядерных антител изотипа G (IgG) к нуклеосомам – ANuA, проводится для диагностирования системной красной волчанки, оценивания степени тяжести ее течения и мониторинга проводимых лечебных мероприятий.

Нуклеосома представляет собой структурную часть хромосомы, которая состоит из ДНК, азотистых оснований и белкового комплекса. Свободные нуклеосомы образуются при апоптозе – регулируемой запрограммированной гибели Т- и В-лимфоцитов и эпителиальных клеток. Очень часто этот процесс катализирует аутоиммунную реакцию – выработку специфических антител, воспаление и повреждение тканей. Свободная форма нуклеосом является основным иммуногеном хронической аутоиммунной патологии, которая характеризуется поражением сосудов, соединительной ткани и практически всех органов – системной красной волчанки. При этом заболевании образовываются ауто-антитела к различным компонентам цитоплазмы, клеточного ядра и мембраны. Однако наиболее чувствительным маркером СКВ считаются антитела к нуклеосомам.

Характеристики исследования:

• Тип биоматериала: венозная кровь
• Синонимы (rus): антитела к нуклеосоме, серологическая диагностика СКВ
• Синонимы (eng): ANuA, Anti-nuc, ANuAbs, Antibodies to nucleosome
• Метод исследования: иммуноферментный анализ (ИФА).
• Сроки выполнения: 15 дней

Когда делают анализ крови?

Анализ крови на антитела к нуклеосомам класса IgG необходим при:

• подозрении на системную аутоиммунную патологию – наличии у пациента жалоб на лихорадку, высыпания на кожных покровах, судорожный синдром, артралгию, пульмонит, поражение почек, перикардит;
• волчаночном гломерулонефрите, который характеризуется артериальной гипертензией, отечностью, уменьшением суточного диуреза; 
• положительном результате анализа на антинуклеарные антитела;
• мониторинге состояния пациентов с СКВ.

Как подготовиться к анализу крови?

Биологический материал – образец крови из вены. Венепункцию осуществляют в утреннее время (с 8.00 до 11.00), натощак – «голодный» период должен продлиться не менее 6-ти часов. 

Накануне анализа пациенту рекомендуется ограничить курение и отказаться от:

• употребления жирных блюд, сока, кофеин-содержащих, сладких газированных и спиртных напитков;
• приема обезболивающих и нестероидных противовоспалительных средств;
• физического и психоэмоционального перенапряжения.

Важность исследования

В клинической медицине выделяют множество аутоимунных патологий, поражающих соединительную ткань. Одна из наиболее опасных болезней – системная красная волчанка, при которой высок риск осложнений для внутренних органов, а также летального исхода. Полностью вылечить ее невозможно, однако врач может держать болезнь под контролем, улучшая качество жизни. Для этого требуется установить точный диагноз, применяя комплекс лабораторных анализов, в том числе определение антител к нуклеосомам IgG. Важность исследования опосредована получением следующих данных:

• определение наличия или отсутствия антител, вырабатываемых против нуклеосом (это исследование более специфично, чем определение анти-dsDNA, так как иммуноглобулины содержатся в крови у более половины пациентов с системной красной волчанкой и другими аутоиммунными процессами);
• подтверждение диагноза системной красной волчанки в комплексе с другими лабораторными тестами, если у пациента наблюдаются характерные признаки патологии;
• определение риска развития других аутоимунных процессов против соединительной ткани, но с учетом клинических симптомов и данных других лабораторных тестов;
• составление прогноза развития болезни, так как степень нарастания антител напрямую влияет на тяжесть поражения внутренних органов и наружных тканей;
• составление правильных методов терапии, при выявлении аутоиммунных антител обязательно назначают дополнительную иммуносупрессивную терапию, чтобы уменьшить уровень иммуноглобулинов и предотвратить повреждение тканей под их влиянием;
• оценка результата от комплексной терапии, при положительной динамике данный вид антител должен полностью устраниться из кровотока.

С негативными симптомами пациент должен обратиться к терапевту, который направит его к ревматологу. Именно этот врач занимается аутоиммунными процессами, в том числе ведением больных с системной красной волчанкой. Если подозревают патологию, первоначально назначают анализ на антитела к ядерным антигенам. Затем рекомендуется определение анти-dsDNA. По этим тестам подтверждают диагноз. Однако в последнее время было выявлено, что определение антител к нуклеосомам более специфично, так как эти иммуноглобулины содержатся у большинства больных. Поэтому исследование входит в комплекс обязательной диагностики при подозрении системной красной волчанки.

Для чего необходим анализ

Лабораторный метод диагностики на определение антител к нуклеосомам необходим для достижения следующих целей:

• подтверждение диагноза системной красной волчанки в комплексе с другими лабораторными анализами;
• определение степени нарастания антител, чтобы судить о легкой, средней или тяжелой степени тяжести болезни;
• оценка причин сыпи на лице в виде бабочки, повышения температуры тела, боли в мышцах и суставах, воспалительных процессов во внутренних органах;
• отслеживание пациентов в стадии ремиссии, чтобы своевременно выявлять нарастание антител, свидетельствующих о переходе в обострение и потребности повторного назначения иммуносупрессивной терапии.

Данные антитела могут встречаться не только при системной красной волчанке, но и других аутоиммунных патологиях против соединительной ткани. Однако тест выполняют только при подозрении СКВ, так как эти антитела чаще встречаются именно при этой форме аутоиммунного процесса.

Особенности исследования

Для оценки наличия или отсутствия антител к нуклеосомам проводят иммуноферментный анализ. Это специфическое исследование, которое выявляет точный титр антител, а также характеризуется следующими особенностями:

• методика быстрая, от момента сбора венозной крови до выдачи бланка пациенту проходит не более 3 суток в зависимости от загруженности лаборатории;
• в экстренных случаях можно запросить экстренное тестирование, на которое уйдет не более 1 суток (обычно несколько часов);
• полученную венозную кровь обрабатывают так, чтобы получить только плазму, в которой содержатся антитела всех видов;
• в свободной форме антитела выявить невозможно, поэтому требуется добавление реагента, вступающего во взаимосвязь с этими иммуноглобулинами;
• в основе методики лежит взаимодействие антител из плазмы крови пациента и антигенов из реагента, которые должны вступить во взаимосвязь, сформировав иммунные комплексы (их определяют при помощи анализатора);
• в норме антитела к нуклеосомам не встречаются в организме больного, поэтому при отсутствии аутоиммунного процесса против соединительной ткани их выявлять не должны;
• фотокалориметр выявляет иммунные комплексы через прохождение световых лучей, отражающихся от показателя;
• анализатор выявляет не только наличие антител, но и их точное содержание, по степени нарастания титра можно судить о тяжести патологии.

При правильной подготовке пациента и качественном выполнении всех этапов теста данные всегда получаются точными, поэтому врач может опираться на них при постановке диагноза и отслеживании развития болезни в динамике.

Метод исследования

Исследование многоэтапное, но быстрое. Его проведение начинается в кабинете медсестры, где проводят сбор крови у пациента, прошедшего предварительную подготовку. После накладывания жгута и работой кулаком проводят дезинфекцию кожи, куда вводят иглу. Кровь быстро набирается в пробирку. Благодаря антикоагулянту она остается жидкой, сгусток не образуется. После получения ее сразу отправляют в лабораторию, где выполняют оставшиеся действия.

1. Центрифугирование. Это методика прокручивания пробирки с венозной кровью на быстрых оборотах. При ее вращении форменные элементы опускаются вниз. Там остается красная часть крови. Жидкая и полупрозрачная плазма вместе со всеми иммуноглобулинами поднимается наверх. Существует более простая методика для получения сыворотки – применение разделительного геля. Достаточно добавить реагент в венозную кровь, затем немного перемешать. Плазма выделяется в верхнюю часть пробирки. После завершения выбранной процедуры сыворотку набирают шприцем в объеме 1 мл. Ее переносят в лунку планшета.
2. Смешивание с реагентом. Сами по себе антитела выявить невозможно. Поэтому лаборант добавляет реагент с мечеными антигенами. Постепенно антитела и антигены взаимодействуют друг с другом, образуя иммунные комплексы. Этот процесс долгий, поэтому рекомендуется инкубация, чтобы иммунные комплексы полностью вошли в взаимосвязь. Рядом с опытными образцами ставят контрольную пробу для проверки качества полученного результата.
3. Определение антител. В этих целях используют анализатор в виде фотокалориметра. Готовую жидкость с опытной пробой переносят в кювету прибора. На дисплее выбирают длину волны, с которой можно найти антитела. Нажимают на старт, после чего ожидают не более нескольких минут. За это время световые лучи отражаются от комплексов антиген-антитело, распространяясь на датчик. Он подсчитывает эти данные в зависимости от объема полученных световых лучей. Так определяют точный титр аутоиммунных антител к нуклеосомам.

Результаты приходят в удобной распечатанной форме, в бланке будут содержаться результаты пациента и референсные значения для сравнения.

Что означают результаты анализа крови?

В норме антитела класса IgG к нуклеосомам не превышают 20,0 RU/ml. Этот результат считается отрицательным. 

Увеличение показателей – положительный результат, который наблюдается при:

• системной красной волчанке;
• склеродермии;
• синдроме «сухих» слизистых покровов;
• смешанной соединительнотканной патологии;
• антифосфолипидном синдроме;
• ревматоидном артрите;
• волчаночно-подобном синдроме;
• инфекционно-воспалительных процессах;
• злокачественных новообразованиях.

Уменьшение параметров ANuA при повторных обследованиях пациентов с системной красной волчанкой подтверждает правильно выбранную тактику иммуносупрессивной терапии и указывает на положительную динамику – снижение риска повреждения почечной паренхимы и возникновения рецидивов заболевания.