Антитела к внутреннему фактору Кастла, IgG
Кошурин Дмитрий Валерьевич
Анализ крови на антитела IgG к внутреннему фактору Кастла
Исследование крови, выполненное с помощью иммуноферментного анализа, который позволяет обнаружить наличие антител изотипа G к внутреннему фактору Кастла, проводится для дифференциального диагностирования пернициозной анемии.
- Тип биоматериала: венозная кровь.
- Синонимы (rus): антитела к рецептору фосфолипазы А2 – диагностика мембранозного гломерулонефрита.
- Синонимы (eng): Anti-PLA2R – membranous nephropathy, membranous glomerulonephritis.
- Метод исследования: Иммуноферментный анализ (ИФА).
- Сроки выполнения: 15 дней.
Внутренний фактор Кастла представляет собой гликопротеид, который вырабатывают париетальные гландулоциты (клетки слизистых покровов желудка) для обеспечения всасывания в кишечнике цианокобаламина – витамина В12. Данное биологически активное соединение необходимо для:
- созревания красных кровяных телец – эритроцитов;
- участия в процессах транс-метилирования;
- транспорте водорода;
- синтеза креатина, метионина, холина и нуклеиновых кислот;
- регуляции функциональной деятельности печени и нервной системы.
Недостаток витамина В12 в человеческом организме провоцирует развитие пернициозной анемии (злокачественного малокровия) – опасной патологии кроветворной системы, которая характеризуется общим недомоганием, субфебрильной температурой, повышенной утомляемостью, головокружением, одышкой, тахикардией, бледностью кожных покровов, одутловатостью лица, мышечной слабостью, нарушением стула, изменением походки, нарушением чувствительности и психическими расстройствами.
Уменьшение уровня содержания внутреннего фактора Кастла ассоциировано с выработкой специфических антител – иммунных комплексов, которые подавляют функцию активного белка. Исследование крови, позволяющее выявить и определить их количество, помогает диагностировать ранние стадии В-12 дефицитной анемии.
Важность исследования
Анемия – это уменьшение уровня эритроцитов, которое приводит к гипоксии внутренних органов. Патология может развиваться по многим причинам, в том числе вследствие продукции антител к внутреннему фактору Кастла. Это приводит к недостатку поступления витамина B 12 из кишечника в системный кровоток. Важно выявить первопричину, так как от этого фактора зависят назначаемые методы терапии. Если не подавить негативную реакцию иммунитета, анемия сохранится.
Своевременное проведение анализа предоставляет ряд важных данных:
- дифференциальная диагностика анемии разного типа;
- выявление аутоиммунной природы патологии;
- отслеживание степени тяжести болезни, от которой зависит объем нарастания антител;
- определение правильных методов терапии, в состав которых входит подавление негативной реакции иммунитета, восполнение витамина B 12, что приведет к увеличению концентрации эритроцитов;
- оценка правильности назначаемых препаратов, в случае положительной динамики объем антител снизится, а эритроцитов – увеличится;
- профилактическое обследование пациентов в стадии ремиссии, чтобы выявлять повторную продукцию антител и использовать лечение до развития первых симптомов.
Признаки патологии неспецифические, характерны для многих заболеваний, в том числе для анемии разного вида. Поэтому пациенту назначают множество лабораторных тестов, в том числе определение антител к внутреннему фактору Кастла. Особенно это касается пациентов, у которых наблюдается патология эндокринных органов, что может стать причиной продукции аутоиммунных антител.
Исследование назначает терапевт, гематолог или иной специалист, который заподозрил заболевание. Этот же врач должен заниматься расшифровкой.
Для чего необходим данный анализ
- потребность в определении точного вида анемии при наличии характерных симптомов (головокружение, сниженный аппетит, повышенная утомляемость, бледность кожи, отек языка, одышка и другие);
- отслеживание степени развития патологии в динамике, чтобы своевременно выявлять увеличение или снижение титра антител;
- профилактическая оценка состояния иммунитета в период ремиссии после успешно проведенного лечения пернициозной анемии;
- корректировка лекарств, их дозировок, определение потребности в назначении дополнительных методик для устранения антител и восполнения недостатка эритроцитов.
Без лабораторного анализа невозможно узнать об иммунной природе патологии. Если выявить лишь наличие анемии, назначаемые препараты на основе железа не вызовут результат. Уровень эритроцитов продолжит снижаться, что может стать причиной тяжелой гипоксии внутренних органов. Поэтому в первую очередь требуется определить наличие антител, чтобы устранить их выделение и влияние на гликопротеин, выделяемый в париетальных клетках желудка.
Показания для назначения анализа крови
Выявление IgG к внутреннему фактору Кастла необходимо при:
- наличии у пациента клинических признаков пернициозной анемии;
- обследовании лиц, предъявляющих жалобы на снижение работоспособности и концентрации внимания, спутанность сознания, депрессию, излишнюю кровоточивость десен;
- хроническом тиреоидите;
- болезни Аддисона;
- вторичной аменорее;
- сахарном диабете;
- витилиго;
- нарушении функции репродуктивных органов.
Правила подготовки к анализу
Биологический материал – сыворотка, лишенная фибриногена. Для ее получения у пациента отбирают образец крови из вены – процедуру осуществляют в утреннее время (с 8.00 до 11.00), натощак.
Пациенту рекомендуется за сутки до сдачи крови исключить:
- употребление жирной и жареной пищи;
- распитие спиртных и сладких газированных напитков;
- прием лекарственных препаратов;
- изменение рациона питания;
- курение;
- чрезмерные физические нагрузки;
- стрессовые ситуации.
Особенности исследования
- для оценки титра антител используют венозную кровь, так как в нее вырабатываются иммуноглобулины;
- всю венозную кровь для диагностики не используют, необходимо получить плазму, в которой определяют антитела;
- антитела в чистом виде определить невозможно, для их идентификации добавляют реагент, который избирательно связывается только с иммуноглобулинами к внутреннему фактору Кастла;
- в процессе диагностики определяют суммарные антитела (A, M, G);
- определение концентрации иммунных комплексов основывается на применении фотокалориметра, это аппарат, пропускающий световые лучи сквозь жидкость, они отражаются от антител и регистрируются датчиком;
- тест простой, но информативный, через него выявляют наличие антител, а также их точный объем, чтобы судить о тяжести заболевания, нарастании патологии, эффективности терапии;
- диагностику можно часто повторять в острый период или во время ремиссии, так как ее проведение не требует тяжелых инвазивных процедур, а результаты приходят быстро;
- определение антител осуществляют не более 2-3 дней с момента сбора биоматериала (в экстренных случаях тест можно ускорить, чтобы выявить данные в течение одних суток).
Важно помнить, что в случае наличия нескольких тяжелых заболеваний специфичность исследования может снижаться. Поэтому потребуется более детальная дифференциальная диагностика, чтобы выявить точную причину анемии.
Метод проведения анализа
При назначении анализа врач указывает точную дату, когда пациенту требуется прийти в кабинет медсестры для сдачи крови. Предварительно ему необходимо пройти подготовку, чтобы результаты получились точными. Медсестра проводит забор крови с соблюдением правил асептики. Биологическую жидкость размещают в пробирке, добавляя антикоагулянт. Ее сразу же отправляют в лабораторию, где проводят последовательные этапы анализа.
- Получение сыворотки. В венозной крови содержится большое количество компонентов, которые могут помешать проведению анализа. Поэтому предварительно требуется получить сыворотку, где сосредоточены антитела и другие небольшие компоненты. Для этого используют прокручивание на центрифуге или добавление разделительного геля. Обе методики приводят к опусканию форменных элементов на дно, а также выделению сыворотки в верхнюю часть пробирки. При помощи лабораторного шприца с одноразовым наконечником отбирают 1 мл плазмы, перемещая ее в лунку планшета.
- Смешивание с реагентом. Реагент со специфическими антигенами добавляют в лунку, где уже содержится плазма. Жидкости должны вступить во взаимосвязь, чтобы сформировать иммунные комплексы антиген-антитело. Для ускорения реакции используют инкубирование, увеличивая температуру до нормы человеческого организма. Затем проводят отмывку, чтобы устранить не связавшиеся антитела.
- Измерение показателя на фотокалориметре. Готовый образец жидкости наливают в кювету аппарата. На экране программируют длину волны, которая будет проходить сквозь жидкость. Если в пробирке присутствуют иммунные комплексы, произойдет отражение световых лучей, что зафиксирует аппарат. Так можно вычислить наличие каждого комплекса антиген-антитело.
В конце исследования аппарат распечатывает бланк. В нем определяют референсные показатели и данные пациента, сравнивая эти значения.
Важные критерии
- требуется первоначально пройти комплексное обследование, так как пернициозную анемию могут вызвать тяжелые заболевания эндокринной системы, тогда потребуется терапия и этой патологии, иначе устранить ее будет невозможно (даже при употреблении иммуносупрессивных препаратов);
- при определении диагноза учитывают данные иммуноферментного анализа, а также других лабораторных тестов, общего обследования, истории болезни, проявляющихся симптомов (комплексная диагностика позволит определить точный повреждающий фактор).
Для получения точных сведений о наличии или отсутствии аутоиммунных антител рекомендуется провести несколько исследований с промежутком в 2-3 недели.
Расшифровка анализа крови
В организме здорового человека количество иммуноглобулина G к внутреннему фактору Кастла не превышает 6,0 AU/ml. Этот результат – отрицательный, который опровергает аутоиммунное воздействие на синтез гликопротеина.
Увеличение показателей подтверждает тот факт, что возникновение анемии обусловлено дефицитом в организме пациента витамина В12.