BCR-ABL p210 (b2a2) (b3a2) - t(9;22) (количественно)

Парсункова Кермен Анатольевна
Автор статьи

Парсункова Кермен Анатольевна

Заведующая лабораторией Оптимум, Кандидат медицинских наук,
Цена 13990 *
Срок исполнения до 12 дн. (рабочие дни)
Код услуги HE42
* - Взятие биоматериала оплачивается отдельно

ПЦР анализ относительной экспрессии гена BCR/ABL

Количественное исследование BCL-ABL p210 (b2a2)(b3a2) – t(9;22) требуется для подтверждения диагноза хронического миелолейкоза, при котором вырабатывается повышенное количество стволовых клеток.

Данный злокачественный процесс, который при отсутствии своевременной диагностики или лечения быстро приводит к смертельному исходу. Поэтому важно провести анализ при малейшем подозрении на хронический миелолейкоз. Его назначает гематолог, онколог. Любой из этих специалистов может провести точную расшифровку полученных данных.

Тип биоматериала: венозная кровь

Синонимы (rus): транскрипт химерного гена BCR-ABL.

Синонимы (eng): BCR/ABL1, mRNA Detection, Reverse Transcription-PCR (RT-PCR)

Метод: Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени

Для чего необходим анализ BCL-ABL p210

Количественное исследование BCL-ABL p210Хронический миелолейкоз опасен продолжительным отсутствием проявления клинических симптомов. По мере развития патологии прогрессирует злокачественный процесс, который на поздних стадиях устранить практически невозможно. Поэтому исследование проводят в целях профилактики в случае, если врач подозревает генетическое нарушение, которое может привести к патологии. Анализ в данном случае выполняют для получения следующей информации:

  • определение первоначального диагноза хронического миелолейкоза при его наличии;
  • дифференциальная диагностика между разными видами злокачественного процесса, которые вызывают повышенную продукцию стволовых клеток и приводят к негативной симптоматике со стороны самочувствия пациента;
  • оценка потребности в назначении химиотерапевтических препаратов, так как их применяют только при доказанном злокачественном процессе из-за большого списка побочных эффектов и негативного влияния даже на здоровые ткани;
  • определение эффективности назначаемой терапии в процессе ее применения, а также после завершения полного цикла химиотерапии, чтобы судить о качестве назначенных методов и потребности дальнейшего лечения в случае низкого результата;
  • отслеживание пациентов в период ремиссии, чтобы вовремя определять возможность наступления рецидива, при котором потребуется новый курс химиотерапии (в данном случае можно избежать обильного прогрессирования злокачественного процесса и осложнений в виде метастазов в другие органы).

Результаты исследования приходят относительно быстро. Они достоверные, информативные и высокоспецифичные. Поэтому после получения первых результатов можно с точностью судить о наличии или отсутствии хронического миелолейкоза, чтобы сразу приступить к терапии или судить о ее результате.

Когда назначают анализ

Назначение на исследование получают в диагностических и лечебных целях:

  • первичная диагностика хронического миелолейкоза, если ранее проводился общий анализ крови, в котором выявили отклонения в уровне лейкоцитарных клеток;
  • дифференциальная диагностика хронического миелолейкоза от других опухолевых патологий красного костного мозга, системы крови;
  • повторное назначение анализа для отслеживания эффекта терапии, в этом случае диагностику повторяют каждые 3 месяца до тех пор, пока уровень продукции патологического гена BCR-ABL не снизится меньше 1%;
  • отслеживание пациентов в стадии ремиссии, после ее наступления 2 года подряд проводят лабораторную диагностику 1 раз 3 месяца, затем 1 раз в 6 месяцев.

Обычно исследование в целях профилактики не назначают. Единственное исключение – это наличие разных видов злокачественных процессов системы крови у близких родственников. В этом случае тест рекомендуется проводить при планировании беременности. Также исследование назначают для взрослых людей, у которых есть родственники с диагнозом миелолейкоз. Так можно своевременно выявить возможность развития патологии, чтобы провести эффективное лечение, предупредив риск осложнений или летального исхода.

Подготовка к анализу

Забор крови из веныДля диагностики лечащий врач назначает сдачу венозной крови. Перед этой процедурой проходят предварительную подготовку, которая начинается за 7-10 дней:

  • при назначении лабораторного теста врач расспрашивает пациента обо всех употребляемых препаратах, он может исключить часть из них, если действующие вещества могут повлиять на функцию красного костного мозга или клеточный состав крови;
  • запрет употребления любых новых лекарств, которые не были оговорены с врачом при назначении анализа;
  • запрет проведения любых процедур, которые сопровождаются даже малейшими дозами облучения, так как оно может повлиять на продукцию клеток (даже незначительные изменения могут повлиять на результат);
  • запрет употребления алкогольных напитков за 1-2 дня;
  • отсутствие курения за 1 час до сдачи крови.

Все ограничения и запреты снимаются после сбора биологического материала. К лечению можно приступать только после получения данных от исследований, которые обычно приходят в течение 2-3 дней.

Метод проведения анализа

При потребности изучения гена, который может вызвать хронический миелолейкоз, рекомендуется проведение полимеразной цепной реакции в режиме реального времени. Исследование сложное, проводится в несколько этапов сразу после получения образца крови.

  1. Соединение биоматериала пациента с реагентами. В пробирке соединяют 1 мл венозной крови с праймером, который ограничивает участок гена, подлежащего изучению в ходе исследования. То есть выделяется его отдельная часть. После добавления ДНК-полимеразы цепочка ДНК начинает раскручиваться, чтобы сформировать отдельные нити. В этот момент в цепь встраиваются нуклеотиды, которые необходимы для дальнейшей остановки реакции, когда цепи полностью раскрутятся.
  2. Нанесение полученного биоматериала на полиакриламидный гель. Образец жидкости полностью пропитывает гель, где происходит процесс раскручивания цепей ДНК до конца. В этот момент реагируют нуклеотиды, останавливая этот процесс, чтобы оборудование смогло идентифицировать, считать данный участок.
  3. Применение ПЦР-оборудования. Это сложный аппарат, который считывает и расшифровывает участок ДНК в биоматериале. Процедура происходит посредством детекции встроенных нуклеотидов в цепи ДНК. Сведения подлежат регистрации, благодаря чему происходит постройка графика. Уже на этом этапе можно определить наличие или отсутствие патологического гена. Но для упрощения расшифровки материала анализатор распечатывает данные в процентном соотношении.

Важно понимать, что при правильно подобранном лечении экспрессия патологических генов в кровоток будет со временем снижаться, достигая до необходимого минимума. Это тоже можно обнаружить посредством ПЦР диагностики.

Расшифровка анализа

О положительной реакции свидетельствует показатель патологического гена от 0,1% и более. Если в ходе продолжительного лечения химиотерапевтическими препаратами был достигнут показатель 0,1%, это свидетельствует о наступлении ремиссии. В таком случае анализ требуется периодически повторять.

Полное отсутствие риска развития хронического миелолейкоза можно подтвердить при получении данных 0,001% или меньше.

Что такое хронический миелолейкоз

Хронический миелолейкозХронический миелолейкоз – это опухолевое заболевание, распространяющееся на красный костный мозг и кровеносную систему. Вследствие патологического формирования стволовых клеток увеличивается уровень лейкоцитов. Этот процесс развивается из-за генетического дефекта, который определяют в процессе лабораторного анализа. Выявляют наличие филадельфийской хромосомы, которая у здоровых людей встречаться не должна.

В норме ген ABL локализуется на девятой хромосоме. Он требуется для роста и развития стволовых клеток, из которых образуются дальнейшие клеточные элементы. Если у пациента развивается хронический миелолейкоз, можно обнаружить следующие изменения:

  • ген ABL перемещается с 9 на 22-ю хромосому (формируется транслокация);
  • область перемещения патологического гена разрывается, что повреждает ген BCR (считается, что его функция заключается в дифференцировке стволовых клеток, однако эти данные не подтверждены);
  • формируется взаимосвязь между генами, что приводит к комплексу BCR-ABL, посредством работы которого выделяется белок p210;
  • иногда поломки в хромосомах возникают ближе или дальше от ее центра, что тоже можно выявить в ходе исследования.

В итоге мутаций нарушается регуляторный механизм, активирующий деление клеток. В системный кровоток поступают лейкозные клетки, которые не самоуничтожаются при действии сигналов. Они выходят из костного мозга в кровь до полного созревания.