Candida Albicans (ПЦР)

Доронин Иван Михайлович
Доронин Иван Михайлович Заведующий отделом ПЦР и генетики,

Молекулярно-биологическое исследование на Candida albicans


Одним из наиболее распространенных видов условно патогенных грибов является Candida albicans. Наиболее оптимальным условием для жизнедеятельности микроорганизмов является среда с температурой 32 -37 °С и рН – 5,8-6,5. 
Candida albicansПо этой причине микроорганизм в нормальном количестве обнаруживается у 80 % людей, заселяет слизистые оболочки рта, половых органов, системы пищеварения, кожные покровы. Чрезмерной колонизации препятствует нормальная микрофлора организма человека. При ослаблении иммунитета, нарушениях функций защитной системы начинает активно размножаться, вызывая различные заболевания. Особенно поражает людей, инфицированных ВИЧ, с онкозаболеваниями и сахарным диабетом. Этот дрожжеподобный грибок также может передаваться от матери новорожденному в родовых путях.

Причины развития кандидоза:

  • неконтролируемый прием антибактериальных лекарственных средств;
  • наличие сопутствующих заболеваний - патологии щитовидной железы, сахарный диабет;
  • преобладание в рационе питание продуктов с повышенным содержанием сахара и углеводов;
  • прием иммунодепрессантов, оказывающих угнетающее воздействие на функционирование иммунной системы (стероидные гормональные средства, химиотерапевтические препараты);
  • иммунодефицитные состояния: физиологические (беременность, период менструации, лактация) и патологические (онкология, СПИД, перенесенная трансплантация органов);
  • продолжительное применение контрацептивов.

Влияние Candida albicans на организм


Несмотря на то, что кандидоз не является инфекцией, передающейся половым путем, при половых контактах с лицами, больными кандидозом, может начаться воспаление. У женщин проявляется, как правило, в виде так называемой «молочницы», которая сопровождается зудом половых органов, характерным запахом, творожистыми выделениями. У мужчин чаще всего поражается крайняя плоть.
Candida albicans также является причиной заболеваний полости рта, пищевода. При пониженном иммунитете гриб может проникать в дыхательную систему, вызывая кандидозную пневмонию. Микроорганизм также является внутрибольничной инфекцией мочевыводящих путей.

Клиническая симптоматика

При развитии кандидоза могут проявляться такие характерные признаки патологического процесса, как:

  • Боль при мочеиспусканиичастое, затрудненное и болезненное мочеиспускание;
  • дискомфорт и болевые ощущения при половом акте;
  • увеличение лимфатических узлов, расположенных в области паха;
  • отечность, покраснение слизистой гениталий; 
  • мелкая красная сыпь на коже промежности. 

Виды кандидоза:

  • Острый. Возникает спонтанно, под воздействием определенных факторов, провоцирующих стремительное размножение дрожжеподобного грибка (прием антибиотиков, иммунодефицитные состояния и т.д.). Протекает с выраженными характерными симптомами. При правильном и своевременном лечении острый кандидоз завершается выздоровлением пациента. 
  • Хронический кандидоз. В большинстве случаев развивается по причине недостаточной эффективности терапии или ее отсутствия в период острой стадии патологии.  Проявления заболевания могут беспокоить пациента на постоянной основе или только во время обострения, сменяющегося впоследствии периодом ремиссии.

Показания для проведения исследования


Молекулярно-биологический анализ на Candida albicans проводится в случаях:

  • проявления признаков кандидозного вульвовагинита, баланопастита и других заболеваний, вызываемых Candida albicans;
  • контроля эффективности противогрибковой терапии;
  • хронических заболеваний мочеполовой системы;
  • обследования при планировании беременности;
  • диагностики возбудителя пневмонии;
  • наличие у пациента инфекций, передающихся половым путем (с целью исключения урогенитального кандидоза);
  • подтверждение урогенитального кандидоза у полового партнера; 
  • поражение кожных покровов и слизистых оболочек, развившихся на фоне терапии антибиотиками;
  • воспалительный процесс в полости рта, носящих острый или хронический характер;
  • подозрение на кандидоз любой локализации;
  • в качестве профилактического скринингового обследования.

Подготовка к анализу на Candida albicans


Пациентам рекомендуется придерживаться следующих правил до сдачи соскоба для анализа на Candida albicans:

  1. Подготовка к анализу на Candida albicansзабор материала не проводится в дни менструаций и в течение 3 дней после у женщин;
  2. за два дня до анализа необходимо воздержаться от сексуальной активности;
  3. перед исследованием недопустимо подмываться – гигиенические процедуры проводятся вечером накануне исследования;
  4. интравагинальные спринцовки до исследования запрещены;
  5. за несколько дней до исследования стоит отменить прием антибиотиков и гормональных средств, а также использование вагинальных свечей, если таковые применялись;
  6. предупредите врача о принимаемых лекарствах, так как некоторые из них могут повлиять на результат анализа;
  7. рекомендуется не мочиться за 2 часа до анализа.

Как происходит сбор биологического материала?


  • У мужчин. Стерильным ватным тампоном медработник обрабатывает область наружного отверстия уретры. В мочеиспускательный канал медленно вводится тонкий капроновый зонд (глубина погружения – 2-3 см). Путем вращательного движения зондом производится соскоб клеток эпителия, после чего отправляется в пробирку.
  • У женщин. Женщина ложится в гинекологическое кресло. Медработник, используя зеркало, обнажает шейку матки и проводит осмотр половых путей. Чистым ватным тампоном проводится обработка наружного отверстия уретры. Вглубь мочеиспускательного канала вводится щеточка, путем однократного вращательного движения которой происходит сбор отделяемого слизистых оболочек. Щеточка с находящимся на ней изъятым биологическим материалом помещается в пробирку, где споласкивается в ее содержимом (транспортной среде). 

Методика проведения анализа


Candida albicans выявляется молекулярно-биологическим анализом посредством метода полимеразной цепной реакции. Данный способ выявления микроорганизма состоит из трех этапов: выделения ДНК гриба, размножения определенных фрагментов их его идентификация. Это современный метод диагностики, чувствительность которое достигает 90 %, а специфичность – 98 %.

Молекулярно-биологическое исследование на Candida spp. в динамике

Анализ на Candida albicansПовторный анализ на грибы рода кандида рекомендуется проходить по прошествии 2 недель с момента завершения лечебных мероприятий. Это позволит оценить терапевтический эффект и при благоприятном течении констатировать выздоровление пациента. Повторное исследование рекомендуется сдавать в том же учреждении, где проходил сбор биологического материала для проведения первоначального анализа. Это необходимо для наибольшей достоверности итоговых значений, поскольку в процессе исследований не происходит смены аппаратуры или тестовой системы.


Интерпретация результатов исследования


Отрицательное значение анализа может интерпретироваться двояко: отсутствие либо незначительная концентрация микроскопического гриба в исследуемом образце. Положительный результат свидетельствует о наличии Candida albicans. Метод ПЦР позволяет лишь приблизительно судить о количестве микроорганизмов, поэтому окончательный диагноз ставит врач, который при необходимости назначает дополнительное обследование.

Интерферирующие значения

На достоверность молекулярно-биологического исследования на грибы рода кандида может оказать непосредственное влияние терапия, проводимая на основе противогрибковых препаратов. Прием антимикотических средств приводит к снижению концентрации Candida spp в исследуемом биологическом материале. Это в свою очередь может явиться причиной ложноотрицательных итоговых значений анализа.

Итоговые значения молекулярно-биологического исследования на Candida spp. могут интерпретироваться только врачом. Самостоятельная интерпретация лабораторных анализов не допустима. Самолечение патологии может спровоцировать ее хронизацию с последующими частыми рецидивами. Неверно выбранный препарат для лечения кандидоза или неадекватная его доза вызовут возникновение резистентности к медикаменту.

Постановка окончательного диагноза ставится на основе анамнеза, особенностей протекания патологии, жалоб пациента и сведений, полученных при проведении лабораторных анализов.

Значение своевременной диагностики кандидоза

Значение своевременной диагностики кандидозаНаличие у пациентов симптомов, характерных для кандидоза, является абсолютным показанием к проведению молекулярно-биологического исследования на Candida spp. Своевременная постановка соответствующего диагноза и проведение необходимой лекарственной терапии позволяют избежать вероятных осложнений кандидоза. К их числу относится: 

  • У мужчин: формирование таких хронических заболеваний, как: баланопостит, баланит, уретрит, простатит, орхит.
  • У женщин: развитие протекающих в хронически форме оофорита, сальпингита, уретрита, цистита. 

В особо тяжелых случаях может иметь место развитие генерализованного кандидоза, осложнения которого отличаются повышенной опасностью и включают в себя:

  • сужение уретры и крайней плоти;
  • стеноз влагалища;
  • нарушение процессов пищеварения;
  • развитие аллергических реакций;
  • возникновение психических расстройств.