Цитология: отпечатки с конъюнктивы

Анализ отпечатков с конъюнктивы

Цитологическое исследование отпечатков с конъюнктивы проводится при слезотечение, зуде, жжение, светобоязни, наличия выделений из глаза, отеках и необходимо для диагностики различных конъюнктивитов. 

Конъюнктивиты имеют бактериальную, вирусную и аллергическую природу. Иногда поражение глаз отмечается при системных патологиях: туберкулезе, кори, краснухе, метастазировании опухоли в конъюнктиву. Злокачественные опухоли конъюнктивы встречаются достаточно редко, в большинстве случаев рак развивается у ВИЧ-положительных пациентов. Из доброкачественных новообразований диагностируются папилломы, пигментные и беспигментные невусы.

Показания к проведению анализа

Исследование отпечатков с конъюнктивы назначается в следующих случаях:

• при тяжелых гнойных конъюнктивитах,
• при фолликулярных конъюнктивитах для дифференцировки вирусной и хламидийной инфекции,
• при воспалениях слизистой оболочки глаза,
• при подозрении на онкологический процесс,
• при заболеваниях глаз у людей с иммунодефицитами,
• при конъюнктивитах у новорожденных детей.

Методика проведения анализа

Взятие отпечатка с конъюнктивы является менее травматичной процедурой, чем соскоб. Материал для исследования берут с роговицы или конъюнктивы нижнего века. Предварительно закапывают глаз анестезирующими каплями. Затем при помощи пинцета прижимают к слизистой оболочке глазного яблока, роговице, внутренней поверхности век стерильный диск из целлюлозно-ацетатного фильтра или мягкую контактную линзу. Для каждого глаза используют отдельную линзу.

Затем мазки-отпечатки высушивают на воздухе и фиксируют метиловым спиртом или ацетоном. Готовые мазки окрашивают при помощи различных гистологических методик и изучают под микроскопом.

Важность исследования

Конъюнктива глаз напрямую соприкасается с окружающей средой, не имеет никаких защитных оболочек. Поэтому в этой области часто развиваются патологические процессы, вызывающие воспаление, повреждение. Симптоматика каждого из них не специфична, сопровождается покраснением зоны конъюнктивы. Поэтому для дифференциальной диагностики врачи-офтальмологи часто назначают цитологическое исследование отпечатков с конъюнктивы, чтобы тщательно изучить клеточный состав.

Если своевременная диагностика или лечение отсутствуют, патология будет со временем прогрессировать, что может повлечь за собой ряд осложнений:

• распространение патологического процесса конъюнктивы на другие структуры глазного яблока (например, таким свойством обладает бактериальная инфекция);
• тяжелые повреждения структуры тканей, сопровождающиеся сильной болью;
• обильное разрастание злокачественных клеток, которые могут на поздних стадиях располагаться не только в зоне конъюнктивы, но и в любых других областях глазного яблока;
• переход злокачественных клеток по кровотоку и лимфе в другие зоны организма с развитием метастазов и дальнейшим образованием вторичной опухоли (прогноз становится неблагоприятным);
• повреждение не только зоны конъюнктивы, но и глубоких структур глазного яблока, что может привести к ухудшению остроты зрения или полной слепоте.

Только с помощью этого анализа можно отследить развитие патологии конъюнктивы даже на клеточном уровне, чтобы выявить следующие факторы:

• точный повреждающий фактор, вызывающий симптомы;
• степень распространения повреждающего фактора, оценка тяжести развивающейся патологии;
• оценка риска развития доброкачественной или злокачественной опухоли, которая чаще всего встречается у пациентов с иммунодефицитом;
• подбор методов лечения, зависящих от причины поражения.

Часто офтальмологи назначают лечение без лабораторно-инструментальных тестов. Это может быть ошибочным, так как причина симптоматики установлена неверно. Поэтому болезнь продолжает прогрессировать и проникать глубже в ткани. Например, если не установить раковый процесс на ранних стадиях, атипичные клетки начнут прорастать вглубь глазного яблока, поэтому устранить такую патологию будет затруднительно. Для исключения риска подобных действий рекомендуется своевременно проходить цитологическое исследование отпечатков с конъюнктивы.

Для чего необходим анализ

Цитологическое исследование отпечатков с конъюнктивы необходимо для достижения следующих целей:

• оценка клеточной структуры поверхностных участков конъюнктивы;
• своевременное выявление разрастания клеток доброкачественной или злокачественной природы (особенно у пациентов из группы риска с наличием ВИЧ-инфекции или другого иммунодефицита);
• отслеживание других причин хронического воспалительного процесса конъюнктивы – механическое повреждение, бактериальная или вирусная инфекция, грибок, аллергия;
• подбор правильных методов лечения, которые напрямую зависят от причины симптомов после осмотра содержащихся клеток;
• отслеживание результата терапии, при положительном эффекте клеточный состав должен постепенно нормализоваться.

Так как большинство причин повреждения приводит лишь к воспалению конъюнктивы, визуально отследить повреждающий фактор невозможно. Для этого следует изучить клеточный состав.

Особенности анализа

При проведении цитологического исследования отпечатков с конъюнктивы учитывают ряд особенностей:

• исследование можно проводить многократно, так как для сбора биоматериала достаточно выполнить отпечаток, который безболезненно переносится пациентами благодаря предварительному проведению местной анестезии;
• с помощью многократного исследования отслеживают динамику развития болезни и эффект лечения;
• взятый биоматериал требуется мгновенно зафиксировать спиртом, так как в течение каждой секунды происходят изменения в клеточной структуре;
• анализ заключается в окрашивании образца клеток и их дальнейшем изучении под микроскопом;
• исследование должен проводить цитолог, который может провести дифференциальную диагностику между общими повреждающими факторами, а также возможностью развития злокачественного процесса;
• в процессе обработки биоматериала требуется создавать не менее 3х стекол, чтобы изучить большое количество клеток, не упустить начальной стадии патологии с минимальным количеством дефектных элементов.

Если в процессе диагностики выявлены любые отклонения, стекла требуется сохранить. Подпись с данными пациентами указывают на стекле и конверте, где оно хранится. При повторной диагностике врач сможет сравнить результаты разных анализов, отслеживая динамику болезни, эффект терапии.

Подготовка

Перед сдачей образца тканей требуется пройти последовательные этапы подготовки:

• составление списка всех употребляемых лекарств, которые передают лечащему врачу;
• устранение применения лекарств, которые исключил врач (желательно делать это за 1 неделю);
• запрет приема новых средств, информацию о которых не передавали врачу;
• отсутствие обработки области глаз любыми жидкостями, в том числе лекарственными средствами за сутки до теста.

Других подготовительных этапов не требуется, так как на патологии в области глаз влияет небольшое количество факторов. После сдачи биоматериала все запреты снимаются.

Метод исследования

После взятия биоматериала приступают к этапам теста:

• полученный отпечаток клеток сразу перемещают на предметное стекло, которое было предварительно стерилизовано и обезжирено;
• до отправления в лабораторию проводят фиксацию спиртом;
• располагают стекло по рельсам, дожидаясь высушивания;
• капают небольшое количество красителя, чтобы он занимал всю область стекла;
• смывают краситель через 30 минут, используя обычную воду;
• повторно сушат стекла без распространения прямых солнечных лучей или применения приборов;
• располагают каждое стекло по очереди под микроскопом, закрепляя держателем;
• капают иммерсионное масло, располагая в нем глазок микроскопа;
• постепенно отдаляют окуляр до момента четкого просмотра клеток, при этом глазок должен оставаться в масле;
• постепенно перемещают окуляр по всему предметному стеклу, изучая морфологию клеток.

В конце лабораторного исследования все данные записывают в бланк. Указывают характеристики нормальных клеток, а также все выявленные отклонения. Особенно тщательно рассматривают атипичные клетки.

Важные критерии

При проведении лабораторного теста не забывают про важные критерии:

• в постановке диагноза требуется учитывать не только сведения от лабораторного анализа, но также других диагностических тестов, историю болезни, симптоматику;
• выявление нескольких атипичных клеток не всегда свидетельствует о возможности развития опухоли, требуется периодически повторять тест, чтобы следить за возможностью увеличения этих элементов.

По результатам лабораторного теста можно обнаружить не одно, а сразу несколько отклонений. Тогда пациенту потребуется комплексное лечение.

Расшифровка результатов анализа

Цитологическое исследование позволяет выявить дистрофические изменения клеток эпителия, наличие в мазке клеток иммунной системы и их соотношение. В бланке результатов также содержаться сведения о присутствии в пробе патогенных микроорганизмов. При бактериальных инфекциях в мазке обнаруживается большое количество нейтрофилов. Для заболеваний вирусной этиологии характерен лимфоцитоз. Повышение содержания эозинофилов и базофилов в тканях свидетельствует об аллергической природе конъюнктивита. При опухолях в мазке появляются атипичные клетки.