Цитология: спинномозговая жидкость

Анализ клеток спинномозговой жидкости

Цитологическое исследование спинномозговой жидкости необходимо при диагностике патологий центральной нервной системы.

Образуется спинномозговая жидкость сосудистыми сплетениями головного мозга. Она бесцветна, обладает слабощелочной реакцией, по составу схожа с лимфой. Ликвор содержит глюкозу, белки, аминокислоты, липиды, неорганические вещества и гормоны.

Основными функциями спинномозговой жидкости являются:

• транспорт питательных веществ к нейронам мозга,
• выведение продуктов обмена нервных тканей,
• поддержание гомеостаза,
• защита мозга от травм.

При заболеваниях, провоцирующих повреждение гематоликворного барьера, состав спинномозговой жидкости изменяется. В ликворе появляются эритроциты, увеличивается количество клеток иммунной системы, изменяется соотношение альбуминов и глобулинов. Возрастает давление в субарахноидальном пространстве.

Показания к проведению анализа

Микроскопический анализ спинномозговой жидкости назначается в следующих случаях:

• при подозрении на опухоли структур мозга,
• при инфекционных заболеваниях мозга и его оболочек,
• при внутричерепных кровоизлияниях и травмах,
• при инсультах,
• при димиелинизирующих поражениях нервной системы,
• при синдроме Гиенна-Барре,
• при комах и других расстройствах сознания,
• при лихорадке невыясненной этиологии.

Подготовка к люмбальной пункции

Процедура люмбальной пункции проводится натощак, за 4 часа до забора спинномозговой жидкости нельзя пить.

После пункции в течение нескольких часов пациент должен находится под наблюдением врачей. При отсутствии осложнений в течение 2-3 дней нужно соблюдать постельный режим.

Методика проведения анализа

Для получения образца спинномозговой жидкости делают пункцию субарахноидального пространства. Ткани нервной системы при этом не должны повреждаться. Прокол делается ниже 2 поясничного позвонка под местной анестезией. Для исследования достаточно 2-3 мл ликвора. Полученный пунктат центрифугируют, осадок помещают на предметное стекло и высушивают в термостате. Затем мазки окрашивают различными способами и изучают под микроскопом.

Процедура проходит практически безболезненно, неприятные ощущения возникают только при введении иглы. Осложнения после пункции отмечаются достаточно редко. Как правило, они связаны с неправильной техникой проведения процедуры.

Важность исследования

В любом отделе организма могут развиваться патологические процессы. В том числе это касается и нервной системы. В этой области может образовываться кровотечение, инфекция, новообразования, другие дефекты. Для проведения дифференциальной диагностики, выявления точного повреждающего фактора требуется изучить клеточный состав спинномозговой жидкости. Для этих целей проводится цитологическое исследование. Так можно быстро добиться следующих целей:

• установка точного диагноза;
• определение первичного повреждающего фактора;
• подбор правильных методов терапии;
• отслеживание динамики развития патологии;
• оценка завершенного лечения.

При отсутствии проведения цитологического исследования может быть установлен неверный диагноз или вовсе не определена причина поражения. При отсутствии адекватных методов терапии быстро разовьются следующие осложнения:

• обильное кровотечение, которое впоследствии будет сдавливать здоровые ткани головного или спинного мозга, вызывая паралич, угнетение дыхания, смертельный исход;
• развитие менингита и энцефалита под влиянием инфекции;
• угнетение когнитивных и других функций организма под влиянием демиелинизирующего поражения;
• распространение доброкачественной опухоли, которая может сдавливать здоровые ткани, подвергаться злокачественному перерождению;
• переход атипичных клеток от злокачественной опухоли с развитием метастазов в других внутренних органах.

Назначить тест может любой лечащий врач, который заподозрил поражение ЦНС. Его проводят только в лечебных целях при появлении негативных клинических симптомов. Спинномозговая пункция при неправильном проведении может вызывать осложнения, поэтому для профилактики ее не применяют. Но только с помощью этого анализа можно с точностью установить диагноз, быстро подобрав методы лечения.

Для чего необходим анализ

Диагностический тест проводят для получения информации, требующейся в процессе диагностики и подбора терапии:

• определение причин неврологической симптоматики;
• дифференциальная диагностика злокачественного новообразования с другими болезнями, вызывающими схожие симптомы;
• выявление вида раковой опухоли;
• оценка степени тяжести развития новообразования, которое зависит от объема атипичных клеток и степени упрощения их структуры;
• дифференциальная диагностика демиелинизирующей патологии;
• определение наличия инфекции, а также ее точного вида;
• оценка риска внутричерепных кровоизлияний, при которых кровь достигает до спинного мозга;
• подбор правильных методов терапии в зависимости от выявленной причины проявляющихся негативных симптомов (антибиотики, цитостатики, лучевая или химиотерапия);
• оценка уже проведенного лечения, чтобы судить о его качестве, назначать вспомогательные методики при недостаточном результате.

Назначение на исследование выдает только лечащий врач. Это может быть невролог, онколог, инфекционист или другой специалист. Для профилактики анализ не проводят.

Особенности анализа

При выполнении цитологического исследования спинномозговой жидкости учитывают ряд особенностей:

• биологический материал для проведения исследования – спинномозговая жидкость;
• для взятия образца требуется спинальная пункция, это инвазивная процедура, которая причиняет дискомфорт и может вызвать осложнения, поэтому метод назначают в крайних случаях;
• биологическую жидкость хранят в стерильных условиях, недопустимо распространение посторонних микроорганизмов и веществ;
• суть исследования заключается в приготовлении препарата из небольшого количества спинномозговой жидкости, который впоследствии окрашивают и просматривают под микроскопом;
• одновременно изучают содержание компонентов, которые относятся к варианту нормы и патологии;
• создают не менее 3-4 препаратов, чтобы просмотреть максимальное количество клеток и других элементов, содержащихся в биоматериале;
• сохраняют созданные препараты на весь период терапии при выявлении патологических элементов, чтобы у врача была возможность сравнивать их с повторным тестом, отслеживая динамику развития болезни и результат лечения.

С помощью исследования изучают клеточную структуру спинномозговой жидкости. Его достаточно выполнить однократно, чтобы подтвердить дифференциальный диагноз. Впоследствии для оценки состояния пациента назначают общеклинические анализы.

Подготовка

Перед выполнением анализа пациент проходит этапы подготовки, чтобы процедура сбора биоматериала не вызвала осложнений, результаты показали достоверные данные:

• указывают все лекарства, которые пациент употребляет на данный момент лечащему врачу;
• исключают все препараты, которые врач запретил за 1 неделю до теста;
• не употребляют любые новые препараты, не входящие в разрешенный список;
• не проводят инструментальную диагностику, сопровождающуюся облучением за 1 неделю.

К лечению приступают только после получения и расшифровки результатов, самостоятельная терапия недопустима.

Метод исследования

Полученный образец ликвора размещают в стерильную пробирку, отправляя в лабораторию. Там его обрабатывают по этапам:

• размещение небольшого количества ликвора на центр предметного стекла;
• фиксация спиртом, который предотвращает дальнейшие видоизменения клеток внутри образца ликвора;
• нанесение нескольких капель разведенного красителя в таком объеме, чтобы он полностью заполнил предметное стекло (остатки красителя будут стекать в емкость под рельсами, на которых установлены стекла);
• смывание красителя проточной или дистиллированной водой, вид жидкости не имеет значения, так как фиксация и окрашивание уже были выполнены;
• сушка полученных препаратов в естественных условиях с отсутствием попадания прямых солнечных лучей или применения приборов с повышенной температурой.

Готовые стекла подписывают и нумеруют. Их по очереди располагают под микроскопом, изучая содержимое. Для лучшего просмотра используют иммерсионное масло и предназначенный для него окуляр. Выявляют возможность содержания атипичных клеток, бактерий, грибов, эритроцитов, лейкоцитов и других элементов.

Важные критерии

При проведении цитологического исследования спинномозговой жидкости учитывают важные критерии:

• в процессе определения точной причины поражения учитывают не только данные лабораторного исследования, но и другие анализы, анамнез, симптомы;
• в процессе цитологического исследования часто обнаруживают сразу несколько отклонений, особенно в случае осложнений;
• если выявлено даже небольшое количество атипичных клеток, требуется консультация онколога, а также проведение повторного анализа;
• обычные исследования выполняют продолжительно, вплоть до 5-7 дней, но если у пациента критическое состояние, его могут провести в течение 1 суток при отметке на лабораторном бланке пометки «cito» (срочно).

Часто при исследовании ликвора выявляют лишь один из симптомов патологии. Например, если будут обнаружены эритроциты, свидетельствующие о кровоизлиянии. Но на основании этих данных невозможно установить точный диагноз. Тогда назначают дополнительные тесты.

Расшифровка анализа

Нормальное содержание клеток в ликворе составляет 0-8*106/л. Плеоцитоз - повышение количества клеток в ликворе, рассматривается как патологический признак.

Эритроциты обнаруживаются в пунктате после кровоизлияний и травматических пункций. Количество лимфоцитов в норме составляет 0-3*106/л и резко повышается при вирусном менингите, нейросифилисе, рассеянном склерозе, хроническом туберкулезном менингите, на стадиях выздоровления после хирургического вмешательства. Плазматические клетки появляются в ликворе только при патологиях, они характерны для бактериальных и вирусных менингитов.

Моноцитоз наблюдается при хроническом воспалении и после операций на мозге. Макрофаги появляются при паренхиматозном или субарахноидальном кровоизлиянии.

Наличие в пунктате нейтрофилов даже в незначительных количествах указывает на острый воспалительный процесс. Эозинофилы появляются при паразитарных и грибных инфекциях, базофилы - при аутоиммунных заболеваниях. Появление атипичных клеток свидетельствует о развитии опухолей центральной нервной системы.