Анализ на HSV 1 HSV 2

Доронин Иван Михайлович
Доронин Иван Михайлович Заведующий отделом ПЦР и генетики,

Молекулярно-биологическое исследование на HSV 1/HSV 2

Исследование позволяет обнаружить в биологическом образце фрагменты генетического материала вирусов простого герпеса 1 и 2 типов (HSV 1 и HSV 2) даже на ранней стадии развития заболевания, когда антитела в крови выявить ещё нельзя.

Чем опасен HSV 1 и HSV 2?

Анализ на HSV 1 HSV 2За счёт массовой распространённости простого герпеса среди ИППП, лёгкой передачи его от человека к человеку, вирус даже после результативной терапии навсегда остаётся в организме. Различают две его разновидности: HSV первого и второго типа. HSV 1 способствует оральному и генитальному инфицированию, в то время как HSV 2 провоцирует возникновение генитального герпеса.

Общим свойством первой и второй разновидности herpes simplex virus является постоянное (от момента инфицирования) наличие возбудителя в человеческом организме. Для вируса характерно нахождение в вялотекущей либо активной форме. Он устойчив к воздействию противовирусных препаратов, потому полностью не исчезает из организма. Манифестное проявление любой разновидности герпетической инфекции говорит о низком иммунном статусе подверженного заражению человека.

Генитальный герпес (преимущественно HSV2) классифицируется как наиболее частая причина ИППП, приводящих к язвам. Неонатальный или врождённый герпес возникает в результате перинатальной или пренатальной (внутриутробной) инфекции между беременными женщинами и новорожденными.

Передача также может происходить при отсутствии симптомов; большинство первичных генитальных инфекций HSV 1, 2 протекают бессимптомно, однако большая часть HSV позитивных, но бессимптомных пациентов продолжают заражать здоровых людей.

После инфицирования вирус транспортируется по чувствительным нервам к телам нервных клеток, где он остаётся в состоянии покоя на всю жизнь. Однако, когда это состояние покоя становится недостижимым, вирус, перемещаясь ретроградно по нервным путям, возвращается, чтобы колонизировать слизисто-кожную область, поражённую снова во время первичной продуктивной инфекции.

Среди причин рецидива выделяют: снижение иммунной функции, стресс, воздействие солнца.

С какой целью назначается скрининг на HSV 1 и HSV 2?

Исследование методом ПЦР выделений из слизистых на Herpes virus 1, 2 может быть полезно при:

  1. Обосновании / опровержении недавно перенесённого первичного заражения первого, второго типов Herpes simplex virus.
  2. Подтверждении / исключении 1, 2 типов простого герпеса у пациентов с ярко выраженной симптоматикой, характерной для Herpes virus (наличием на слизистых язв, пузырьков) либо неонатальной инфекции, спровоцированной ВПГ при необходимости проведения вспомогательной диагностики.
  3. Выявлении возбудителя HSV  1, 2 типов, а также повторных рецидивов скрытой либо хронической инфекции.
  4. Анализе степени риска внутриутробного заражения плода герпетической инфекцией либо передачи инфекции новорожденному от родителей.
  5. Оценке связанных с инфекцией осложнений.
  6. Комплексном обследовании определённых пациентов, в частности тех, которые ведут насыщенную сексуальную жизнь, людей, инфицированных СПИДом и тех, кто ранее уже был заражен HSV .

В каких случаях назначается обследование?

Симптомы HSV на губахИсследование рекомендуется, когда у человека есть симптомы HSV на губах, во рту или на слизистой ануса, половых органов; при наличии факторов риска у бессимптомных пациентов (наличия у полового партнёра рецидивирующего генитального герпеса, повторных незащищённых половых контактах с субъектами в активной фазе, перенесённого сексуального насилия); при наличии симптоматики, характерной для вирусного менингита или энцефалита (лихорадка, постоянные головные боли, ригидность затылочных мышц).

Кроме того, анализ рекомендован беременным с генитальным герпесом в ходе планового наблюдения до родов, женщинам при наличии диагностированной инфекции, передающейся в момент половой близости (ВИЧ, гонореи, сифилиса и др.), с целью ранней диагностики ВПГ и назначения противовирусного лечения.

 Также тест проводится, когда требуется перепроверить положительные либо ложные результаты анализа на антитела класса lgG / lgM к Herpes simplex virus 1-го и 2-го типов, в случае необходимости проведения первичной диагностики HSV у пациентов, непосредственно контактирующих с зараженными HSV, с целью диагностировать вирус простого герпеса 1, 2 при наличии симптоматики, схожей с генитальным герпесом (наличие волдырей в области ануса, гениталий), на этапе подготовки к зачатию. Не менее важен такой скрининг для беременных женщин с целью исключения факта первичного заражения вирусом герпеса 1, 2 типов в период контрольного мониторинга за течением беременности.

Общая информация об исследовании на вирусы герпеса

Вирусы герпеса (Herpesviridae) принадлежат к числу самых распространенных в мире, около 90% людей являются их носителями. Инфекция персистирующая, противовирусные препараты не приводят к полному излечению, но позволяют добиться уменьшения длительности острой фазы и минимизировать клинические проявления заболевания. Стрессы и снижение иммунитета вызывают реактивацию вируса.

При инфицировании HSV1 (вирусом простого герпеса 1 типа) везикулы обычно локализуются на слизистых оболочках ротовой полости, носа, конъюктиве, коже лица. Заражение в большинстве случаев происходит в детстве. Передача вируса возможна воздушно-капельным или контактным путями. Больные особенно заразны при наличии пузырьковых высыпаний.

HSV 2 (вирус простого герпеса 2 типа) - генитальная форма, для которой характерны везикулы на половых органах. Болезненные пузырьки также могут располагаться в анальной области, на ягодицах и бедрах. Вирус проникает в организм во время незащищенных половых контактов с инфицированными партнерами.

HSV 1 и HSV 2 входят в число TORCH-инфекций, способных вызвать патологии беременности, стать причиной аномалий развития плода и выкидышей. Наибольшую угрозу нормальному течению беременности представляет первичное заражение будущей матери, реактивация инфекции менее опасна.

Биоматериал для исследования на HSV 1 HSV 2

Кровь для исследования на HSV 1 HSV  2Кровь (подходит как венозная, так и капиллярная), моча, сперма, слюна, ликвор, мазки из зева и урогенитального тракта, амниотическая жидкость.

Требования к образцу биоматериала

Пробу берут путём аспирации везикулярной жидкости или посредством взятия мазка у основания везикулы или язвы при подозрительных поражениях слизистой рта, губ, вульвы, промежности и др.

Метод исследования на HSV 1 HSV 2

Данное исследование выполняется высокочувствительным методом полимеразной цепной реакции с флуоресцентной схемой детекции (Real-Time PCR).

Специфичность исследования

Обнаружение ВПГ с помощью ПЦР является наиболее специфичным, быстрым и чувствительным методом диагностики урогенитальных инфекций. Диапазон чувствительности ПЦР-детекции составляет 75-100 % при специфичности теста 100 %.

Это более чувствительный и быстрый тест, чем культуральный, который много лет назад считался золотым стандартом диагностики и в настоящее время доступен только в специализированных лабораториях.

Чувствительность теста снижается по мере прогрессирования болезни, распространения очага поражения, возникновения рецидивов. Отрицательный тест на фоне активных поражений не исключает заражения ВПГ, поскольку его выделение носит периодический характер.

Наиболее достоверная диагностика возможна при исследовании отделяемого из слизистых, взятого из новых эрозий и везикул. При этом результативность анализа достигает 70 %. Выявление инфекции методом ПЦР в образце содержимого, взятого из язвенных изъянов, пустулёзных частиц, неинформативно. Потому для достоверности результатов анализа на ВПГ 1, 2 типов рекомендуется повторное молекулярно-биологическое тестирование.

Максимальная восприимчивость теста к возбудителю инфекции наблюдается при заборе биоматериала в момент появления первых высыпаний, в последующие 72 часа наблюдается постепенное снижение чувствительности до 19 %.

Результативность теста падает и при исследовании биоматериала, полученном после прохождения пациентом курса противовирусной терапии. В дальнейшем интерпретацию отрицательных результатов целесообразно проводить с учётом не только этой особенности, но также клинической картины и заключений, полученных в процессе дополнительных обследований.

Подготовка к сдаче анализа на вирус герпеса первого и второго типа

Подготовка к сдаче анализа на вирус герпесаПри взятии на анализ биологических жидкостей или мазка с поверхности кожи и слизистых ротоглотки специальная подготовка не требуется.

При взятии урогенитального мазка рекомендуется придерживаться следующих правил:

  1. Забор материала не проводится в дни менструаций и в течение 3 дней после у женщин.
  2. За два дня до анализа необходимо воздержаться от сексуальной активности.
  3. Перед исследованием недопустимо подмываться – гигиенические процедуры проводятся вечером накануне исследования.
  4. Интравагинальные спринцовки до исследования запрещены.
  5. За несколько дней до исследования стоит отменить прием антибиотиков и гормональных средств, а также использование вагинальных свечей, если таковые применялись.
  6. Предупредите врача о принимаемых лекарствах, так как некоторые из них могут повлиять на результат анализа.
  7. Рекомендуется не мочиться за 2 часа до анализа.

Показания для исследования

  • Обследование при планировании беременности. 
  • Профилактическое обследование.
  • Дискомфорт, жжение, зуд в области половых органов.
  • Снижение иммунитета.
  • Рецидивирующие пузырьковые высыпания на коже и слизистых.
  • Болезненное мочеиспускание.
  • Подозрения на внутриутробную инфекцию.

Референсные значения

Исследование является качественным, в норме вирусная ДНК в образце биоматериала не выявляется.

«Не выявлено» - в исследованном биоматериале отсутствуют фрагменты ДНК вирусов герпеса 1 и 2 типа, либо их концентрация крайне мала и находится за пределами нижней границы чувствительности метода ПЦР.

«Выявлено» - в исследованном биоматериале присутствуют фрагменты ДНК вирусов герпеса 1 и 2 типа. Организм инфицирован.

О чём свидетельствуют результаты анализа?

Положительные значения говорят о наличии в организме HSV-1 и HSV-2, что подтверждает инфицирование в активной фазе или в фазе ремиссии.

Отрицательные значения свидетельствуют о низкой вероятности заражения 1 и 2 типами герпеса и об отсутствии контакта организма с вирусом. Несмотря на это, сразу же после попадания в него инфекции, когда количества вируса недостаточно для обнаружения возбудителя, показатели диагностики могут иметь ложноотрицательные значения. В данной ситуации врач может назначать пациентам дополнительный скрининг на антитела IgM, а также спустя пару недель рекомендовать сдать тест на иммуноглобулины класса IgG.

Какие факторы влияют на результаты диагностики?

Эффективное противовирусное лечение может уменьшать содержание в биоматериале вирусных клеток эпителия, но ввиду высокой чувствительности ПЦР-диагностики ложноотрицательность теста наблюдается редко.

Погрешности теста имеют место быть на фоне иммунодефицита, нарушения правил отбора биоматериала для исследования (характерно для случаев, когда проба отделяемого слизистых не содержит достаточного для тест-системы числа поражённых клеток).