Диагностика оппортунистических инфекций, ПЦР (EBV / CMV / HHV-6)

Оппортунистические инфекции – это заболевания, развивающиеся на фоне ослабленного иммунитета вследствие попадания в организм бактерий или вирусов. Их диагностика осуществляется с помощью метода полимеразно-цепной реакции. Она включает следующие этапы: подготовка биологического материала для исследования, проведение полимеразно-цепной реакции и обработка полученных материалов.

ПЦР-диагностика является универсальным и точным методом исследования. В ходе анализа осуществляется копирование конкретного участка нуклеиновой кислоты, соответствующего заданным параметрам, в результате чего подтверждается или опровергается наличие инфекции. Основное преимущество ПЦР по сравнению с другими методами состоит в том, что такое исследование позволяет поставить диагноз даже при небольшой концентрации возбудителей в организме.

Оппортунистические инфекции, выявляемые с помощью ПЦР:

1. Epstein Barr Virus (EBV)

Под воздействием вируса Эпштейна Барр развивается инфекционный мононуклеоз. Основные его симптомы: лихорадка, воспаление лимфоузлов, миндалин, интоксикация организма. Заразиться им можно воздушно-капельным путем. Диагностика проводится с использованием ПЦР. Кроме того, данный анализ позволяет выявить и ангину, и герпетическую инфекцию, и тонзиллит. В случае трансплантации органов и тканей исследование проводится для определения реактивации вируса. ПЦР обязательно назначается при наличии припухлостей в области лимфатических узлов и других первичных признаков мононуклеоза, а также ВИЧ-инфицированным.

Анализ, осуществляемый на основе венозной или капиллярной крови, позволяет определить наличие и количество вируса Эпштейна Барр в организме. После проведения ПЦР может быть получен отрицательный результат, который свидетельствует либо об отсутствии инфекции в организме, либо низком содержании вируса, или положительный, подтверждающий вирусоносительство или инфицирование.

2. Cytomegalovirus (CMV)

Вызывает развитие цитомегаловирусной инфекции, которая диагностируется посредством ПЦР. В качестве биологического материала для анализа берется урогенитальный или ректальный мазок, эякулят, утренняя моча. Для точности результатов пациентам следует соблюдать некоторые правила. Женщинам предоставлять биологический материал необходимо до менструации или после ее окончания, а мужчинам не следует ходить в туалет за 3 часа до сдачи мочи или мазка.

Цитомегаловирусная инфекция передается половым путем, во время поцелуя. Заражение происходит и при контакте с мочой или слюной больного человека. В большинстве случаев инфекция проходит бессимптомно. В тяжелой форме она протекает у пациентов с ослабленным иммунитетом, у детей и ВИЧ-инфицированных. Новорожденным ПЦР назначается, если до его рождения у матери была обнаружена цитомегаловирусная инфекция. Анализ проводится при наличии симптомов мононуклеоза, при иммунодефиците, во время беременности. Отрицательный результат подтверждает отсутствие вируса в организме, положительный свидетельствует о его наличии, причем ПЦР в таком случае в дальнейшем проводится повторно для получения информации об эффективности лечения.

3. Human Herpes Virus 6 (HHV-6)

Этот вирус провоцирует развитие герпес-вирусной инфекции 6-го типа. Ее диагностика осуществляется с помощью ПЦР на основе венозной крови. Заражение инфекцией происходит воздушно капельным путем, при контакте с кровью или слюной больного. ПЦР обязательно проводится у детей для диагностики заболеваний, основные симптомы которых – это высокая температура и сыпь, у пациентов, страдающих гемобластозами, больных после трансплантации тканей и органов. Целесообразно также проводить данный анализ у ВИЧ-инфицированных.

По результатам ПЦР можно выявить наличие HHV-6 в организме, определить, активно или пассивно протекает инфекция, диагностировать герпетические инфекции. Данный вирус, оставаясь в пределах одних клеток, способен поражать другие. Это часто становится причиной ложноотрицательного результата.

ПЦР – точный метод диагностики при оппортунистических инфекциях. При соблюдении всех условий проведения анализа и чистоты используемого биологического материала он позволяет выявить заболевание, а в дальнейшем определить эффективность борьбы с вирусом.

Классификация оппортунистических инфекций

Оппортунистические инфекции подразделяются на:

Бактериальные (инфекции дыхательных путей, болезнь Карриона, туберкулёз, патологии, спровоцированные атипичными микобактериями, кишечные заболевания).
Грибковые (болезнь Дарлинга, кандидоз пищевода, калифорнийская лихорадка, торулёз, плазмоклеточная пневмония).
Вирусные (опоясывающий герпес, цитомегалия, заболевания, спровоцированные вирусом герпеса 1, 2 типов, ВПЧ, прогрессирующая многоочаговая лейкоэнцефалопатия, герпес-вирус 8 типа, гепатиты B, C).
Протозойные (Toxoplasma gondii, Cryptosporidium, Leishmaniasis, Microsporidia, кокцидиоз, энцефалопатия, многоочаговая сосудистая геморрагическая саркома, ВИЧ-миелопатия, лимфосаркома, аденокарцинома, плоскоклеточный рак и др.).

Каким образом выявляются оппортунистические инфекции?

Для обнаружения у человека болезней, возникших вследствие ослабления иммунной системы, достаточно исследовать кровь на антитела методом ПЦР. Данный метод диагностики позволяет выявить фрагменты микроорганизмов, провоцирующие развитие оппортунистических инфекций либо иммуноглобулины (протеины, продуцируемые иммунной системой организма для противодействия различным микроорганизмам).

Как правило, специалисты по результатам анализа могут говорить о состоянии мукозального иммунитета. Даже у здорового человека на слизистых оболочках могут присутствовать патогенные организмы в допустимом небольшом количестве. В основном на слизистой находятся условно-патогенные микроорганизмы, которые подключаются к провоцированию воспалительных процессов только в том случае, если иммунитет сильно ослаблен другими заболеваниями.

Исследование мазков со слизистой оболочки ротоглотки на EBV/CMV/HHV-6

Мазок – безболезненный метод взятия материала для исследований со слизистой оболочки. Он может проводиться в любое время, в том числе при беременности. И все же предпочтителен забор материала в момент, когда после приема пищи или напитков прошло более 3-4 часов. В связи с этим предпочтительна сдача анализа натощак. Кроме того, не рекомендуется чистить зубы, курить, употреблять леденцы или жевательную резинку. За день до проведения исследования лучше исключить алкогольную продукцию, так как спирт также может оказать воздействие на количество обнаруживаемых патогенных микроорганизмов. Чистить зубы строго не рекомендуется по той же причине – многие зубные пасты содержат компоненты, предотвращающие размножение инфекций. Спреи для свежести дыхания и очистки зубов также лучше оставить для другого раза.

Также нужно исключить введение любых лекарственных средств посредством проглатывания или распыления в полости рта и носа как минимум в течение 3 часов. В противном случае результаты исследования могут быть далекими от истинной картины. Количество инфицированных клеток может быть недостаточным после приема пищи или препаратов. Так что результаты анализа могут показать нормированное содержание возбудителей в тот момент, когда их реальное количество будет сигнализировать о заболевании.

Женщинам не рекомендуется пользоваться губной помадой или блеском для губ, сами по себе они не влияют на жизнедеятельность исследуемых микроорганизмов. Но при попадании в реактивы могут замедлить некоторые реакции или даже исказить результаты. Вот почему квалифицированный специалист при взятии анализа старается не касаться губ. Наконец, не рекомендуется промывать нос водой.

Во время анализа вводится соответствующий зонд по наружной стенке хода носа. При условии забора материала медицинским работником введение зонда остается безопасной процедурой.

Как связаны оппортунистические инфекции со СПИДом?

Оппортунистические инфекции принято считать основной причиной смерти пациентов, у которых диагностирован СПИД. Практически во всех случаях они спровоцированы простейшими, вирусами, грибками и бактериями, которые у относительно здоровых людей с высоким и средним иммунитетом лишь в отдельных случаях вызывают патологии, которые при СПИДе проявляются в тяжёлых формах и способствуют подавлению иммунитета.

Очень часто у больных СПИДом диагностируются диссеминированные инфекции, которые с трудом излечиваются, рецидивируют и практически не поддаются лечению.

Значимость первичной диагностики ВИЧ при оппортунистических инфекциях

Людям с неподтверждённым статусом ВИЧ, у которых выявлена любая болезнь из числа часто встречающихся оппортунистических инфекций при инфицировании ВИЧ, рекомендуется скрининговое обследование на ВИЧ и дальнейшая консультация у специалиста. Доктор обязан разъяснить человеку причины, которые сподвигли его выдать направление на диагностику ВИЧ, и значимость полученных результатов анализа для дальнейшего лечения (в случае необходимости). Диагностика – процедура добровольная. За пациентом всегда сохраняется право отказа от исследования.

Первичный анализ ВИЧ-статуса состоит из:

предварительной консультации у врача;
серологического теста на иммуноглобулины к ВИЧ (обычно экспресс-методами либо с помощью ИФА), подтверждённого вестерн-блоттингом;
постдиагностической консультации (несмотря на результаты теста, содержит сведения о снижении опасного поведения).

В случае положительного результата диагностики предусмотрено первичный клинический осмотр пациента с целью установления инкубационной стадии ВИЧ, а также обнаружения сопутствующих патологий.

Перечень оппортунистических заболеваний, возникающих на фоне СПИДа

Среди распространённых оппортунистических инфекций, вызванных ВИЧ, как правило, встречаются:

CMV;
HHV-6;
вирус Эпштейна-Барра;
туберкулёз;
токсоплазмоз;
плазмоклеточная пневмония.

Специфика оппортунистических болезней, поражающих различные органы и системы

Риск оппортунистических инфекций определяется степенью подавления иммунитета. ВИЧ, как и условно-патогенные агенты, может способствовать поражению внутренних органов и систем организма.

1. Оппортунистические инфекции пищеварительного тракта

Оппортунистические заболевания системы пищеварения весьма типичны. Как правило, это стоматит (воспалительный процесс слизистой ротовой полости), эзофагит (поражение воспалительного характера слизистой пищевода), развившиеся на фоне заражения Candida, ВПГ-1, 2, CMV, а также патологии заднепроходного канала, спровоцированные энтеритами различного происхождения, а также вирусами простого герпеса.

Грибковая разновидность Herpes virus и вирусная весьма успешно поддаются терапии, несмотря на то, что они склонны к рецидивированию, в большинстве ситуаций, инфекции, вызванные грибками, не ограничиваются слизистыми и могут поражать весь организм. Диарея, спровоцированная воспалением тонкого кишечника (энтеритом), надоедливая, потому может принимать характер значительной тяжести.

Заражение органов пищеварительного тракта цитомегалией может распространяться и на область желудка, провоцируя болезненность в толстой кишке, проблемы при глотании, резкую боль в зоне под грудиной, понос, беспричинное снижение веса, колики в животе, озноб, чувство тяжести в печени.

2. Оппортунистические инфекции дыхательной системы

По большей части основным оппортунистическим инфекционным заболеванием дыхательных путей при СПИДе является плазмоклеточная пневмония. В то же время, лёгочный туберкулёз с каждым разом препятствует естественному течению ВИЧ; поражение лёгкого может также происходить при диссеминированных состояниях, вызванных нетуберкулёзной разновидностью микобактерий, особенно внутриклеточной Mycobacterium. Среди иных организмов, провоцирующих поражение лёгких, следует упомянуть цитомегаловирус, грибы рода Candida, а также Criptococcu neoformans.

Больные СПИДом, безусловно, склонны к инфицированию патогенами, провоцирующими у иммунокомпетентных лиц бронхогенную и лёгочную пневмонию (как правило, данные болезни развиваются на фоне размножения пневмококков, гемофильной палочки, микоплазмы, легионеллы, респираторных вирусов). Бронхопневмонии, вызванные бактериями, повторно прогрессирующие в случаях сильной запущенности инфекции, являются наиболее вероятной причиной повышенной ранней смертности.

3. Оппортунистические инфекции кожи и слизистых

Инфицирование кожного покрова и слизистых у пациентов с положительным статусом ВИЧ, считается вариантом нормы. Кожно-слизистые проявления принято считать первым диагностическим признаком снижения иммунной реакции организма. Для ВИЧ-позитивных людей характерны различные дерматологические болезни, спровоцированные возбудителями различных инфекций. Эволюция тяжёлых патологических состояний часто бывает длительной и тяжёлой. Ей свойственны частые рецидивы. Широко распространёнными ОИ считаются молочница ротоглотки, себорея, лейкоплакия полости рта, инфекции, спровоцированные вирусами ветряной оспы, ВПЧ, герпеса, поксвирусами. Часто диагностируются атопическая экзема, псориаз, воспаление фолликулов, кожный микоз, злокачественные новообразования.

4. Оппортунистические инфекции центральной и периферической нервной системы

Для 60 % больных СПИДом характерна неврологическая очаговая симптоматика. Среди часто диагностируемых вирусных заболеваний встречаются прогрессирующая многоочаговая лейкоэнцефалопатия и цитомегаловирусный энцефалит.

Распространённой протозойной болезнью является воспаление мозга на фоне распространения возбудителя Toxoplasma gondii, тогда как посреди микозов широко распространён бактериальный менингит, вызванный Criptococcus neoformans.

Среди 20-30 % людей, зараженных СПИДом, может быть выявлен так называемый СПИД-деменциокомплекс, для которого характерно прогрессирование деменции с нарастающим дефицитом функций головного мозга.

5. Оппортунистические инфекции кроветворных органов

Малокровие (уменьшение объёма эритроцитов), пониженное число лейкоцитов (лейкопения), тромбоцитопения (низкие титры тромбоцитов) обнаруживаются у тяжело больных пациентов, которые имеют прогрессирующие оппортунистические заболевания, не подлежащие лечению.

Что делать по результатам анализов

В настоящий момент специалистами накоплено достаточно данных не только о видовом составе микроорганизмов на слизистых оболочках человека. Есть данные о методах внедрения микроорганизмов и особенностях их развития. Все это позволяет разрабатывать достаточно точные методики лечения. При подтвержденных заболеваниях верхних дыхательных путей могут использоваться антимикробные пептиды по рекомендации врача. Они относятся к врожденному типу иммунитета у людей и обычно вырабатываются клетками самостоятельно. Речь идет о кателицидинах, альфа- и бета-дефензинах. Современная наука движется именно по направлению синтеза и использования антимикробных пептидов для устранения воспалительных процессов естественным для организма путем без побочных реакций, как зачастую это происходит при лечении антбиотиками. Уже есть данные о применении антимикробных пептидов не только в лечении инфекций дыхательной системы, но и при работе с осложнениями при родах и в гинекологической практике.

К использованию антмикробных пептидов медиков подталкивает тот факт, что лишь около 5% воспалительных процессов провоцируется патогенными бактериями. Львиная доля заболеваний, осложненных воспалительными процессами, имеет прямое отношение к деятельности вирусов. Антибиотики же призваны подавлять размножение лишь патогенных и условно-патогенных микроорганизмов. Кроме того, во многих случаях медики говорят о смешанных вирусных инфекциях, в рамках которых воспаление провоцирует несколько видов вирусов.

Самое главное, что не стоит делать по результатам анализов – самостоятельно заниматься лечением и назначать себе препараты. В случае повышенного количества исследуемых возбудителей решение о лечении должно приниматься только медицинским специалистом.