Экспресс тест на антиген SARS-CoV-2 (ИХА)

Кошурин Дмитрий Валерьевич
Кошурин Дмитрий Валерьевич Врач лабораторной диагностики, Главный врач,

Иммунохроматографическое выявление антигена SARS-CoV-2

Иммунохроматографическое выявление антигена SARS-CoV-2 (экспресс-тест) – это быстрый способ диагностирования острой фазы COVID-19 путем качественного исследования мазка из носоглотки, в основе которого лежит реакция между вирусным антигеном (белком возбудителя инфекции, который иммунная система человека распознает как инородное вещество) и соответствующим ему антителом. Чувствительность теста составляет 85%, специфичность – 98%, именно поэтому он является основной этиологической методикой лабораторной диагностики коронавирусной инфекции, которая официально одобрена Министерством Здравоохранения Российской Федерации и соответствует всем его рекомендациям. 

Антиген SARS-CoV-2 – это особый белок, который является структурным элементом вируса. Эта чужеродная для человеческого организма частица распознается иммунной системой, для ее уничтожения производятся специфические антитела – они направлены на борьбу с инфекционным возбудителем, не дают ему проникнуть в клетки и нанести им вред. Для выявления антигена используют экспресс-анализ мазка из носоглотки, который считается самым простым (не требующим применения специального лабораторного оборудования) и быстрым (для выполнения исследования необходимо не больше получаса) способом выявления COVID-19.

SARS-CoV-2 представляет собой новый штамм одно-цепочечного, содержащего рибонуклеиновую кислоту коронавируса, который вызывает у человека тяжелую респираторную инфекцию. Возбудитель отличается высокой контагиозностью и распространяется аэрозольным, контактным и бытовым способами. Основной очаг развития патологического процесса – нижний отдел дыхательных путей, прогрессирование инфекционного процесса приводит к поражению жизненно-важных органов и систем. Ранняя стадия заболевания сопровождается потерей обоняния и вкуса, снижением работоспособности, лихорадкой, болезненными ощущениями в мышцах, суставах и голове, кашлем, одышкой, затруднением дыхания. Тяжелые формы коронавирусной инфекции характеризуются возникновением таких осложнений, как:

  • двусторонняя пневмония – обширное воспаление легочной ткани;
  • острый респираторный дистресс-синдром – угрожающее жизни состояние, ассоциированное с диффузными изменениями паренхимы легких;
  • дыхательная недостаточность – патология, при которой способность легких обеспечивать нормальный газовый состав артериальной крови ограничена;
  • нефротический криз – патологическое состояние, характеризующееся резким снижением объема циркулирующей крови, спровоцированное падением онкотического давления. 

В многих случаях перечисленные осложнения приводят к гибели пациента. Группу повышенного риска составляют пожилые люди, пациенты с хроническими патологиями, беременные женщины, курильщики. 

Встречаются бессимптомные носители, которые могут распространять возбудитель инфекционного заболевания, при этом у них не развивается патологический процесс – чаще всего ними становятся лица молодого возраста и дети.

Когда целесообразно сдать экспресс-тест на антиген к SARS-CoV-2?

С помощью иммунохроматографического исследования мазка из носоглотки возможно сразу же качественно оценить наличие инфицирования коронавирусом. Проведение экспресс-теста уместно при:

  • раннем диагностировании COVID-19;
  • выявлении бессимптомного носительства коронавируса;
  • исключении возможности заражения SARS-CoV-2 при наличии у пациента клинических признаков острой вирусной инфекции;
  • существовании оснований подозревать заражение коронавирусом после контакта с его носителем;
  • профилактических обследованиях медицинского персонала амбулаторий и инфекционных отделений.

Согласно Приказу Минздрава РФ № 3.1.3597-20 от 16.11.2020 года «Профилактика коронавирусной инфекции», результат иммунохроматографического анализа, позволяющего обнаружить антиген SARS-CoV-2, приравнивается к ПЦР-исследованию. Однако итоговые данные экспресс-теста не принимаются при официальных случаях – выписывании и закрытии больничного листа, выезде за рубеж, плановой госпитализации, возвращению из-за границы. В этих ситуациях в качестве подтверждения отсутствия инфицирования возбудителем COVID-19 рассматривают только результаты исследования, выполненного методом полимеразной цепной реакции. Именно поэтому, перед проведением экспресс-теста необходимо заранее уточнить подходят ли его итоговые данные либо требуется пройти ПЦР-диагностику.

Правила подготовки к анализу

Биологический материал для проведения экспресс-теста – мазок из носоглотки, который отбирают через носовой ход. Чтобы получить достоверный результат исследования за несколько дней до его проведения пациент должен исключить:

  • применение назальных спреев, мазей, капель или растворов для промывания носа, которые содержат антибактериальные и противомикробные средства – это приведет к получению ложно-негативного результата;
  • употребление спиртных напитков.

В день отбора образца биоматериала следует отказаться от приема пищи, курения, промывания носа, чистки зубов, использования жевательной резинки, капель или спреев. При наличии обильных выделений из носовых ходов необходимо их очистить – с помощью сильного выдоха удалить слизистый секрет.  

Как проходит диагностика

Иммунохроматографический метод основан на принципе «бокового потока» и включает возникающую в биологическом материале иммунную реакцию «антиген-антитело». Для его выполнения используют специальные тестовые кассеты, в основе которых лежат действующие как капилляры кусочки микро-структурированного либо спеченного полимера или пористой бумаги, способные самопроизвольно транспортировать жидкие образцы, которые контактируют с реактивными молекулами. Эта прокладка действует как губка – она удерживает избыток содержащейся в образце жидкости. После впитывания она перетекает во вторую «подушечку», в которой хранится конъюгат – искусственно синтезированные биологически активные частицы со всеми необходимыми для связывания соответствующих антигенов и антител реагентами. Маркированные частицы-мишени сначала попадают на реакционные зоны – тестовую (на ней цветной сигнал появляется при положительном результате) и контрольную, содержащую аффинный сорбент (химическое соединение, свидетельствующее о пригодности теста и активности био-молекул конъюгата). После прохождения этих линий жидкий образец доставляется в контейнер для отходов, которым служит конечное пористое вещество.

Для взятия биологического материала используют стерильный зонд – мазок отбирают со слизистых покровов нижнего носового хода. Взятый образец на несколько минут помещают в специальный раствор. Затем на тестовую кассету наносят 3 капли выделенного образца и спустя 20 минут оценивают результат, позволяющий определить наличие антигена SARS-CoV-2 – маркера острой фазы коронавирусной инфекции.

Расшифровка анализа

Результат иммунохроматографического теста может быть интерпретирован как:

  1. «Отрицательный» - показатель нормы, который указывает на отсутствие инфицирования коронавирусом. Такой итог исследования может быть получен и при изменении детерминанта антигена вследствие вариации вирусных генов. Именно поэтому отрицательный результат не всегда исключает заражение SARS-CoV-2 и не во всех случаях является единственным основанием для отмены терапевтических мероприятий.
  2. «Положительный» - свидетельство наличия коронавирусного антигена, обычно его обнаруживают в период острой фазы инфекционного процесса (в первые 7 дней). Для постановки точного диагноза принимают во внимание данные анамнеза, клинической симптоматики и других исследований (прежде всего – ПЦР-метода).

При получении отрицательного результата и сохранении у пациента признаков инфекции применяют иммуноферментный анализ, который позволяет выявить наличие в крови специфических белков-иммуноглобулинов (IgM и IgG), определить их изотип и уточнить стадию заболевания (высокая концентрация IgM наблюдается в остром периоде инфекционного процесса, IgG появляются намного позже и сохраняются в течение длительного времени, свидетельствуя о перенесенной инфекции).