Анализ полиморфизмов (чувствительность к варфарину)

Доронин Иван Михайлович
Доронин Иван Михайлович Заведующий отделом ПЦР и генетики,

Генетический анализ на чувствительность к варфарину


Анализ на обнаружение полиморфизмов в VKORC1, CYP2C9, CYP4F2 дает возможность подтвердить генетически спровоцированную повышенную чувствительность к воздействию варфарина. Исследование рекомендуется проводить при назначении данного антикоагулянта до начала его приема.   Полиморфизмы VKORC1, CYP2C9, CYP4F2 – это мутации приводят к развитию врожденной чувствительности к варфарину. 

Сдать кровь на полиморфизмы Ген VKORC1 кодирует структуру фермента эпоксиредуктаза, который способствует превращению неактивной формы витамина K в активную. Дефицит этого витамина при приеме кумариновых антикоагулянтов может стать причиной обширных кровотечений.

Ген CYP2C9 кодирует последовательность аминокислот в структуре энзима цитохром 2C9. Наличие полиморфизмов способствует снижению активности фермента, что влечет повышенную чувствительность к препаратам-антикоагулянтам. Ген CYP4F2 кодирует фермент, который принимает участие в метаболизме препаратов в печени.


Когда делают анализ?


Основными показаниями к проведению генетического анализа крови на полиморфизмы в генах VKORC1, CYP2C9, CYP4F2 являются:
  • необходимость назначения антикоагулянтов кумаринового ряда, в частности варфарина;
  • длительная антикоагулянтная терапия с применением варфарина;
  • показатель крови МНО не устойчив;
  • осложненное течение беременности в виде невынашивания, отслойки плаценты;
  • возникновение кровотечений при приеме варфарина в анамнезе близких родственников обследуемого.


Методика проведения анализа

Биоматериалом для проведения анализа является венозная кровь, которую помещают в пробирку с ЭДТА. В лаборатории образец переносится в амплификатор для проведения ПЦР анализа. Этот прибор обеспечивает периодический нагрев и охлаждение содержимого, что активизирует процесс расхождения ДНК-цепей. После этого смесь охлаждается и добавляется взвесь праймеров, которые прикрепляются к заданным участкам генома, выделяя их.
На следующем этапе происходит многократное копирование выделенных звеньев до тех пор, пока их количества будет достаточно для выделения.


Расшифровка анализа

Полученные результаты анализа позволят спрогнозировать фармакологический ответ конкретного обследуемого на прием варфарина, рассчитать необходимую дозу лекарственного средства.

В бланке заключения указываются:
  • перечень мутаций, по которым проведено исследование;
  • генотип по каждой мутации с указанием гетеро- или гомозиготности;
  • указания об обнаруженных мутациях либо об их отсутствии.
Генотип GG является резистентным, поэтому больным допустим прием более высоких доз антикоагулянта.

Генотип AA считается чувствительным, поэтому таким больным рекомендуется прием наиболее низкой терапевтической дозы варфарина.