Анализ полиморфизмов (гистосовместимость)

Доронин Иван Михайлович
Автор статьи: Доронин Иван Михайлович Заведующий отделом ПЦР и генетики,
Данное исследование временно не выполняется нашей лабораторией

HLA-типирование I класса (локусы A и B)


Анализ крови с HLA-типированием I класса проводится для определения гистосовместимости. Этот анализ обязательно проводится в рамках подбора донора для проведения трансплантации, при обследовании супругов с привычным невынашиванием беременности.


 Сроки выполнения
 10 дней
   
 Синонимы (rus)  Анализ гистосовместимости
   
 Cинонимы (eng)  Analysis of histocompatibility
   
 Методы исследования  ПЦР
   
 Подготовка к анализу  Специальной подготовки к обследованию не требуется
   
 Тип биоматериала и способы его забора
 Кровь, забор производят из вены в лаборатории

HLA или человеческие лейкоцитарные антигены являются комплексом генов, которые отвечают за распознавание иммунной системой чужеродных и собственных белковых соединений. Располагаются они на коротком плече 6-той хромосомы и разделяются на 2 класса: первый объединяет локусы A, B, C, а второй – D, который состоит преимущественно из сублокусов.


Локусы A и B – это местоположение гена на цитологической или генетической карте хромосомы. Гены локусов HLA-A, HLA-B, которые контролируют выработку данных молекул, характеризуются наличием множества аллелей. Эти гены регулируют выработку трансплантационных антигенов.

Когда делают анализ


Генетический анализ на гистосовместимость рекомендуется специалистом при:
  • анкилозирующем спондилите;
  • синдроме Рейтера;
  • самопроизвольном прерывании беременности;
  • подтвержденном привычном невынашивании;
  • неудачных попытках ЭКО;
  • супружеским парам, находящимся в родственной связи;
  • для оценки рисков проведения оперативных вмешательств по пересадке органов и тканей.

Методика проведения анализа


HLA-типирование проводится для выявления антигенов тканевой совместимости. Исследованию подлежит венозная кровь. Венепункцию проводит медработник, кровь помещается в контейнер с антикоагулянтом ЭДТА. В лаборатории из образца выделяются лейкоциты. Это обусловлено тем, что на поверхности именно этих клеток крови размещено наибольшее количество антигенов тканевой совместимости.


Для определения HLA-фенотипа проводится полимеразная цепная реакция. Образец помещается пипеткой в пробирки амплификатора. Этот прибор обеспечивает циклический нагрев и охлаждение содержимого. Таким образом, катализируется процесс денатурации с разрушением водородных связей между ДНК-цепями.


После этого содержимое охлаждают и добавляют праймеры. Эти соединения выделяют заданный участок генетического материала. На следующем этапе добавляется фермент ДНК-полимераза, которая катализирует процесс репликации. Специфические участки гена многократно удваиваются и изучаются посредством электрофореза.

Расшифровка анализа


В результатах анализов проводится идентификация антигенов, аллелей. Если у обследуемых супругов много совпадений, значит, зачатие без проведения специфической иммунотерапии не наступит. В этом случае врач назначит лекарственные препараты, угнетающие активность антигенов тканевой совместимости и лимфоцитов.