Эндотелиальная синтаза оксида азота (NOS3 C-786T)

Доронин Иван Михайлович
Доронин Иван Михайлович Заведующий отделом ПЦР и генетики,

Анализ эндотелиальной синтазы оксида азота


Генетическое изучение биоматериала, в данном случае венозной крови, с определением содержания фермента эндотелиальной синтазы NO (оксида азота), рекомендуется врачом для своевременного обнаружения возможного генного полиморфизма NOS3, Генетический анализ кровикоторый кодирует энзим C-786T. Выявление такой мутации является маркером наследственной предрасположенности к самопроизвольному спазму венечных сосудов.

Эндотелиальная синтаза окиси азота – энзим, регулирующий образование NO. Это соединение относится к классу биологических медиаторов, принимающих участие в большинстве физиологических процессов. Оксид азота способствует расслаблению гладкомышечной оболочки кровеносных сосудов, обеспечивает передачу нервных импульсов, стимулирует снижение агрегации тромбоцитов.


Когда делают анализ?

Анализ крови рекомендуется врачом в рамках обследования больных с отягощенным семейным анамнезом, в котором указаны частые случаи сердечно-сосудистых патологий, что может свидетельствовать о генетической предрасположенности к данной группе заболеваний. Помимо этого, обследование рекомендуется при:
  • ишемической болезни сердца;
  • инфаркте миокарда анамнезе близких родственников;
  • артериальной гипертензии;
  • тромбозах разной локализации.
Помимо этого, обследование рекомендуется пройти в профилактических целях для предупреждения развития заболеваний сердца при частых стрессах, вредных привычках, особенно табакокурении.

Методика проведения анализа


Биоматериалом для проведения генетического анализа с выявлением полиморфизма в NOS3 является венозная кровь. Выделение генного полиморфизма проводится с помощью ПЦР диагностики. Лаборант переносит кровь из пробирки с антикоагулянтом ЭДТА в контейнер амплификатора. Сначала начинается периодический нагрев и охлаждение содержимого, что активизирует разрушение связей между ДНК-цепями. Эта стадия называется денатурацией.

На следующей стадии отжига содержимое пробирки сначала охлаждается до определенной температуры. Данный показатель определяется температурой плавления праймера. Это соединение при добавлении в образец, содержащий генетический материал, прикрепляется к нуклеотидам. Таким образом, происходит выделение заданного гена.

Стадия элонгации начинается с добавления энзима ДНК-полимеразы, который катализирует репликацию выделенного фрагмента генома. Этот процесс повторяется многократно. Конечный результат оценивается спектрофотометрически.


Расшифровка анализа


В результатах генетического анализа выдается оценка генотипа по исследуемому маркеру:
  • T/T является генотипом, который не ассоциирован со спазмом сосудов;
  • T/C, C/C считаются генотипами, при которых подтверждается генетическая предрасположенность к заболеваниям сердечно-сосудистой системы, спровоцированным спазмами коронарных артерий.