Иммуногистохимия: Ck5, P53, AMACR, Ki-67

Потапова Оксана Валентиновна
Автор статьи

Потапова Оксана Валентиновна

Заведующая отделом патоморфологии,
Цена 14410 *
Срок исполнения до 10 дн. (рабочие дни)
Код услуги HIS19
* - Взятие биоматериала оплачивается отдельно

Диагностика злокачественных новообразований предстательной железы

Иммуногистохимическое исследование биопсийного (операционного) материала предстательной железы (Ck5, P53, AMACR, Ki-67) – лабораторный метод диагностики, направленный на первичное определение опухоли, ее точную дифференцировку в целях назначения правильных методов терапии, отслеживания их результатов, составления прогноза. 

Для исследования берут небольшой кусочек ткани из патологического очага, изготавливают микропрепараты, чтобы определить специфические маркеры, присутствующие при злокачественных новообразованиях. Только на основании этого исследования можно провести точную дифференцировку, исключить недостоверный диагноз, чтобы быстро приступить к терапии.

Характеристики исследования:

  • Тип биоматериала: образец ткани (в парафиновом блоке).
  • Синонимы (rus):  Рак простаты; Аденокарцинома предстательной железы.
  • Синонимы (eng): Prostate сancer; Prostate adenocarcinoma
  • Метод исследования: иммуногистохимический метод (ИГХ)

Цели исследования

Иммуногистохимия: Ck5, P53, AMACR, Ki-67Иммуногистохимическое исследование биопсийного материала тканей предстательной железы для определения специфических маркеров опухоли проводят для выявления следующих данных:

  • точная идентификация злокачественного новообразования в предстательной железе в случае, если другие лабораторно-инструментальные анализы не дали результата;
  • степень дифференцировки клеток, чем она проще, тем сильнее злокачественный процесс и хуже прогноз;
  • степень распространения опухоли по организму, в том числе выявление риска перехода в лимфатические узлы;
  • определение точной локализации метастазов;
  • составление адекватных методов иммунологической терапии в зависимости от вида злокачественного новообразования;
  • результаты лечения опухоли после завершения всех методик, чтобы оценить потребность в составлении новых методов терапии или перехода в ремиссию;
  • выявление предракового состояния, когда дифференцировка клеток только начала снижаться, но общая функциональность тканей органа еще сохранилась;
  • отслеживание динамики развития предракового состояния, чтобы своевременно выявлять риск развития злокачественной опухоли и назначать лечение до ее обильного разрастания или распространения в другие ткани.

Цели для назначения анализа определяет уролог, онколог. Этот же специалист должен проводить расшифровку полученных данных.

Показания для анализа

Выделяют ряд показаний, на основании которых назначают иммуногистохимическое исследование биопсийного материала тканей предстательной железы:

  • негативные признаки по данным лабораторно-инструментальных исследований, по которым можно предположить злокачественное новообразование в тканях предстательной железы – уплотнение при ректальном анализе, патологическое новообразование на основании ультразвукового исследования, увеличение уровня простат специфического антигена (ПСА);
  • негативные признаки, на которые жалуются пациенты – частое мочеиспускание, уменьшение объема струи мочи, болевой синдром в покое или при мочеиспускании, ослабленная или отсутствующая потенция, перемещение боли в поясницу, гематурия;
  • диагноз доброкачественной опухоли простаты, чтобы своевременно определить ее переход в злокачественный процесс;
  • определение неоплазии на основании первичной биопсии;
  • идентификация метастазов.

Методика проводится только на основании строгих показаний, так как для сбора биоматериала требуется инвазивная процедура, которая может привести к поражению тканей.

Как подготовиться к анализу

Перед проведением биопсии проводят последовательные этапы подготовки:

  • исключение употребления препаратов, которые могут влиять на состояние предстательной железы и ее клеточный состав (за 1 неделю);
  • запрет распития алкогольных напитков за 1-2 дня;
  • исключение психоэмоциональной нагрузки и физической активности за несколько дней;
  • последний период употребления пищи за 8 часов, приход в кабинет врача строго на голодный желудок.

Важно помнить, что предварительно проводят гистологическое исследование, только затем иммуногистохимический анализ.

Метод исследования

Метод исследованияДля диагностики во время операции проводят сбор небольшого кусочка ткани, который заключают в парафиновый блок. При помощи методики клетки перестают видоизменяться, сохраняются в первоначальной форме. Затем собранные ткани отправляют в лабораторию, где изготавливают микропрепараты по этапам:

  • удаление парафина;
  • удаление лишней жидкости из образца (дегидратация);
  • внесение реагентов, при помощи которых определяют специфические маркеры Ck5, P53, AMACR, Ki-67;
  • внесение дополнительного реагента с ферментами, которые вступают во взаимосвязь с уже образовавшимися иммунными комплексами, чтобы создать на их поверхности свечение при помощи флюорофлора;
  • инкубация при слегка повышенной температуре, чтобы каждый вид белка связался с антителами, сформировав иммунные комплексы в короткое время.

Как только подготовка микропрепаратов завершается, приступают к следующему этапу – микроскопии. Ее выполняют при помощи микроскопа последнего поколения, через который оценивают иммунные комплексы и одновременно содержащиеся клетки. Методику выполняют по этапам:

  • размещение каждого микропрепарата по очереди во флуоресцентный микроскоп;
  • настройка микроскопа на дальнее приближение, чтобы оценить общую структуру ткани, выявить патологические очаги и возможность скопления иммунных комплексов с флюоресцентной меткой в определенных зонах;
  • максимальное приближение микроскопа, чтобы в точности оценить морфологию клеток, подсчитать комплексы антиген-антитело.

В конце исследования цитолог выдает заключение. Он указывает данные иммунных комплексов, по которым можно определить содержание Ck5, P53, AMACR, Ki-67. Сведения передают лечащему врачу. Расшифровкой должен заниматься онколог, он учтет одновременно выявленные данные, историю болезни, клинические симптомы, результаты других лабораторно-инструментальных анализов.

Расшифровка анализа

Для каждого маркера в отношении иммуногистохимического исследования тканей предстательной железы выделяют определенные нормы и сведения.

  1. Ck5. Это маркер доброкачественной опухоли предстательной железы, по которому можно исключить риск злокачественного процесса.
  2. P53. В норме белок может присутствовать в тканях предстательной железы, но в неактивном состоянии. В случае его активации происходят повреждения клеток и появление атипичных элементов. Исходя из степени распространения белка, судят о риске развития метастазов, разрастании первичной опухоли, переходе атипичных клеток в ткани лимфатических узлов.
  3. AMACR. В норме белок встречаться не должен. Его повышенная экспрессия встречается при злокачественном новообразовании тканей предстательной железы. Степень распространения маркера зависит от диагноза, эффективности лечения.
  4. Ki-67. В норме экспрессия маркера должна наблюдаться в очень низких значениях. В случае развития злокачественного новообразования его распространение увеличивается от 15% и больше. Если экспрессия увеличивается до 15-30%, это свидетельствует об умеренной агрессии злокачественных клеток. При увеличении показателя более 30% можно определить высокую степень агрессивности и тяжелую форму злокачественного процесса. В последнем случае прогноз становится неблагоприятным.

Расшифровка анализаВажно помнить, что данные перечисленных маркеров требуется идентифицировать в комплексе с гистологическим исследованием. Только так определяют возможность содержания атипичных клеток и степень экспрессии белков. Если злокачественный процесс уже диагностирован, по маркерам определяют степень злокачественности клеток, эффективность проводимой терапии. По перечисленным данным в комплексе составляют прогноз.

  1. Благоприятный. Он возможен в случае, если атипичные клетки отсутствуют, что свидетельствует о разрастании доброкачественной опухоли. Также благоприятный прогноз наблюдается при низкой экспрессии специфических маркеров, высоком риске развития метастазов.
  2. Неблагоприятный. Он наблюдается при обильном распространении атипичных клеток, отсутствии маркеров доброкачественной опухоли, повреждении генетического аппарата клеток, высоком коэффициенте Ki-67.

Подробнее по расшифровке полученных данных консультируются с урологом и онкологом. Только специалисты с точностью оценят степень злокачественного процесса, дифференцируют его принадлежность, составят адекватный прогноз.