Анализ крови на малярию

Исследование крови на малярийный плазмодий

У здоровых людей не обнаруживается малярийный плазмодий в крови. В организме человека происходит бесполое размножение этого паразита. В процессе развития они питаются гемоглобином крови, разрушая эритроциты. Все проявления малярии связанны именно с развитием плазмодия в красных кровяных тельцах.

Характеристики исследования:

• Тип биоматериала: венозная и капиллярная кровь
• Синонимы (rus): болотная лихорадка, пароксизмальная малярия, перемежающаяся лихорадка, пароксизмальная малярия.
• Синонимы (eng): Marsh fever, Malaria, Jungle fever.
• Методы исследования: метод Романовского-Гимза (Giemsa)
• Сроки выполнения: 1 день

Для чего проводят анализ на малярийный плазмодий

Исследование крови на малярийный плазмодий делается для точной диагностики болезни. Диагноз малярии подтверждается, когда в крови обнаруживаются любые стадии развития паразита в эритроцитах.

Точность проводимой диагностики зависит от профессиональных качеств лаборанта, а также от того, как соблюдается методика проведения исследования.

Что такое малярия?

Развитие данного инфекционного заболевания, характеризующегося повторяющимися приступами лихорадки, вызывает укус анофелеса – малярийного комара, который встречается в регионах с жарким климатом. В человеческий организм вместе со слюной насекомого проникают спорозоиты (промежуточные формы возбудителей инфекции – простейших рода Plasmodium), их размножение происходит в гепатоцитах. Достигнув периода созревания, паразиты покидают печеночные клетки и поражают красные тельца, активируя инфекционно-воспалительный процесс. Каждые 2-3 суток плазмодии вызывают разрыв эритроцитраный оболочки и выходят в жидкую часть крови – плазму. Это явление провоцирует возникновение лихорадочного состояния. Затем паразиты атакуют новые эритроциты и цикл повторяется.

Малярия может вызывать различные осложнения, ассоциированные с летальным исходом:

• дыхательную недостаточность, обусловленную скоплением в легких внутриклеточной жидкости;
• церебральную малярию – следствие закупорки сосудов головного мозга зараженными эритроцитами;
• повреждение селезенки;
• почечную и печеночную недостаточность;
• тяжелую анемию, вызванную уменьшением численности здоровых красных кровяных телец;
• гипогликемию – снижение концентрации глюкозы в крови.

Кто составляет группу риска?

Инфицированию подвержено население и гости жарких стран – африканских государств, Соломоновых островов, Индии, Гаити, Новой Гвинеи, Таиланда, Латинской Америки.  В Российской Федерации неблагоприятная эпидемиологическая обстановка сохраняется на Северном Кавказе. Более тяжело малярия протекает у беременных женщин, новорожденных младенцев и детей младшего дошкольного возраста, туристов из северных регионов, пациентов с иммуно-дефицитными состояниями, лиц бедных слоев общества, которые не имеют доступ к квалифицированной медицинской помощи.

Диагностика малярии

В большинстве случаев инкубационный период длится несколько недель с момента укуса инфицированного комара, однако очень часто паразиты могут пребывать в организме человека в течение нескольких лет, не вызывая никаких клинических проявлений. Заподозрить наличие инфекции возможно по повторяющимся приступам озноба и жара. 

Пациенты предъявляют жалобы на:

• дрожь в теле;
• лихорадку;
• сильную головную боль;
• тошноту с рвотой;
• судороги;
• расстройство стула;
• чрезмерное потоотделение;
• последующую нормализацию температуры с ощущением полной разбитости. 

Тяжелое течение малярии сопровождается ознобом, нарушением сознания, сильной слабостью, множественными судорогами, дыхательной недостаточностью, желтухой, патологической кровоточивостью, изменением функциональной деятельности жизненно важных органов. Отсутствие своевременной специфической терапии приводит к летальному исходу.

Диагностирование инфекционного процесса основано на обнаружении малярийного плазмодия в мазках крови.

Микроскопическое исследование мазков

Чтобы обнаружить плазмодий и определить его видовые характеристики из крови изготавливают два препарата:

1. Тонкий мазок – чистое и обезжиренное предметное стекло кладут на твердую поверхность, наносят каплю крови и с помощью шлифованного стекла, держа его под углом 45̊ проводят по всей поверхности. Образец высушивают и маркируют тонким карандашом.
2. Толстую каплю – на предметное стекло наносят каплю крови, углом другого стекла делают круглый мазок диаметром около 1 см. Оставляют образец в горизонтальном положении до полного высыхания, предварительно защитив его от перегревания, пыли и мух. 

Приготовленные препараты подвергаются окрашиванию по методике Романовского-Гимзе. Сначала осуществляется микроскопия (с использованием объектива с масляной иммерсией) толстой капли – это позволяет быстро обнаружить паразитов. Интенсивность их циркуляции в крови определяют по количеству плазмодиев в поле зрения результат:

• «+» указывает на наличие в 10 полях зрения от 1 до 100 паразитов;
• «++» - от 10 до 100 в 10 полях зрения;
• «+++» - от 1 до 10 в 1 поле зрения;
• «++++» - от 10 до 100 в 1 поле зрения;
• «+++++» - свыше 100 в 1 поле зрения.

Для уточнения их вида и выявления морфологических особенностей пораженных клеток изучают мазок крови – в эритроцитах присутствуют включения плазмодий, которые имею вид пятен. Результаты микроскопического исследования, в ходе которой могут быть выявлены лейко- и тромбоцитопения (уменьшение численности белых кровяных телец и красных кровяных пластинок), ретикулоцитоз, анизоцитоз и пойкилоцитоз (признаки анемии), лимфо- и моно-цитоз (повышение процентного соотношения разновидностей лейкоцитов), позволяют определить тип паразита и стадию текущего инфекционного процесса.

Правила подготовки пациента

Анализ крови на малярийный плазмодий сдается утром натощак. Пациенту рекомендуется исключить физические и эмоциональные перегрузки, прием алкоголя накануне и курение в течение 1 часа. Диагностические и лечебные процедуры производят до взятия крови. Допускается сдача крови в течение дня. В этом случае последний прием пищи должен быть не позднее, чем за 3 часа до сдачи крови.

Как производится анализ

Для того, чтобы обнаружить в крови возбудителя малярии, необходимо брать мазок. Его берут, несмотря на то, что вероятность обнаружения паразита в капле крови в несколько десятков раз выше. Кровь берется независимо от того, какая температура у пациента.

ВОЗ рекомендует, чтобы лаборант просмотрел не менее ста капель крови в каждом поле зрения. Просмотр каждого препарата крови не прекращается до тех пор, когда не будут исследованы все подготовленные препараты в рекомендуемом количестве.

Для анализа используется капиллярная кровь. Ее берут из пальца. Допускается исследование венозной крови. Препараты крови окрашиваются по методу Романовского- Гимза (Giemsa). Используется иммерсионная система, при окуляре 7, объективе – 90.

Какие результаты дает анализ на малярию

Интенсивность заражения определяется по количеству плазмодиев. При наличии от одного до ста плазмодиев в 10 полях зрения показатель соответствует 5 – 50 паразитов в одном мкл крови. Соответственно, если в поле зрения видно более ста паразитов, то в одном мкл крови содержится свыше 50 тыс. плазмодиев.

Интенсивность заражения также определяется количеством паразитов на 100 красных телец. Так, при поражении 10 процентов эритроцитов является неблагоприятным.

Особые случаи диагностики

В неэндемических регионах применяют серологическую диагностику малярии. Применяют методы иммунофлуоресценции, иммуноферментный анализ, реакцию непрямой гемагглютинации.

Кроме того, необходимо проводить дифференциальный анализ – с гриппом, ОРВИ, желтой лихорадкой, бруцеллезом, общим заражением крови, инфекциями органов выделения. Это делается для более точного определения диагноза малярии.