Микробиологическай анализ на аэробные и факультативно-анаэробные микроорганизмы

Культуральное исследование лаважной жидкости

Микробиологическое исследование лаважной жидкости проводится для выявления аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов  в нижнем отделе респираторного тракта и определения их чувствительности к антибиотикам.

Аэробные и факультативно-анаэробные микроорганизмы относятся к многочисленному семейству прокариотов, населяющих слизистые покровы здорового человека. Их различие заключается в том, что для обеспечения жизнедеятельности аэробов требуются молекулы свободного кислорода, факультативные анаэробы способны существовать при небольшом количестве кислорода или даже при полном его отсутствии.

При неблагоприятных для человеческого организма условиях (снижении иммунитета, переохлаждении, наличии очагов хронической инфекции) микроорганизмы начинают активно размножаться и провоцировать развитие в дыхательных путях воспалительных процессов – бронхита, пневмонии, абсцесса легкого и пр. Эти заболевания характеризуются образованием большого количества слизи. Для дифференциальной диагностики патологических процессов, протекающих в дыхательной системе, используют исследование бронхоальвеолярного лаважа – жидкости, полученной со стенок глубоко расположенных отделов паренхимы легких.

Когда делают анализ лаважной жидкости?

Культуральный посев лаважной жидкости проводят при:

• диагностировании диссеминированных заболеваний легких – туберкулеза, саркоидоза, фиброзирующего альвеолита;
• затяжном воспалении легких, при котором традиционные методы лечения неэффективны;
• хроническом бронхите;
• установлении этиогенеза очаговых патологических процессов в респираторном тракте;
• для диагностики пневмонии, эмпиемы плевры, бронхоэктатической болезни; 
• для подбора адекватного антибактериального препарата;
• для мониторинга проводимой терапии, оценки ее эффективности и решения вопроса о целесообразности изменении схемы лечения.

Как подготовиться к анализу лаважной жидкости?

Отбор лаважной жидкости производят в ходе выполнения бронхоскопии – с помощью гибкого фибро-бронхоскопа осуществляют смыв со стенок суб-сегментарных бронхов. Манипуляция выполняется под местной анестезией.

Накануне исследования пациенту необходимо:

1. Отказаться от курения и распития алкогольных напитков.
2. Исключить физическую и пищевую нагрузки – для предупреждения аспирации содержимого желудка длительность «голодного» периода должна составить не меньше 12-ти часов.
3. Принять седативное средство, рекомендованное квалифицированным специалистом.
4. Непосредственно перед процедурой опорожнить кишечник и мочевой пузырь.

Пациенты с бронхиальной астмой должны иметь ингалятор с бронхолитиком – данная манипуляция может вызвать бронхо-спазм.

Поскольку забор биологического материала проводится при проведении местной анестезии, специалист должен убедиться в отсутствии у обследуемого противопоказаний к используемому препарату. Манипуляция выполняется только при предварительном получении письменного согласия пациента.

Непосредственно перед отбором биоматериала необходимо проведение тщательной гигиены полости рта. Процедура должна быть выполнена до начала терапии антибактериальными препаратами, проведения биопсии, соскоба или по прошествии двух недельного интервала после них.

Методика получения биологического материала

Забор биоматериала выполняется в условиях лаборатории, при строгом соблюдении санитарных требований. Квалифицированный медицинский работник проводит орошение поверхности глотки раствором анестетика, после чего вводит в просвет бронха бронхоскоп. Внутренний канал бронхоскопа посредством стерильного шприца заполняется физиологическим раствором, объем которого может варьировать от 5 до 100 мл. Введенный физраствор отсасывается в пробирку или контейнер, который впоследствии плотно закручивается крышкой.

Цели и методика выполнения теста на антибиотикочувствительность

Антибактериальные препараты отличаются между собой особенностями воздействия на патогены и не во всех случаях проявляют свою эффективность. Порой их прием не приносит желаемого терапевтического эффекта, не оказывая влияние на течение заболевания. Такая ситуация имеет логичное объяснение: выбранные для лечения антибиотики не способны оказать губительное воздействие на бактерии.

Для обеспечения эффективности терапии необходимо наряду с выявлением возбудителя заболевания установить его устойчивость к антибактериальным препаратам. С этой целью проводится тестирование на антибиотикочувствительность. Емкость с находящимися на ней аэробными и факультативно-анаэробными микроорганизмами переносят на пропитанные разными видами антибиотиков бумажные диски. Продолжительность исследования составляет несколько дней, по прошествии которых производится оценка состояния колоний бактерий. Их рост указывает на резистентность возбудителя заболевания к препарату, а уменьшение концентрации патогенов, напротив, свидетельствует о чувствительности к медикаменту.

Что означают результаты анализа?

Полученная проба лаважной жидкости помещается на культуральные среды, обеспечивающие рост колоний инфекционных возбудителей.

Формулировка заключения «Роста микробных колоний не обнаружено» - отрицательный результат анализа.

Заключение положительного результата содержит сведения о выявленных возбудителях инфекции – их видах, количестве и восприимчивости к противомикробным препаратам.

В заключении по результатам микробиологического исследования лаважной жидкости отдельной таблицей приводится антибиотикограмма. Она содержит наименование применяемых при тестировании антибактериальных препаратов и установленную степень чувствительности, которая может иметь следующие обозначения:

• S - чувствителен. Выявленные представители аэробной и факультативно-анаэробной микрофлоры чувствительны к антибиотику, препарат оказывает на них губительное воздействие. Это означает, что прием данного медикамента окажет желаемый терапевтический эффект.
• I – умеренно чувствителен. Бактерии проявляют умеренную чувствительность к тестируемому антибиотику. Назначать его для лечения целесообразно исключительно при невозможности приема более результативных антибактериальных препаратов (например, по причине индивидуальной непереносимости), к которым патогены более чувствительны.
• R – устойчив. Возбудители заболевания являются устойчивыми к антибактериальному препарату. Медикамент никаким образом не влияет на жизнедеятельность бактерий, ввиду чего не способен привести к выздоровлению и не включается в схему терапию.

Результаты микробиологического исследования лаважной жидкости не могут рассматриваться в качестве единственного, обособленного критерия, положенного в основу диагноза. Необходим комплексный подход, при котором во внимание принимаются симптоматика заболевания, анамнез пациента, результаты иных анализов и обследований. При наличии необходимости врач назначает дополнительные диагностические манипуляции.

Вероятность получения искаженных значений

Недостоверные результаты культурального исследования могут быть получены вследствие проведения анализа при несоблюдении врачебных рекомендаций в части подготовки к процедуре забора биологического материала.  В особенности велика вероятность получения ложного результата при выполнении анализа на фоне приема антибактериальных препаратов. 

Также искаженные итоговые значения могут явиться следствием низкой квалификации медицинских работников, ошибок, допущенных при получении образца биоматериала и собственно его лабораторной культуральной диагностики. Это может быть использование нестерильной пробирки, хранение биоматериала в ненадлежащих условиях, сокращении отведенных сроков проведения тестирования. 

При обеспечении надлежащей подготовке к лабораторной диагностике и проведении исследования опытными квалифицированными специалистами медицинского центра риск получения недостоверных результатов практически исключается.

Дополнительные сведения

При выявлении в ходе культурального исследования лаважной жидкости аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов в концентрации, которая не превышает диагностически значимого порога, тестирование на антибиотикочувствительность не проводиться. Это обусловлено отсутствием необходимости приема антибактериальных препаратов.