Мазок на флору, окраска по Граму

(рабочие дни):
до 2 дн.
* Взятие биоматериала оплачивается отдельно
Микроскопический анализ мазка на флору

Когда делают анализ?
- факультативных анаэробов – бактероидов, энтеро-, микро- и пепто-кокков, клостридий, вейлонелл, превотелл, фузо-, эу- и кампило-бактерий;
- условно-патогенных микроорганизмов (аэробов) – стафилококков, корине-бактерий, кишечной палочки.
- Уменьшение количества лактобацилл провоцирует активный рост представителей условно-патогенной флоры и развитие дисбиоза, который способствует возникновению воспалительного процесса в матке и ее придатках, бесплодия, эктопической беременности, преждевременного родоразрешения.
- профилактических обследованиях – для оценивания состава микрофлоры;
- наличии у пациентки клинических признаков дисбиоза влагалища и инфекционно-воспалительных заболеваний мочеполовых органов.
Правила подготовки к анализу

- Не проходить обследование в период менструального кровотечения.
- В течение 3-х суток воздержаться от интимной близости.
- Накануне процедуры взятия мазка исключить спринцевание и использование вагинальных антибактериальных средств.
- В день исследования отказаться от туалета интимной зоны – все гигиенические процедуры выполняют вечером.
- За 2 часа до взятия биоматериала не опорожнять мочевой пузырь.
Как берется мазок
Суть исследования мазка по Граму

Дифференциальную методику, предложенную Гансом Кристианом Грамом еще в конце 19-го столетия, широко используют и в настоящее время для определения биоценоза половых путей женщины и выявления ключевых клеток – слущенных частиц эпителиального слоя, покрытых патогенными бактериями. Принцип данного диагностического способа заключается в приготовлении из отобранного биологического материала мазков и их окрашивании веществами трифенилметанового ряда – становясь нежизнеспособными, бактерии принимают разные оттенки:
- грамположительные, имеющие толстую клеточную стенку – фиолетовый;
- грамотрицательные – розовый.
Это явление позволяет специалисту достоверно определить преобладающую в мазке микрофлору.
Большая часть слизистых покровов урогенитального тракта женщины репродуктивного возраста населена палочками Дедерлейна (лакто-бациллами), обеспечивающими производство пероксида и лактата – органических соединений, которые необходимы для обеспечения кислотности внутренней среды и подавления размножения болезнетворных микроорганизмов. Снижение их численности приводит к нарушению баланса микробиоты и росту условно-патогенной флоры, присутствующей во влагалище в умеренном количестве. В случае дисбиоза резкое снижение общей либо местной иммунной защиты, пренебрежение гигиеническими требованиями, нарушение метаболизма и гормонального фона, переохлаждение организма либо бесконтрольное применение антибактериальных препаратов могут спровоцировать развитие инфекционно-воспалительных процессов, осложнениями которых являются заболевания матки и яичников, эктопическая беременность, бесплодие, преждевременное родо-разрешение.
Исследование мазка по методике Грама, которая считается «золотым стандартом» диагностики дисбактериоза влагалища (100% достоверности), помогает врачу в:
- Проведении полуколичественного оценивания общей микробной обсемененности.
- Изучении состояния эпителиальных клеток.
- Выявлении воспалительной реакции и установлении степени ее выраженности.
- Определении состава микробиоты.
- Обнаружении заболеваний, которые распространяются при интимных контактах.
Техника окрашивания мазков
Методика исследования по Граму включает несколько этапов:
- нанесение на зафиксированный мазок 0,8 мл генцианвиолента и промывание под проточной водой спустя 60 секунд;
- нанесение на поверхность раствора Люголя на 30 с и промывание, когда препарат не приобретет темно-коричневый оттенок;
- обесцвечивание мазка смесью из этилового спирта 96% и ацетона, промывание под проточной водой через 15 с;
- нанесение на препарат 0,8 мл фуксина Пфейфера на 60 с и смывание излишков краски проточной водой;
- подсушивание препарата, нанесение на его поверхность иммерсионного масла и микроскопирование.
Нормальные показатели мазка на флору
На слизистых покровах половых путей здоровой женщины должны присутствовать:
клетки плоского эпителия – их отсутствие ассоциировано с атрофией эпителиального слоя, дефицитом либо избытком половых гормонов;
- лейкоциты – не более 10-12 в поле зрения, увеличение их числа наблюдается при воспалительной реакции;
- слизь;
- лакто-бактерии (до 95%);
- грамположительные кокки.
Для оценивания итоговых данных исследования мазков, окрашенных по методу Грама, используют критерии Ньюджента – их основу составляет система баллов, подсчет которых позволяет диагностировать и определить степень бактериального вагиноза. С этой целью изучаются представители 3-х морфотипов (бактериальных морфологических видов) микробиома влагалища:
«А» – лакто-бациллы (большие грамположительные палочки);
«В» – бактероиды и гарднереллы (мелкие грамотрицательные кокки);
«С» – мобилункусы (изогнутые грам-вариабельные палочки).
По количеству выявленных в мазке морфотипов начисляются баллы, которые затем суммируют («А» + «В» + «С») – результат:
- от 0 до 3-х баллов – свидетельствует о нормальном состоянии влагалищной флоры;
- от 4-х до 6-ти – промежуточной микрофлоре;
- от 7-и до 10-ти – бактериальном вагинозе.
Точность итоговых данных исследования мазка по Граму обеспечивается изучением сразу нескольких критериев – это снижает возможность получения ошибочных результатов.
Расшифровка анализа
- Нормоценоз – грамотрицательная микрофлора отсутствует, преобладают лакто-бациллы, наблюдаются единичные эпителиальные клетки и лейкоциты.
- Промежуточный – количество лакто-бацилл снижено, обнаруживаются грамотрицательные палочки и грамположительные кокки.
- Дисбиоз – молочнокислые бактерии практически отсутствуют, преобладает кокковая и палочковая флора, выявляются микоплазмы, гарднереллы, уреаплазмы.
- Вагиноз – лакто-бактерии не обнаруживаются, может присутствовать большое количество эпителия, лейкоцитов, дрожжеподобных грибков, возбудителей мочеполовых инфекций.
Микроскопическое исследование урогенитального мазка не позволяет определить восприимчивость микроорганизмов к лекарственным средствам (для этой цели необходимо провести бактериологический посев) и обнаружить наличие микоплазм, хламидий, уреаплазм, герпес- и папиллома-вирусов (для диагностики инфекционных заболеваний, возбудителями которых они являются выполняют иммуноферментный анализ крови либо молекулярно-биологическое исследование с помощью полимеразной цепной реакции).