Молекулярно-биологическое исследование клеща на Borrelia burgdorferi
Исследование клеща на возбудителей иксодовых клещевых боррелиозов
Молекулярно-биологическое исследование клеща на возбудителей иксодовых клещевых боррелиозов группы Borrelia burgdorferi, направленное на выявление фрагментов их генетического материала, выполняется для своевременного диагностирования клещевых инфекций, проведения экстренных профилактических мероприятий и специфической патогенетической терапии.
Клещи рода Ixodes являются переносчиками РНК-содержащих бактерий Borrelia burgdorferi, которые вызывают развитие трансмиссивных природно-очаговых заболеваний. Бактерии имеют 2 основных специфических белковых компонента, характеризующих степень способности инфекционных агентов вызывать патологический процесс – флагеллин (P41) и HSP60.
Человеку боррелиозы передаются при раздавливании внедрившегося в кожные покровы клеща, его заражение происходит при укусе инфицированных грызунов, диких и сельскохозяйственных животных – возбудитель проникает в кишечник, слюнные и половые железы насекомого и сохраняется там до конца его жизни.
Заболевания, передающиеся иксодовыми клещами, носят сезонный характер – с мая по сентябрь, группу риска составляют лица, которые посещают очаги обитания насекомых. Три вида боррелий, которые относятся к семейству Spirochaetaceae – Borrelia burgdorferi sensu stricto, Borrelia garini и Borrelia afzelii, вызывают развитие болезни Лайма (или системного клещевого боррелиоза). Длительность инкубационного периода в среднем составляет 1 месяц. После проникновения возбудителя в кровяное русло, иммунные клетки способны его захватить, но не обезвредить. Инфекционные агенты с током крови попадают в печень, селезенку и лимфатические узлы – здесь происходит их активное размножение. Клиническая симптоматика недуга характеризуется быстрым нарастанием лихорадки, цефалгии, светобоязни, миалгии, рвоты.
Инфекционный процесс протекает в нескольких фазах:
- Локальной – у пациента наблюдается лихорадочное состояние, интоксикационный синдром, цефалгия, распространенная эритема (кольцевидное покраснение), кашель, тошнота (вплоть до рвоты), воспаление регионарных лимфатических узлов, болезненные ощущения в суставах, расстройство стула.
- Лимфо- и гемто-генных диссеминаций боррелий – сопровождается поражением органов зрения, опорно-двигательного аппарата, печени, почек, кожных покровов, нервной, сердечной и сосудистой систем.
Не специфичность признаков обусловлена способностью боррелий поражать различные органы и ткани. От своевременного диагностирования заболевания зависит успешность лечебных мероприятий и исход заболевания. В противном случае могут развиться неврологические расстройства, хронический артрит, тяжелые патологии сердца, приводящие к инвалидизации и даже гибели пациента.
Иксодовые клещи могут быть носителями бактерии Borrelia recurrentis, которая вызывает аргасовый клещевой боррелиоз (или эндемический возвратный тиф). Инфицирование насекомого происходит при укусе больного человека. Инкубационный период длится 2 недели. Заболевание начинается с выраженной интоксикации и высокой температуры, которые сохраняются в течение 4-х дней. После лихорадочного периода наступает апирексия – промежуток между приступами, общее количество которых достигает 10-ти и больше. Инфекционный процесс продолжается 2-3 месяца, после его окончания формируется длительный иммунитет. Однако при повторном укусе клеща, заболевание повторяется. Осложнениями возвратного тифа являются воспаление увеального тракта, радужной оболочки и роговицы органов зрения. Тяжелое течение инфекции осложняется поражением оболочек головного и спинного мозга.
Для выявления возбудителей описанных заболеваний используют обследование укусившего человека клеща, при чем это необходимо сделать, не дожидаясь появления клинической симптоматики инфекционного процесса.
Показания для проведения анализа
Практикующие инфекционисты назначают исследование клеща на возбудителей иксодовых клещевых боррелиозов группы Borrelia burgdorferi для:
- выявления возможного заражения клеща;
- диагностирования клещевых инфекций;
- определения процента инфицированности насекомых в местах их природного обитания.
Как извлечь клеща
Обнаружив внедрившегося в участок тела клеща, следует обратиться за медицинской помощью. При отсутствии такой возможности, клеща можно извлечь самостоятельно – с этой целью необходимо выполнить следующие действия:
- Обернуть марлей пальцы и перехватить ними тельце насекомого.
- Повернуть тело клеща вокруг оси и удалить его.
- Насекомое рекомендуется поместить в специальную герметическую емкость, предварительно положив на ее дно кусочек смоченной водой ваты. Категорически запрещено помещать в один контейнер клещей, извлеченный из тел разных людей!
После завершения процедуры удаления клеща нужно вымыть руки с мылом, а раневую поверхность обработать антисептическим средством (медицинским спиртом, раствором бриллиантовой зелени или йода).
Методика проведения анализа
Исследовать клеща лучше в день его снятия с тела, именно поэтому емкость должна быть доставлена в ближайшее медицинское учреждение. Живое насекомое может храниться при температуре до +8 С в течение 30 дней, мертвое – не больше пяти.
Для выполнения исследования используется самый быстрый и достоверный способ диагностики инфекционных заболеваний – полимеразная цепная реакция. Эта методика молекулярной биологии позволяет значительно увеличить малые концентрации нуклеиновой кислоты путем создания большого количества ее копий.
Интерпретация результатов анализа
Показатель нормы имеет следующее заключение: «Фрагменты генетического материала, специфичные для бактерий Borrelia burgdorferi sensu lato, не обнаружены». Этот результат – отрицательный, который указывает на то, что клещ не является «резервуаром» данных инфекционных возбудителей.
Положительный результат анализа свидетельствует об инфицированности насекомого.