Определение антител к Clostridium tetani в крови (Столбняк, IgG)

Анализ крови на антитела к Clostridium tetani

Серологический анализ крови, с помощью которого возможно обнаружить и определить количество специфических антител изотипа G (IgG) к возбудителю столбняка – Clostridium tetani, проводится для выявления инфицирования, решения вопроса о необходимости введения столбнячного анатоксина и оценивания эффективности вакцинации.

Характеристики исследования:

• Тип биоматериала: венозную кровь.
• Синонимы (rus): антитела к возбудителю столбняка, противостолбнячные антитела, антитела к столбнячному анатоксину.
• Синонимы (eng): Anti-Clostridium tetani antibodies, Anti-Clostridium tetani Ab, Clostridium tetani Ab.
• Методы исследования: иммуноферментный анализ.

Столбняк представляет собой острый микробно-токсический инфекционный процесс, возникающий вследствие воздействия на нервную и мышечную системы токсина грамположительной бактерии – столбнячной палочки. Заражение происходит контактным путем – споры возбудителя проникают в человеческий организм через дефект кожных или слизистых покровов. Clostridium tetani производит сильнодействующий токсин, который подавляет нейрональные тормозные сети спинного мозга и вызывает неконтролируемые мышечные сокращения. Первыми поражаются жевательные мышцы, затем появляются трудности при глотании, болезненные сокращения мышц лица и постепенное повышение тонуса затылочных, шейных, спинных, диафрагмальных, брюшных, тазовых и остальных поперечнополосатых и гладких мышц. В ответ на инфицирование C. tetani в человеческом организме вырабатываются антитоксические иммуноглобулины классов А, М и G, обеспечивающие формирование иммунного ответа.

Предотвратить заражение столбнячной палочкой позволяет специфическая вакцинация, после проведения которой иммунная система производит защитные антитела изотипа G.

Когда делают анализ на антитела?

Анализ крови на противостолбнячные антитела необходимо при:

• диагностировании столбняка;
• оценивании успешности вакцинации против инфекционного возбудителя;
• определении напряженности иммунитета.

Как подготовиться к анализу крови?

Биологический материал – образец крови из вены, для исследования используют плазму без фибриногена. Венепункция осуществляется в утренние часы (с 8.00 до 11.00), натощак.

Накануне процедуры пациент должен ограничить курение и воздержаться от:

• употребления спиртных и кофеин-содержащих напитков;
• физической нагрузки;
• психоэмоционального напряжения.

Важность исследования

Столбняк относится к опасным инфекционным заболеваниям, которые чаще всего приводят к летальному исходу при отсутствии своевременной диагностики. Для идентификации патогенного микроорганизма и исключения риска ложных сведений используют ИФА методику. Это золотой стандарт лабораторной диагностики, при использовании которого невозможно ошибиться в диагнозе. Если же заражение произошло, но диагностика отсутствует, это чревато развитием следующих осложнений:

• распространение инфекции в органах дыхания с поражением бронхов, альвеол легких, что постепенно приведет к тяжелому случаю респираторной инфекции, так как вентиляция дыхательных путей подавляется за счет мышечного спазма и продолжительного постельного режима;
• сердечная аритмия;
• острый инфаркт миокарда, который развивается при тяжелом течении патологии, так как сердечная мышца теряет свою функциональность за счет воздействия токсина (чаще всего такое осложнение встречается у лиц пожилого возраста);
• сепсис, то есть бактериальное заражение крови в случае, если микроорганизм в обильном количестве распространяется в системный кровоток, что вызывает перемещение воспалительного процесса во все внутренние органы и системы с последующим нарушением их функциональности;
• поражение опорно-двигательного аппарата в крайне тяжелом случае – наблюдаются вывихи, переломы, разрывы, растяжения и другие дефекты;
• контрактуры суставов, что приводит к нарушению двигательной активности вплоть до ее полного отсутствия с развитием сильной боли;
• паралич черепных нервов, что вызывает устранение функции глотания, неправильное зрительное восприятие и опущение века (птоз).

В процессе исследования выявляют не сам столбняк, а наличие антител, которые вырабатываются иммунитетом для уничтожения микроорганизма. Поэтому необходимо использовать диагностический тест в виде иммуноферментного анализа, который в точности выявляет IgG. Эти антитела сохраняются в системном кровотоке продолжительно после заражения инфекцией, завершения всех методов терапии, вакцинации. В процессе диагностики выявляют не только наличие антител, но и их точный уровень, так как от этого параметра зависит степень распространения патогенного микроорганизма, качество иммунной защиты.

Для чего необходим анализ крови на антитела к Clostridium tetani

Основная цель проведения анализа заключается в получении следующей информации:

• возможность содержания антител против клостридии, если произошло заражение, поэтому необходимо подтвердить дифференциальный диагноз;
• исключение возможности бактериальной инфекции других видов, при наличии идентичной клинической симптоматики;
• определение потребности в специфической антибактериальной терапии для уничтожения клостридии, так как в профилактических целях подобную терапию не проводят;
• оценка напряженности иммунитета после завершения всех тактик лечения, но для этого требуется выждать несколько месяцев, прежде чем повторно сдавать кровь на анализ;
• отслеживание эффективности проведенной вакцинации сразу после введения препарата, а также спустя 3, 5, 8 лет, чтобы оценить наличие или отсутствие потребности в повторном введении средства против инфекции столбняка.

В данном случае иммунитет выделяет IgG, направленные только против бактерий клостридии. В отношении других микроорганизмов такие антитела не эффективны. Поэтому благодаря иммуноферментному анализу можно судить о наличии инфекции, сохранении резистентности организма против ее вторжения.

Особенности анализа на противостолбнячные антитела

При оценке иммунитета против клостридии выбирают только иммуноферментный анализ. Для этого теста выделяют ряд особенностей:

• образцом для исследования служит только венозная кровь, так как туда вырабатываются все виды антител, в том числе IgG против клостридий;
• содержание форменных элементов крови в образце может помешать определению антител, поэтому их предварительно удаляют при помощи центрифугирования или разделительного геля;
• в полученной сыворотке содержатся все виды антител, которые выделяет иммунитет, для выявления только IgG против клостридий необходимо добавление искусственного реагента, в котором содержатся антигены, входящие во взаимосвязь с этими иммуноглобулинами;
• суть анализа сводится к получению иммунных комплексов антиген-антитело с их дальнейшей идентификацией посредством автоматического оборудования;
• в качестве анализатора используют фотокалориметр, он пропускает лучи света с запрограммированной длиной воны через биоматериал, часть из них отражается от иммунных комплексов и возвращается к датчику, регистрация этого сигнала осуществляет подсчет антител;
• так как столбняк часто приводит к тяжелым осложнениям вплоть до летального исхода, требуется быстрая диагностика при появлении первых симптомов, поэтому результаты анализа отправляют врачу уже в течение часа после получения крови;
• если анализ не экстренный (например, для оценки резистентности иммунитета после перенесенного заболевания или вакцинации), анализ проводят максимально в течение 3 дней;
• тест полностью безопасный, при этом информативный и достоверный, поэтому его всегда используют при оценке реакции иммунитета на клостридии.

Важно помнить, что благодаря анализу выявляют реакцию иммунитета в ответ на возбудитель инфекции. Но сам патогенный микроорганизм не идентифицируют. Поэтому невозможно сказать, присутствуют ли он на данный момент, или же это антитела, которые сохранились после пережитой инфекции. Вследствие этого фактора требуется учитывать клиническую симптоматику и возможность ранее проводимой вакцинации.

Метод проведения

В процессе диагностики антител используют иммуноферментный анализ, который начинают проводить сразу после транспортировки образца венозной крови в лабораторию.

1. Получение сыворотки из цельной крови. Всю биологическую жидкость не исследуют, первоначально ее отправляют в центрифугу. Прибор подключают на 1000 оборотов, после завершения вращения форменные элементы выделяются вниз, а сыворотка остается в верхней части пробирки.
2. Заполнение лабораторного планшета. Сыворотку отбирают лабораторным шприцем, для каждого пациента в отдельности используют одноразовый наконечник. Биоматериал переносят в планшет. В эту же емкость добавляют реагент, в котором содержатся антигены, избирательно связывающиеся лишь с IgG против клостридий.
3. Размещение образца в термостат. В обычном виде иммунные комплексы формируются очень долго, вплоть до нескольких дней. Для сокращения этого периода температуру жидкости немного поднимают.
4. Фотоколориметрия. После термостата образец сразу же переносят в кювету фотокалориметра. В аппарате устанавливают длину волны, подходящую для определения IgG против клостридий. Световые лучи отражаются от каждых иммунных комплексов, затем оцениваются датчиком. Итоговая информация распечатывается на лабораторном бланке.

Важно помнить, что исследование чаще всего проводится не при наличии признаков заражения инфекции, а для отслеживания напряженности иммунитета после болезни или вакцинации.

Что означают результаты анализа крови?

В крови здорового человека наличие антител к возбудителю столбняка обнаруживается только при инфицировании и после вакцинации. Для измерения титра IgG используют калибровку с международным стандартом для столбнячного иммуноглобулина:

• до 0,01 МЕ/мл – свидетельство недостаточного уровня защитных антител, требующий вакцинации;
• до 0,1 МЕ/мл – слабый иммунитет, необходима ревакцинация;
• от 0,11 до 0,49 МЕ/мл – имеется кратковременная иммунная защита, рекомендуется ревакцинация;
• от 0,5 до 0,99 МЕ/мл – поствакцинальные антитела присутствуют, повторную иммунизацию следует провести через 3 года;
• от 1,0 до 4,9 МЕ/мл – долговременная иммунная защита, проведение серологического контроля рекомендуют через 5 лет;
• свыше 5,0 МЕ/мл – стойкий поствакцинальный иммунитет, ревакцинацию проводят не ранее, чем спустя 8 лет.

Итоговые данные исследования не являются диагнозом и содержат информацию для лечащего врача.