Ретикулоциты

Кучеренко Лариса Николаевна
Кучеренко Лариса Николаевна Заведующая общеклинического отдела КДЛ,

Определение ретикулоцитов


Ретикулоциты — это молодые формы красных кровяных телец, или эритроцитов, их производителем является красный костный мозг. Новые ретикулоциты находятся в нем до 44 часов. После поступают в кровь и доспевают около 24-30 часов, превращаясь в настоящие эритроциты.

Сдать анализ крови на определение ретикулоцитов в лаборатории Оптимум в Сочи Для определения ретикулоцитов требуется цельная кровь, забор производится утром натощак. Перед выполнением анализа нельзя есть жирную, острую и жаренную пищу. Рекомендуется ограничить курение и запрещено употребление спиртных напитков. Следует исключить физические нагрузки и моральное напряжение.

На результат анализа могут оказать влияние рентген, физиотерапевтические процедуры и ультразвуковое исследование. Сдать кровь на определение ретикулоцитов лучше спустя сутки после подобных манипуляций.

Регулярный прием лекарственных препаратов может повлиять на количественный состав крови, перед проведением общего анализа необходимо поставить в известность врача о применяемых медикаментах.

Важно: Определение ретикулоцитов следует проводить в одном и том же диагностическом центре. Результаты анализа могут интерпретироваться по-разному в лабораториях из-за использования различных аналитических препаратов и методик.

Подсчет ретикулоцитов показывает картину того, как происходят восстановительные процессы костного мозга. Когда скорость синтеза эритроцитов увеличивается, уровень ретикулоцитов в крови периферии повышается, при уменьшении - снижается. Чаще всего показаниями для определения уровня несозревших эритроцитов является выявление анемии и оценивание эффекта их терапии.

Условия хранения: кровь после забора нужно исследовать сразу. При необходимой транспортировке кровь в пробирках замораживать не следует. При заборе крови пробирка наполняется до специальной метки, затем помещается в центрифугу для отделения плазмы. В период беременности количество ретикулоцитов может быть незначительно повышен.

Увеличение уровня ретикулоцитов


Когда число ретикулоцитов увеличивается, это может означать ускорение синтеза крови в красном костном мозге, вызванное:

  • Анализ крови на ретикулоцитыгемолитической анемией, при этом уровень ретикулоцитов может достигать 60%;
  • острой потерей крови, что дает основание предполагать внутреннее кровотечение, например, при язве желудка, кишечника;
  • полицитемией;
  • терапией железосодержащими препаратами железодефицитной анемии;
  • асфиксией;
  • метастазами злокачественных образований в костный мозг.

Понижение либо ретикулоцитопения (повышение) свидетельствует о:

  • арегенераторной, апластической и гипопластической анемии;
  • анемии, образованной низким количеством железа, витамина B12, фолиевой кислоты;
  • сидеробластной анемии;
  • внедрении метастазов новообразования в кости;
  • лучевом заболевании или лучевой терапии;
  • лечении цитостатиками;
  • аутоиммунных патологиях кроветворных органов;
  • дисфункции или патологии почек;
  • злоупотреблении алкоголем;
  • повторной анемии Аддисона-Бирмера;
  • микседеме.

Ошибки при определении ретикулоцитов


Лабораторный анализ кровиВысокий уровень ретикулоцитов бывает ложным вследствие содержания:
  • чужеродных тел или включений в эритроцитах;
  • большого лейкоцитоза;
  • необычной формы гемоглобина;
  • повышенного тромбообразования;
  • огромных тромбоцитов.

Исследование такого анализа обычно назначается терапевтом, хирургом, гинекологом, инфекционистом.


Методика подсчета ретикулоцитов

Этот показатель имеет важное диагностическое значение, которое позволяет оценить функциональную деятельность костного мозга. Молодые формы красных кровяных телец более крупнее зрелых. Их цитоплазма содержит ретикулум – эндоплазматическую сеть, которая образована тонкими мембранами, формирующими во внутренней среде клетки сложную систему канальцев, цистерн и вакуолей. Ретикулоциты разделяют по степени зрелости на 5 видов – имеющих зернисто-сетчатую субстанцию в виде:

  • плотного венчика, расположенного вокруг ядра;
  • клубочка;
  • густой сети;
  • отдельных нитей;
  • отдельных зернышек.

Считается, что около 80% ретикулоцитов относится к четвертому и пятому виду.

Принцип выполнения исследования основан на использовании суправитальных красителей (насыщенного раствора бриллиантового крезилового синего или азура Корикова), позволяющих выявить зернисто-сетчатую субстанцию клеток. Их подсчет может быть осуществлен после окраски крови непосредственно в пробирке либо на предметном стекле.

Для окрашивания в пробирке используют одну из трех методик:

  1. Методика подсчета ретикулоцитовВ рабочий раствор красителя добавляют 40 мкл крови, тщательно перемешивают и оставляют на полчаса. По истечении этого времени вновь перемешивают и готовят тонкий мазок.
  2. Смешивают 50 мкл краски и 200 мкл крови, оставляют на 25 минут и приготавливают мазок.
  3. В пробирку вносят 300 мкл краски и 5 капель крови, закрывают резиновой пробкой, тщательно смешивают и оставляют на 90 минут, затем перемешивают и готовят мазок. 

Для окрашивания на стекле используют заранее подготовленные и хранящиеся в темном месте предметные стекла, на которые тонким мазком предварительно нанесли красители (используются хорошо вымытые и обезжиренные стекла). На краску наносят каплю крови и с помощью шлифованного стекла выполняют мазок – образец помещают на 3 минуты во влажную камеру, а затем высушивают на открытом воздухе.

В правильно приготовленных образцах эритроциты расположены в один ряд и имеют желтовато-зеленоватый оттенок, ретикулум – синий либо синевато-фиолетовый. Подсчет ретикулоцитов выполняется под микроскопом с помощью иммерсии (введении между оптикой и исследуемым предметом специального масла, позволяющего усилить яркость и расширить пределы увеличения изображения) и заключается в следующих действиях:

  • исследуются до 20-ти полей зрения и отмечается численность эритроцитов и ретикулоцитов; 
  • при достижении 1000 клеток прекращают микроскопию;
  • производство ретикулоцитов рассчитывается по формуле «(Рт х на гематокрит : на 45) : на время созревания».

Полученный показатель, отражающий костномозговую продукцию, является наиболее точным и должен обязательно использоваться при обследовании пациента с анемией. Абсолютное количество ретикулоцитов у женщин может колебаться от 16,9 до 63,7 Г/л, у мужчин – от 22,9 до 69,9 Г/л. Их процентное соотношение к общему количеству эритроцитов зависит от возраста:


Пол

Возраст

Референсные значения (%)

Женский

до 2-х недель

0,14-1,4

до 1 месяца

0,44-1,4

до 2-х месяцев

0,44-2,09

до полугода

0,24-0,89

до 2-х лет

0,19-0,99

до 6-ти лет

0,19-0,59

до 12-ти лет

0,2-1,2

до 15-ти лет

0,11-2,04

взрослые

0,6-2,06

Мужской

до 2-х недель

0,13-1,39

до 1 месяца

0,43-1,39

до 2-х месяцев

0,43-2,06

до полугода

0,23-0,88

до 2-х лет

0,18-0,98

до 6-ти лет

0,18-0,58

до 12-ти лет

0,19-1,19

до 15-ти лет

0,23-1,69

взрослые

0,66-1,9

 

При диагностировании скрытого кровотечения, оценивании активности кровопотери и резерва кроветворения, а также мониторинге состояния пациента после трансплантации костного мозга или почки, интенсивной химио- или цитостатической терапии, воздействия токсических веществ и проведенной терапии фолиевой кислотой, цианкоболамином либо железом определяется фракция незрелых («стрессовых») ретикулоцитов. Эти клетки отличаются высоким содержанием рибонуклеиновой кислоты и большими размерами – эти качества придают им наибольшее светорассеяние. Показатель IRF является чувствительным маркером активации процесса образования в костном мозге эритроцитов – эритропоэза. В норме у женщин он составляет 2,9-15,8%, у мужчин – 2,2-13,3%.