Количественный ПЦР анализ на Ureaplasma spp.

Молекулярно-биологическое исследование отделяемого слизистых оболочек с помощью ПЦР, которое позволяет обнаружить фрагменты генетического материала Ureaplasma spp. (Ur.parvum+Ur.urealyticum), проводится для диагностирования уреаплазменной инфекции и выявления бессимптомного носительства данных бактерий.

Характеристики исследования:

Тип биоматериала: отделяемое слизистых покровов урогенитального тракта
Синонимы (rus): Количественный анализ отделяемого слизистых оболочек на уреаплазмы методом ПЦР
Синонимы (eng): Quantitative analysis of the removed mucous membranes on Ureaplasma by PCR
Методы исследования: ПЦР
Сроки выполнения: 4 дня

Ureaplasma spp. являются условно-патогенными микроорганизмами, способными расщеплять основной азотсодержащий продукт белкового распада – мочевину. На сегодняшний день известно множество видов этих бактерий, однако наиболее болезнетворными для организма человека считаются:

Ureaplasma urealyticum – вызывает воспалительный процесс в мочеполовой системе;
Ureaplasma parvum – обитает на поверхности слизистых покровов урогенитальных органов и может провоцировать у женщин возникновение дисбиоза влагалища, а у мужчин нарушает состав и качество семенной жидкости.

Источником инфекции является человек, больной уреаплазменной инфекцией и бессимптомный ее носитель. Заражение возможно половым, контактно-бытовым и вертикальным путем. Инкубационный период продолжается приблизительно один месяц. Однако воспалительное заболевание развивается не всегда, а лишь при определенных обстоятельствах – нарушении факторов местной защиты, наличии сопутствующих инфекционных процессов и иммунодефицита.

Чаще всего проявления уреаплазмоза слабо выражены, бактерии вызывают: у мужчин – цистит, не-гонококковый уретрит, орхит, простатит, эпидидимит, у женщин – эндометрит, аднексит, внематочную беременность, бесплодие. Осложнениями уреаплазменной инфекции являются реактивный артрит, мочекаменная болезнь, менингит и бронхолегочная патология у навороженных младенцев.

Отличительные особенности уреаплазм:

обнаруживаются более чем у 50% здоровых людей, не подозревающих о наличии у них данной инфекции;
могут диагностироваться у детей;
часто выявляются только у одного из половых партеров;
отличаются высокой устойчивостью к антибактериальным препаратам и сложно поддаются терапии, часто определяются повторно после неоднократно пройденных курсов лечения.

Когда требуется проведение количественного анализа?

Определение ДНК уреаплазм (Ureaplasma spp.) (Ur.parvum+Ur.urealyticum) в отделяемом слизистых оболочек методом ПЦР проводится:

при положительном результате качественного исследования на ДНК уреаплазм с целью контроля терапии;
при наличии заболеваний, имеющих преимущественно половой способ передачи;
для выявления причин реактивного артрита;
при подозрении на наличие у пациента уреаплазмоза;
для профилактического обследования;
при планировании рождения ребенка;
при клиническом разграничении инфекционно-воспалительных процессов в органах мочеполовой системы.

При отсутствии характерных признаков наличия воспалительного процесса проведение исследования показано следующим категориям лиц:

пациенты, не зависимо от половой принадлежности, имеющие диагноз бесплодие;
пациенты, в анамнезе которых отмечаются: внематочная беременность, невынашивание беременности, преждевременные роды, рождение ребенка с низкой массой тела;
доноры спермы.

Кто назначает исследование

Количественное определение ДНК уреаплазм методом ПЦР назначают такие специалисты как: гинеколог, венеролог, уролог.

Подготовка к проведению исследования на ДНК уреаплазм

За 24 часа, предшествующие забору биологического материала для исследования не допустимо:

принимать ванну, проводить влагалищный душ;
использовать тампоны, проводить интравагинальное введение любых лекарственных препаратов;
использовать для туалета половых органов средства личной гигиены;
употреблять алкоголь.

Рекомендации для пациента:

воздержаться от половых контактов;
подмываться только вечером теплой водой (утренний туалет не проводят);
интравагинальные спринцовки запрещены до анализа;
отказаться от приема антибиотиков и гормональных препаратов за несколько дней до анализа;
за два часа до манипуляции отбора биоматериала постараться не мочиться.

Когда лучше всего сдавать анализ на уреаплазменную инфекцию женщинам?

Уровень ureaplasma spp. в отделяемом слизистых оболочек женского организма постоянно видоизменяется в течение менструального цикла. Значения могут отличаться в 1000 раз. По этой причине для максимальной достоверности результатов сдавать анализ на определение ДНК уреаплазм желательно в дни менструального цикла, при которых концентрация этих микроорганизмов приближается к своим пиковым показателям. Речь идет о 4-7 и 21-28 днях цикла.

Количественное исследование ДНК уреаплазм для терапии патологии

Если результат качественного исследования отделяемого слизистых оболочек на определение ДНК уреаплазм оказался положительным, необходимо проведение количественного анализа, позволяющего установить конкретную концентрацию ureaplasma spp. Данное исследование является обязательным перед назначением медикаментозной терапии. Это обусловлено необходимостью мониторинга динамики развития уреаплазменной инфекции и контроля результативности проведенной терапии.

Результаты повторных исследований (в динамике) подлежат сравнению с первоначально полученными при количественном анализе итоговыми значениями. С целью контроля эффективности лечебных мероприятий повторное исследование рекомендуется проводить спустя 1 месяц после завершения курса терапии. Так, снижение концентрации ДНК уреаплазм свидетельствует об результативности лечебного воздействия, в то время как превышение уровня ureaplasma spp. в сравнении с первоначальными показателями позволяет сделать вывод о том, что микроорганизмы выработали устойчивость к антибактериальному препарату, в результате чего он не производит ожидаемый терапевтический эффект. Это указывает на необходимость внесения коррективов в схему лечения.

Проведение исследования в динамике

Повторный количественный анализ на определение ДНК уреаплазм рекомендуется проводить в том же медицинском учреждении, где осуществлялось первоначальное исследование. Это имеет большое значение для достоверности полученных итоговых значений и обеспечения возможности на основе результатов анализов делать объективный вывод об эффективности проводимых терапевтических мероприятий. Сравнению подлежат только результаты исследований, проведенных в одном лабораторном центре, поскольку использование разных тестовых систем и оборудования, отличающегося степенью чувствительности, неизбежно приводит к определенным погрешностям в результатах.

Расшифровка анализа

В норме концентрация ДНК Ureaplasma spp. (Ur. parvum + Ur. urealyticum) составляет менее 104 геномных эквивалентов в 1 мл. Этот результат считается отрицательным, который опровергает наличие у пациента уреаплазмоза.

Повышение концентрации ДНК более 105 ГЭ/мл – положительный результат, указывающий на текущую уреаплазменную инфекцию.

Причины отрицательного результата:

отсутствие в исследуемом биологическом материале ДНК уреаплазм;
присутствие в исследуемом биоматериале ДНК ureaplasma spp. в концентрации, которая ниже порога чувствительности тестовой системы.

Результаты количественного исследования на определение ДНК уреаплазм должны быть интерпретированы лечащим врачом. Для постановки окончательно диагноза специалист учитывает результаты как данного, так и иных лабораторных анализов, клиническую картину патологии, сведения анамнеза пациента и его жалобы. Самостоятельная интерпретация итоговых значений и основанная на этом самостоятельная постановка диагноза не допустимы.

Что может повлиять на результат исследования?

Причиной получения недостоверных итоговых значений при проведении количественного анализа на ДНК уреаплазм может стать антибактериальная терапия. В таком случае велика вероятность ложноотрицательного результата исследования. Для того чтобы исключить данный фактор, рекомендуется сдавать анализ на уреаплазменную инфекцию как минимум по прошествии 14 суток с даты окончания антибактериальной терапии. В случае приема антибиотиков перорально, желательно выждать 30 суток.

Ограничения при проведении исследования

Анализ на ureaplasma spp. не проводится в следующих случаях:

в дни менструации;
ранее чем по истечении 24 часов после полового контакта;
ранее, чем по прошествии 24 часов после прохождения пациентом таких видов инструментального обследования как колоноскопия и интравагинальное ультразвуковое исследование.

Ureaplasma spp. (ПЦР количественное исследование)