Ureaplasma spp. (количественный анализ)

Доронин Иван Михайлович
Доронин Иван Михайлович Заведующий отделом ПЦР и генетики,

Количественный анализ ДНК уреаплазм


Определение ДНК уреаплазм (Ureaplasma spp.) с уточнением вида - Ureaplasma urealyticum методом ПЦР – быстрый метод, позволяющий количественно оценить наличие микроорганизма у пациента.

Ureaplasma urealyticumПодготовка к исследованию:

  • за сутки до сбора биоматериала не следует проводить интравагинальные спринцевания;
  • гигиенические процедуры рекомендуется проводить вечером накануне теста (в день анализа подмываться нельзя);
  • за два дня исключить половые контакты;
  • не мочиться за два дна часа до анализа;
  • за несколько дней до исследования следует отказаться от приема антибиотиков, гормональных препаратов и вагинальных свечей;
  • отбор материала не проводят в дни менструаций и спустя три дня после ее завершения.

Тип биоматериала: отделяемое слизистых покровов урогенитального тракта

Синонимы (rus): ДНК анализ на уреаплазмы

Синонимы (eng):  DNA analysis for Ureaplasma

Методы исследования: ПЦР

Сроки выполнения: 1-2 дня

Уреаплазмоз – распространенное воспалительное заболевание, передающееся половым путем, которое вызывает два вида уреаплазм: Ur. parvum и Ur. urealyticum. В последнее время уреаплазму принято считать условно патогенной бактерией, так как она обнаруживается у 40% женщин, не имеющих жалоб и клинических проявлений заболеваний.

Активация Ureaplasma urealyticum происходит при снижении местного иммунитета, при наличии сопутствующих ЗППП: хламидиозе, трихомониазе, бактериальном вагинозе и гонорее. Путь передачи преимущественно половой. Иногда вертикальный – от матери к плоду.

Клинические проявления уреаплазмоза весьма разнообразны. У женщин могут наблюдаться явления вагинита, цервицита, эндометрита, аднексита, сальпингита. Мужчины, страдающие уреаплазмозом, болеют уретритом, эпидидимитом, простатитом. Уреаплазмоз может нанести негативный отпечаток на репродуктивной функции, как женщин, так и мужчин. Хроническое воспаление маточных труб приводит к внематочной беременности, самопроизвольным абортам и преждевременным родам.

У плода уреаплазма может вызывать пневмонию, бронхолегочную дисплазию, сепсис и поражение ЦНС.

Ureaplasma spp.: краткое описание

Ureaplasma spp.: краткое описаниеUreaplasma spp. – условно-патогенные организмы, которое поселяются на поверхности клеточных мембран и оказываются защищенными от губительного воздействия на них со стороны иммунных клеток. Вредоносность ureaplasma spp. обусловлена их уникальной способностью к расщеплению мочевины и, как следствие, к выделению аммиака, оказывающего токсическое действие на клетки урогенитального тракта. 

Ureaplasma urealiticum, являются наряду с Ureaplasma parvum самыми распространенными видами ureaplasma spp, представляющими угрозу для организма человека. Уреаплазменная инфекция чаще диагностируется у пациентов женского пола – ей подвержены порядка 40% женщин.  У мужчин она встречается гораздо реже – по разным данным лишь у 5-15 % представителей сильного пола. Ureaplasma urealiticum по сравнению с Ureaplasma parvum диагностируется в меньшем числе случаев – 9% против 38% и считается менее агрессивной. 

Характерные признаки уреаплазменной инфекции

Продолжительность инкубационного периода может варьироваться от 14 дней до 5 недель, после чего могут наблюдаться такие проявления патологии, как:

  • слизистые гнойные выделения из мочеполового тракта;
  • жжение, зуд, рези, болезненность при мочеиспускании;
  • учащенное мочеиспускание;
  • дискомфорт в области промежности;
  • болевые ощущения при интимной близости;
  • гиперемия слизистой влагалища и наружного отверстия уретры.  

Когда делают анализ?


Определение ДНК микроорганизма Ureaplasma spp. с определением вида Ureaplasma urealyticum в отделяемом из уретры ПЦР-методом показано:
  • при планировании беременности;
  • при подозрении на наличие внутриутробной инфекции;
  • для диагностики причин не вынашивания беременности и преждевременных родов;
  • для диагностики бесплодия у мужчин и женщин;
  • для диагностики воспалительных заболеваний мочеполового тракта;
  • для контроля эффективности антибиотикотерапии;
  • при положительном результате качественного анализа на уреаплазменную инфекцию;
  • при выявлении уреаплазмы у полового партнера;
  • при наличии инфекций, передающихся половым путем;
  • после случайных половых связей;
  • перед проведением хирургических вмешательств на органах малого таза;
  • при профилактическом обследовании;
  • перед проведением ЭКО;
  • при патологиях беременности (замершая беременность, самопроизвольный аборт).

Кто назначает исследование

Кто назначает анализ на ДНК уреаплазмы Ureaplasma spp.Количественное определение ДНК Ureaplasma urealiticum назначают такие специалисты, как:

  • педиатр-неонатолог;
  • акушер-гинеколог;
  • инфекционист;
  • венеролог;
  • уролог.

Методика проведения анализа


Определение ДНК уреаплазмы Ureaplasma spp. в отделяемом из уретры с определением вида Ureaplasma urealyticum проводится методом полимеразной цепной реакции. Анализ является быстрым, надежным и определяет не только наличие уреаплазм, но и их количество.

Расшифровка анализа


В норме результат анализа отрицательный, то есть ДНК уреаплазм Ureaplasma spp. и Ureaplasma urealyticum не обнаружены.
В случае положительного ответа (наличия уреаплазмы в биологическом материале) дается количественная оценка – более 104 геномных эквивалентов в 1 мл. Интерпретация результатов производится лечащим доктором с учитыванием жалоб и клинической картины.

Причины отрицательного результата исследования:

  • отсутствие ДНК Ureaplasma urealiticum в исследуемом биоматериале;
  • определение ДНК Ureaplasma urealiticum в уровне, не достающем до минимального порога чувствительности используемой тест-системы. 

Что способно повлиять на достоверность исследования?

ПЦР метод отличается высокой точностью. Однако при воздействии отдельных внешних факторов достоверность итоговых значений может оказаться под угрозой. Так, концентрация ureaplasma urealiticum в исследуемом биологическом материале может быть снижена при проведении антибактериальной терапии. Это обстоятельство может привести к получению ложноотрицательного результата. В этой связи принимать антибиотики запрещено не только непосредственно на момент забора биоматериала, но и на протяжении 14 суток, предшествующих дате проведения анализа. 

Противопоказания и ограничения

Противопоказания и ограниченияАбсолютных противопоказаний к количественному анализу на ureaplasma spp нет. Однако имеется ряд ограничений. Исследование не проводится:

  • женщинам в критические дни;
  • в течение суток после полового акта;
  • в течение суток после колоноскопии или интравагинального УЗИ.

Рекомендации для женщин: оптимальное время для проведения исследования

В зависимости от фазы менструального цикла и даже от конкретного его дня концентрация ureaplasma spp. может существенно изменяться, причем разница значений доходит до 1000 раз.  В этой связи, планируя сдачу анализа на уреаплазменную инфекцию, следует отдавать предпочтение периодам с 4 по 7 и с 21 по 28 дни менструального цикла. Установлено, что именно в указанные промежутки времени концентрация ureaplasma spp в женском организме достигает своих максимально высоких значений.

Роль количественного исследования ДНК уреаплазм при проведении терапии

Положительный результат анализа на уреаплазменную инфекцию указывает на необходимость проведения количественного исследования, с целью определения конкретного уровня ureaplasma urealiticum в организме. Важно провести анализ до начала лекарственной терапии, поскольку в дальнейшем, для оценки эффективности лечения, все результаты проведенных последующих исследований будут рассматриваться в сравнении с первоначальными итоговыми значениями. Повторный анализ на количественное исследование ДНК уреаплазм проводится, как правило, по прошествии месяца после окончания лечения.  Снижение уровня ureaplasma указывает на эффективность терапии, а его увеличение означает отсутствие должного лечебного воздействия. Установлено, что ureaplasma spp. достаточно сложно поддается терапии, поскольку имеют высокую степень устойчивости ко многим современным антибактериальным препаратам. Часто уреаплазменная инфекция определяется даже после нескольких курсов терапии.

Количественное исследование ДНК ureaplasma urealiticum в динамике

 Количественный анализ на определение ДНК ureaplasma spp. в динамике проводится с целью сравнения полученных результатов с результатами предыдущих аналогичных исследований. С целью исключения возможных погрешностей итоговых значений рекомендуется сдавать все анализы в одном медицинском учреждении, чтобы исследование проводилось на одном оборудовании и с применением одной тестовой системы. Только соблюдая данное условие, при динамическом мониторинге уровня ДНК ureaplasma urealiticum, можно объективно судить об эффективности терапии.