ПЦР анализ мокроты на Streptococcus pneumoniae
Анализ мокроты на Streptococcus pneumoniae
Молекулярно-биологическое исследование, которое позволяет изучить мокроту (индуцированную мокроту, фаринго-трахеальные аспираты) и обнаружить фрагменты генетического материала Streptococcus pneumoniae, проводится для диагностирования пневмококковой инфекции, клинического разграничения инфекционно-воспалительных и аллергических заболеваний органов дыхательных путей.
Подготовка к исследованию:
- Заранее приобрести в аптечной сети специальный стерильный контейнер.
- Накануне процедуры в течение суток принимать отхаркивающие средства – это усилит отделение мокроты (по рекомендации врача).
Характеристики исследования:
- Тип биоматериала: мокрота
- Синонимы (rus): Пневмококк, неподвижный ланцетовидный диплококк
- Синонимы (eng): Pneumococcus, fixed lanceolate diplococci
- Методы исследования: ПЦР
- Сроки выполнения: 1-3 дня
Streptococcus pneumoniae (или пневмококк) представляет собой условно-патогенную бактерию семейства стрептококков. Данный микроорганизм локализуется в верхнем дыхательном тракте и провоцирует развитие воспалительных процессов. Инфекция передается воздушно-капельным путем, известны случаи заражения через пищевые продукты и столовую посуду.
В первую очередь бактерии осеменяют слизистые покровы носа и горла, вырабатывая особый антиген, который подавляет функциональную деятельность иммунной системы человека. Пневмококк вызывает развитие хронического бронхита, бронхиальной астмы, внебольничной пневмонии, менингита и сепсиса. Этим патологическим процессам наиболее подвержены:
- дети;
- лица пожилого возраста;
- пациенты с ВИЧ-инфекций;
- люди, страдающие алкоголизмом и наркоманией.
Для выявления пневмококка практикующие специалисты используют результаты бактериологического посева, микроскопического исследования мокроты, серологического скрининга и цитогенетического тестирования.
Streptococcus pneumoniae у мужчин, по сравнению с женщинами, диагностируются в два раза чаще. В подавляющем большинстве случаев данная бактериальная инфекция возникает на фоне таких заболеваний, как грипп, ветряная оспа, корь, внезапная экзантема, коклюш. Самыми часто встречаемыми клиническими проявлениями пневмококковой инфекции являются пневмонии (до 80%) и остро протекающий средний отит (до 60%). Также Streptococcus pneumoniae могут стать причиной развития синуситов (45%) и менингита (до 26% случаев). Наиболее часто Streptococcus pneumoniae поражает организм детей, возрастом от одного месяца до двух лет. Вспышки пневмоккоковой инфекции нередко наблюдаются в таких учреждениях как: детский сад, школа, детский дом-интернат, тюрьма, дом престарелых и инвалидов, военная часть, то есть в закрытых коллективах.
Факторы риска
Группу риска по развитию заболеваний, вызываемых Streptococcus pneumoniae, составляют пациенты, у которых диагностированы:
- хронические патологии дыхательной и сердечно-сосудистой системы;
- цирроз печени, сахарный диабет, болезнь Ходжкина;
- онкогематологические болезни;
- подтекание спино-мозговой жидкости;
- серповидно-клеточная анемия;
- анатомическая аспления.
Когда делают анализ?
Проведение молекулярно-биологического исследования мокроты на Streptococcus pneumoniae методом ПЦР необходимо при наличии у пациента:
- повышенной температуры;
- повышенной потливости;
- общего недомогания;
- кашля с отхождением мокроты;
- клинических проявлений внебольничной пневмонии – лихорадки, одышки, болезненных ощущений в грудной клетке, кашля с выделением «ржавого» патологического секрета.
Молекулярно-биологическое исследование на пневмококк проводится:
- при подозрении на менингит, острый отит, синусит, септическое состояние;
- для дифференциальной диагностики возбудителя пневмонии или бронхита;
- при частых инфекциях верхних дыхательных путей;
- при стертом течении легочной инфекции у лиц, страдающих иммунодефицитом;
- с целью контроля эффективности проводимой терапии.
Правила сбора мокроты
Мокрота представляет собой патологический секрет легких, бронхов, гортани и трахеи, отделяемый при кашле. Для правильного получения мокроты, как биологического материала для исследования на Streptococcus pneumoniae, следует соблюдать ряд рекомендаций:
- собирать мокроту лучше всего после пробуждения;
- за 12 часов необходимо исключить употребление пищи и любых напитков, кроме обычной воды;
- за 2 часа до сбора биоматериала не курить;
- в день проведения процедуры не допустимо чистить зубы, использовать средства для освежения дыхания;
- перед получением мокроты ротовую полость нужно основательно несколько раз прополоскать водой;
- собирать необходимо только мокроту, отделяемую в процессе глубокого кашля;
- легочный секрет сплевывают в контейнер, после чего емкость плотно закрывают крышкой;
- в процессе сбора требуется исключить попадание в емкость слюны или носоглоточной жидкости;
- объем собранной мокроты должен быть как минимум 3 мл для взрослых и порядка 1 мл для детей;
- биоматериал следует доставить в лаборатории в самые сжатые сроки (максимально допустимое время – 4 часа). При необходимости, его хранение возможно при плюсовой температуре от 2 до 8 градусов.
Сбор мокроты не рекомендуется выполнять при проведении противовирусной или антибактериальной терапии. Исследование целесообразно выполнять по прошествии двух недель с даты последнего приема антибактериальных или противовирусных лекарственных средств.
Методика проведения анализа
Для выполнения анализа используют методику полимеразной цепной реакции в режиме реального времени. Основные ее преимущества – это отсутствие ложно-позитивных результатов.
Особенности получения индуцированной мокроты
Индуцированную мокроту, в отличии от обычной мокроты, получают в стационарных условиях после проведения пациенту раздражающей ингаляции. Ее сбор показан в следующих случаях:
- при наличии симптомов заболеваний бронхов и легких при отсутствии мокроты;
- при наличии подтвержденных рентгенологическим путем изменениях в легких, сопровождающихся сухим кашлем и скудным выделением мокроты.
Раздражающие ингаляции проводятся при использовании небулайзера, компрессорного или ультразвукового. Ингалируемой смесью выступает пятипроцентный раствор NaCl. Далее, с целью стимуляции процесса отхождения мокроты, специалист проводит постукивания по грудной клетке пациента. После чего пациент откашливает мокроту (в количестве 3 мл для взрослых и 1 мл для детей) в специальный стерильный контейнер.
Особенности получения трахеального аспирата
Трахеальный аспират, как биологический материал, в котором могут быть обнаружены Streptococcus pneumoniae, получают через эндотрахеальную трубку в условиях медицинского учреждения.
Перед манипуляцией пациент, по указанию врача, делает 2-3 глубоких вдоха, после чего на несколько секунд задерживает дыхание и с силой выдыхает. Это вызывает продуктивный кашель. В ротовую полость вводится катетер вакуум-аспиратора, предназначенный для забора трахеального аспирата, который предварительно подсоединяют к эндотрахеальной трубке. Провоцируется кашлевой рефлекс и с помощью отсоса проводится получение трахеального содержимого через введенный катетер. Биологический материал в количестве не менее 3 мл помещается в стерильный контейнер.
Расшифровка анализа
Показатель нормы: «фрагменты ДНК, специфичные для Streptococcus pneumoniae не обнаружены». Этот результат анализа отрицательный и свидетельствует об отсутствии у пациента пневмококковой инфекции.
Положительный результат анализа подтверждает инфицирование пневмококком.
Поскольку большое количество пациентов являются бессимптомными носителями Streptococcus pneumoniae, результат молекулярно-биологического исследования может расшифровываться исключительно врачом. При этом при постановке диагноза учитываются лабораторные и клинические признаки патологий, анамнез пациента, а также предъявляемые им жалобы.
Профилактика заболеваний, вызываемых Streptococcus pneumoniae
Единственным эффективным способом профилактики пневмококка является вакцинация. С 2013 года вакцина от пневмококковой инфекции включена в Национальный календарь профилактических прививок. Популярными вакцинами против пневмококка являются «Превенар 13» и «Пневмовакс 23».