Подсчет количества тромбоцитов под микроскопом

Кучеренко Лариса Николаевна
Кучеренко Лариса Николаевна Заведующая общеклинического отдела КДЛ,

Подсчет количества тромбоцитов под микроскопом


Подсчет общего числа тромбоцитов крови проводится путем микроскопического исследования, которое позволяет обнаружить нарушение реологических свойств крови в виде тромбоцитопении (снижение уровня тромбоцитов) или тромбоцитоза (повышение уровня тромбоцитов).


Подсчет количества тромбоцитовПравила подготовки пациента:
  1. Накануне анализа исключить физические нагрузки и моральное напряжение.
  2. Запрещено употребление спиртных напитков и наркотических средств, следует ограничить курение.
  3. Ужинать до 21.00, обязательно исключить острую, жареную и жирную пищу.
  4. Забор крови проводится утром натощак перед выполнением других медицинских процедур (УЗИ, рентген и физиотерапии).
  5. Перед анализом обязательно сообщить врачу о принимаемых лекарственных препаратах, так как они могут повлиять на результат исследования.
Биоматериал: Цельная кровь

Важно:
Специалисты рекомендуют проводить мониторинговое исследование крови в одной и той же лаборатории. В разных лечебных центрах используются различные методики, аналитические аппараты и тест-системы, именно поэтому результаты анализа могут интерпретироваться по-разному.

Разновидности методик подсчета общего числа тромбоцитов:
  • Методика подсчета по Фонио;
  • Определение количества при помощи камеры Горяева;
  • Автоматизированная техника подсчета (используя гематологический автоанализатор).


Показатель нормы: 180-320 тыс. тромбоцитов

Что такое тромбоциты, их строение и функция

Тромбоциты представляют собой мелкие клетки дисковидной формы, лишенные ядра – именно поэтому они получили название кровяных пластинок. Их объем варьирует от 5 до 10 мкм³, диаметр – от 2 до 5 мкм. Благодаря своей способности к адгезии и агрегации (скупчиванию и склеиванию друг с другом) они участвуют в процессах гемокоагуляции и фибринолиза – свертывания крови и растворения тромбов. Их мембрана используется в качестве транспортера циркулирующих иммунных комплексов (образовавшихся в результате взаимодействия чужеродного антигена и специфических антител), энзимов, антикоагулянтов, фибриногена и биологически активных веществ. Гранулы кровяных пластинок содержат один из основных нейро-медиаторов – серотонин, факторы свертывающей системы, ионы кальция, аденозиндифосфат.

Структура тромбоцита состоит из трех зон:

  1. ТромбоцитыПериферической, наружная поверхность которой покрыта рецепторами, ферментами, гликопротеинами и плазматическими факторами, необходимыми для активации клеток – мембранным фосфолипидным фактором III, фосфолипазой, арахидоновой кислотой и пр. Их недостаток вызывает чрезмерную кровоточивость.
  2. Золя-геля, прилегающей к нижней части периферической зоны – вдоль нее расположен сократительный аппарат клетки, который представляет собой кольцо микротрубочек.
  3. Внутриклеточных органелл – плотных гранул, содержащих кальций, норадреналин, серотонин, аденозинтрифосфат, адреналин и аденозиндифосфат, которые обеспечивают регуляцию сокращения тромбоцитов, их склеивания, секреции и активации вазоконстрикторов (веществ, вызывающих сужение сосуда и уменьшающих кровоток) и тромбоцитарного ростового фактора (полипептида, стимулирующего восстановление стенки сосуда).

Благодаря своим свойствам тромбоциты поддерживают целостность стенки сосуда – при его повреждении они мгновенно закупоривают проблемное место временной гемостатической пробкой, а затем принимают участие в формировании постоянного тромба, предотвращающего избыточную кровопотерю. При тромбоцитопении снижается устойчивость капиллярной стенки – легкие травмы или изменения кровяного давления провоцируют появление на кожных покровах точечных кровоизлияний (петехий), вызванных слущиванием эндотелиального слоя сосудов. В организме здорового человека за устранение этого дефекта несет ответственность реакция освобождения гранул – активация тромбоцитами содержащихся в них биологически активных веществ.

Тромбоциты обладают анти-паразитарной активностью – при проникновении в человеческий организм трематод (сосальщиков – паразитических плоских червей, поражающих внутренние органы) кровяные пластинки способны поражать гельминтов, оказывая на них цитотоксический эффект.

Метод подсчета тромбоцитов по Фонио

Кровяные пластины хорошо окрашиваются специальными реагентами, в зависимости от степени зрелости их оттенок имеет различную интенсивность – это используется для дифференцировки морфологической структуры клеток. Наиболее распространенным способом их подсчета является метод Фонио. Его суть заключается в микроскопическом исследовании мазков крови, окрашенных недорогими реагентами (раствором эозин-метиленового синего или эозиновыйм красителем Гимзы). В полях зрения сетки микроскопа параллельно подсчитывают количество эритроцитов и тромбоцитов. Этот метод приобрел популярность не только из-за низкой себестоимости и простоты выполнения – его можно осуществить даже спустя несколько часов, а то и дней после отбора образца биологического материала, что имеет важное значение для уточнения и сравнения полученных показателей. 

Что означают результаты?

Тромбоцитоз (увеличение численности кровяных пластинок) может иметь первичный характер (результат эритремии, эссенциальной тромбоцитемии, миело-лейкоза) и вторичный – возникать на фоне массивной кровопотери, гемолиза, спленэктомии (удаления селезенки), чрезмерного физического напряжения или какой-либо патологии:

  • туберкулеза;
  • системного воспалительного процесса;
  • Лабораторный анализ кровиостеомиелита;
  • лимфогранулематоза;
  • гипернефромы (злокачественного поражения почки);
  • опухолевидных образований желудка;
  • полицитемии;
  • цирроза печени;
  • железодефицитной анемии;
  • системной красной волчанки;
  • мегакарицитарного лейкоза;
  • ревматоидного артрита;
  • сепсиса.

Значительный тромбоцитоз (когда количество клеток доходит до 800 тыс.) способствует более активной адгезии пластинок и повышенному тромбо-образованию.

Тромбоцитопения (снижение количества клеток) является неблагоприятным прогностическим признаком, свидетельствующим о повышенном риске кровоточивости и увеличении длительности кровотечения. Это явление может быть обусловлено повышенным использованием клеток и высокой скоростью их разрушения, что ассоциировано с врожденными аномалиями (синдромами Фанкони, Вискотта-Олдрича, Бернара-Сулье, Чедиака-Хигаси, Мея-Хегглина), медикаментозным поражением костного мозга (длительным применением сульфаниламидных, нестероидных противовоспалительных и цитотоксических препаратов), интенсивными гемотрансфузиями, искусственной перфузией и приобретенными патологиями:

  • аутоиммунной тромбоцитопенической пурпурой;
  • соединительнотканными заболеваниями (дерматомиозитом, склеродермией, системной красной волчанкой);
  • бактериальными и вирусными инфекциями (гриппом, токсоплазмозом, корью, малярией, краснухой, риккетсиозом, ветряной оспой);
  • Метод подсчета тромбоцитов по Фониовирусными гепатитами;
  • циррозом печени;
  • апластической, мегалобластной либо миелофтизной анемией;
  • гипотиреозом;
  • тиреотоксикозом;
  • ДВС-синдромом;
  • болезнью Маркиафавы-Микели;
  • тромбозом печеночных вен;
  • застойной сердечной недостаточностью.

Уменьшение числа тромбоцитов до 20 тыс. приводит к возникновению спонтанных кровотечений и жизне-угрожающих состояний, до 5 тыс. – к смерти пациента.