Анализ крови на гепатит Д anti-НDV IgG, ИФА

Серологический анализ крови на anti-НDV IgG методом ИФА – это исследование крови, которое проводится с целью диагностики вируса гепатита D. Вирус гепатита D является одноцепочечным РНК-вирусом размером около 35 нм, который принадлежит к типу Deltaviridae. Внешняя оболочка представляет собой поверхностный антиген HВV (НВsАg). Только благодаря ему возможна репликация РНК HDV. Таким образом, вирусная инфекция гепатита D всегда является сопутствующей гепатиту В. В настоящее время обнаружены три генотипа HDV, из которых наиболее распространенными являются 1а и 1б.

Обнаружение вируса гепатита D осуществляется посредством выявления специфических иммуноглобулинов класса IgM и IgG, которые подтверждают инфицирование или возможное перенесение болезни ранее. Антитела IgG появляются примерно через три месяца после проникновения вируса в организм. В процессе излечения их концентрация постепенно снижается до исчезновения. При хроническом течении болезни титры сохраняются.

Подготовка к исследованию:

Исследование проводится утром, натощак.
С последнего приема пищи должно пройти не менее 8 часов.
Исключить прием алкоголя не менее чем за 24 часа до взятия биоматериала.
Не рекомендуется сдавать кровь на серологию после флюорографии, рентгена, физиотерапевтических процедур.

Характеристики исследования:

Тип биоматериала: венозная кровь
Синонимы (rus): Серологическое исследование на гепатит D
Методы исследования: иммуноферментный анализ
Сроки выполнения: 4-6 дней

Способы передачи и симптоматика гепатита D

Источником заражения является человек-носитель инфекции или лицо с острым или хроническим течением болезни. Основной способ передачи – парентеральный. Наибольшее распространение инфекция получила в среде наркоманов. В группу риска также входят пациенты стоматологических кабинетов, гемодиализных отделений, перенесшие пересадку или биопсию органов, а также сотрудники хирургических отделений и лабораторий. Реже инфицирование происходит половым путем или вертикально от больной матери ребенку.

Различают ко- и суперинфекцию гепатита D. В первом случае заражение осуществляется одновременно с гепатитом В. Для коинфекции характерен короткий инкубационный период (до 7 недель). Болезнь сопровождается жаром, потерей аппетита, тошнотой и появлением желтушности. Протекает циклически, что объясняется переменным обострением гепатита В и D. Выздоравливают приблизительно 90% больных, у остальных заболевание приобретает хронический характер и в большинстве случаев приводит к циррозу печени.

Суперинфекция, которая возникает при добавлении HDV к развитому гепатиту В, протекает волнообразно. В 70 – 90 % случаев она перетекает в хроническое заболевание, в результате которого, как правило, развивается цирроз. Полное выздоровление зарегистрировано лишь у 5 – 10 % пациентов.

Особенности определения IgG

Как только патогенный микроорганизм проникает в системный кровоток, мгновенно начинается реакция иммунной системы. Она активирует лейкоциты, отправляющиеся в очаг поражения.

Защитные клетки продуцируют белковые антитела двух видов:

IgM – формируются при наличии острого воспалительного процесса, обнаруживаются через 1 неделю после заражения;
IgG – появляются на 2-3 неделю после первичного заражения, сохраняются на всем протяжении хронической формы и после выздоровления.

Иммуноглобулин G более стойкий, активно борется с патогенным микроорганизмом, защищая человека даже в тот момент, когда он уже выздоровел. Это предупреждает риск рецидивной формы. Если врач подозревает недавнее заражение, назначает анализ на определение IgM. В ином случае потребуется выявить именно IgG.

Потребность в исследовании

Воспалительное повреждение печени вирусной природы – это опасная патология. Если своевременно не выявить проявляющиеся симптомы, впоследствии она будет становиться тяжелее, вызывая ряд осложнений:

дисфункция печени – орган требуется для метаболизма некоторых веществ, выведения токсинов, при воспалении эти функции подавляются;
фиброз – замещение нормальной паренхимы печени соединительнотканными волокнами, еще больше усугубляющими функцию органа;
желтуха, вызванная гипербилирубинемей вследствие нарушения продукции трансаминаз;
цирроз – злокачественное перерождение, из-за которого орган полностью утрачивает функцию, поэтому пациенту требуется экстренная пересадка.

Своевременная диагностика – это основа правильного лечения. Даже при выявленных симптомах повреждения печени невозможно с точностью определить, какая причина вызвала болезнь. Поэтому важно сразу пройти лабораторное тестирование для выявления специфических иммуноглобулинов, направленных против вируса гепатита D.

Показания к сдаче анализа

Серологическое исследование крови на наличие anti-НDV класса IgG проводится в случаях:

хронического гепатита В, цирроза печени;
прогрессирующего поражения печени;
волнообразного течения вирусного гепатита В;
обследования лиц, имевших контакт с инфицированными вирусом.

Методика исследования

Для выявления антител anti-НDV класса IgG применяется современный метод иммуноферментного анализа. Механизм данного исследования предполагает нахождение специальной тестовой системой, основанной на пептидных комплексах, соединений антиген-антитело, характерных для конкретных заболеваний.

Ход исследования

Для обнаружения IgG против вирусного гепатита D требуется провести иммуноферментный анализ. Это специфический тест, выявляющий именно этот вид защитных белков благодаря реакции «антиген-антитело». Чтобы пройти обследование, первоначально требуется прийти в кабинет медицинской сестры, которая выполнит забор венозной крови. Ее помещают в пробирку с антикоагулянтом, чтобы препятствовать формированию кровяного сгустка.

Как только образец биологического материала получен, его доставляют в лабораторию, где анализ проходят по этапам:

расположение пробирки в прибор для центрифугирования, который прокручивает ее на высоких оборотах, чтобы разделить жидкую часть плазму и форменные элементы;
отбирают только плазму, перемещая ее в лунки, расположенные внутри лабораторного планшета;
добавляют специальный конъюгат, вызывающий реакцию «антиген-антитело»;
проводят инкубацию образца, чтобы реакция произошла намного быстрее;
после инкубации лунки располагают в фотокалориметре, который подсчитывает титр антител IgG, выдавая результат в печатном виде.

Самостоятельно врач выполняет минимальные действия. Подсчет производит аппарат, что исключает риск появления врачебной ошибки на этом этапе. Данные получаются точными, достоверными и информативными.

Интерпретация результатов анализа

Положительный результат проводимого ИФА может свидетельствовать об остром или хроническом течении гепатита D, а также о ранее перенесенном заболевании. Отрицательный результат возможен в случае отсутствия вируса в организме, в инкубационный период, а также при полном выздоровлении. При положительном результате врач, как правило, назначает дополнительные анализы для уточнения диагноза.

Достоверность данных

При выполнении теста невозможно получить ложные данные из-за идентификации неверных антител. Реакция специфична, обнаруживает только anti-HDV IgG. То есть врач может выявить наличие гепатита D, не спутав его с другими воспалительными патологиями печени. Реакция основана на взаимосвязи антигена и антитела определенных видов. Лаборант добавляет в лунки специфичный конъюгат, который связывается только с иммуноглобулинами, направленными против гепатита D. Риск получения ложных сведений есть, но он не связан с выявлением посторонних антител против иных заболеваний.

Ложные результаты исследования

Всегда присутствует риск получения недостоверных сведений. Они могут проявляться как в положительной, так и в отрицательной форме.

Ложноположительный тест проявляется в следующих случаях:

ошибки на этапе забора биологического материала или выполнения исследования в лаборатории;
неправильная подготовка к тесту, например, сильный стресс накануне, большой объем выпитых алкогольных напитков, проведение инструментальных анализов;
перепутанные данные от разных пациентов.

Для исключения риска получения ложноположительных сведений требуется правильно подготовиться, пройти анализ по всем предписанным этапам.

Также могут возникнуть ложноотрицательные данные, выявленные по следующим причинам:

недостаточная функция иммунитета или иммунодефицит, вызывающий отсутствие выделения лейкоцитов и специфических антител в ответ на проникновение патогенных микроорганизмов, в том числе гепатита D;
наличие острой фазы, когда IgM уже выработались, а IgG еще не успели сформироваться.

Для предупреждения ложноотрицательного ответа по второй причине рекомендуется проводить анализ, определяющий сразу иммуноглобулины M и G. Врач сможет сказать, развивается ли патология в острой или хронической стадии.

Дополнительные анализы

При подозрении развития гепатита D в первую очередь определяют IgG. Если дважды пришли положительные тесты, проводят и другие анализы, которые выявляют не только наличие болезни, но и состояние печеночных тканей, всего организма в целом.

ПЦР. Это методика, которая выявляет любое количество антигена патогенного микроорганизма. В данном случае выявляют РНК гепатита D. Исследование проводят на полуавтоматическом анализаторе.
Определение печеночных ферментов. Выявляют количество билирубина, превышение уровня которого свидетельствует о тяжелом повреждении печени, вызывающем желтуху.
ИФА на IgM. Вещество определяет только острую стадию гепатита D. Если он перешел в хроническую форму или пациент выздоровел, результаты будут отрицательными.

Анализы проводят при первичном обследовании, в процессе лечения и после его завершения для отслеживания состояния пациента в динамике. Гепатит D – патология, требующая быстрого лечения. Поэтому важно своевременно проводить диагностику. Рекомендуется определять anti-HDV IgG, чтобы устанавливать точный диагноз.