Определение чувствительности к расширенному спектру антибиотиков

Методика бактериологического посева отличается высокой точностью - она дает возможность выделять бактерии, представляющие микрофлору образца, и определять их чувствительность к антибиотикам расширенного спектра.

Характеристики исследования:

Подготовка к исследованию: специальной подготовки не требуется
Тип биоматериала: моча, кровь, мокрота, каловые массы, секрет предстательной железы,
материнское молоко, спинномозговая жидкость, желчь, отделяемое уретро-генитальных органов, носовых ходов, раневой поверхности, ротоглотки
Синонимы (rus): Бактериологический анализ с определением чувствительности к расширенному спектру антибиотиков при специфических посевах
Синонимы (eng): Bacteriological analysis with definition of sensitivity to extended spectrum antibiotics for specific crops
Методы исследования: микробиологическое исследование

Важность анализа

Инфекционно-воспалительные процессы в организме человека появляются при заражении бактериями. Они бывают грамположительными и грамотрицательными, делятся на разнообразные виды. Поэтому лечение может сильно отличаться. Одни микроорганизмы могут быть чувствительны к назначаемому препарату, а другие резистентны. Для предотвращения риска отсутствия чувствительности к лекарственному средству рекомендуется перед назначением терапии назначать определение чувствительности микроорганизмов к антимикробным химиотерапевтическим препаратам диско-диффузным методом. Врачи советуют использовать расширенный спектр.

При назначении исследования появляются следующие преимущества:

определение расширенного спектра препаратов, к которым у выявленного патогенного микроорганизма имеется высокая чувствительность;
выявление препаратов, к которым у бактерии развивается резистентность, поэтому их назначение недопустимо;
получение максимально точного результата, которого невозможно добиться другими анализами.

Назначение на анализ получают от различных врачей, в зависимости от очага поражения. Например, при кожных поражениях от дерматолога, при бактериальной пневмонии от пульмонолога. После сбора биоматериала результат может прийти в течение 3-5 дней. За это время не рекомендуется принимать иные антибиотики, пока врач не выпишет их.

Когда назначают бактериологический анализ?

Методику специфического посева используют опытные специалисты - инфекционисты, гинекологи, педиатры, хирурги, гастроэнтерологи, урологи, терапевты, окулисты, ЛОР-врачи, онкологи.

Определение чувствительности к расширенному спектру антибиотикам при специфических посевах пациентам показано при:

воспалительных процессах в органах и системах;
подозрении на системную инфекционно-воспалительную реакцию - сепсис.

Сбор, хранение, транспортировка материала

При проведении бактериологического посева проводят забор разных биологических материалов, в зависимости от очага поражения. Для каждого из них методика сбора отличается. Общими остаются правила антисептики, благодаря которым высевают именно бактерии, вызывающие инфекцию:

для изъятия материала применяют только стерильные инструменты, чтобы не занести инфекцию на поверхность ткани, а также не переместить ее в образец;
изъятый образец перемещают в одноразовую посуду, это могут быть чашки, контейнеры, пробирки, которые после применения выбрасывают;
в некоторых случаях допустимо применять многоразовую посуду, но это должны быть предметы самой лаборатории, которые она автоклавирует после каждого применения;
готовый контейнер с биоматериалом закрывают крышкой, плотно закручивают, чтобы внутрь не просачивались микроорганизмы и посторонние вещества.

Как только сбор завершен, наступает этап хранения. Максимальный период длится 1-2 часа, затем образец будет испорчен вследствие активного размножения бактерий и распада биологических веществ. Поэтому его быстро доставляют в лабораторию, сразу же приступая к анализу.

Бактериологический анализ

При бактериологическом анализе исследуемый образец помещают на культуральные среды в специальные условия (термостат с заданной температурой, влажностью и временем). По истечении определенного периода проводят изучение пробы - осмотр выросших колоний бацилл, оценивание плотности культур, их формы и цвета, подсчет титра возбудителей инфекции.

Определение чувствительности к антибиотикам проводят с использованием диско-диффузионного метода - с помощью стандартизованных питательных сред и дисков с антибактериальными препаратами. Для выполнения анализа необходим один набор для грам-позитивных микроорганизмов, другой - для грам-негативных.

Ход исследования

В лаборатории сразу приступают к посеву биологического материала на питательные среды диско-диффузным методом. Для этого лаборанты пользуются поэтапной инструкцией.

Размещение инвентаря. Подготавливают чашку Петри, в которую размещают питательную среду на основе агара. В ней содержится оптимальное количество веществ, требующихся для быстрого размножения бактерий. Так как при этом анализе определяют чувствительность к расширенному спектру антибиотиков, может потребоваться несколько чашек Петри с питательной средой. Настраивают оборудование, которое поддерживает оптимальную влажность, освещенность и температурный режим. Это сокращает период роста колонии микроорганизмов, первые результаты можно получить уже спустя 2-3 дня.
Посев. Стерильным инструментом перемещают образец материала на поверхность питательной среды. Его размещают по всей области, чтобы рост определялся равномерно.
Ожидание роста колоний бактерий. Минимально он составляет 2 дня. Если к этому времени не произошло прорастания бактерий, на этом тест прекращают. Если же он наблюдается, ожидают еще 1-2 дня, прежде чем приступить к определению чувствительности к расширенному спектру антибиотиков. К этому этапу можно приступать, когда бактерии вызрели, распространившись по всей поверхности газоном.
Определение чувствительности к антибиотикам. Для этого используют диски небольших размеров, которые пропитывают в антибиотиках с разными действующими веществами и лекарственными группами. Их аккуратно размещают по разным областям чашки Петри, учитывая, что между ними должно располагаться небольшое расстояние. Отслеживают, насколько данный антибиотик уничтожает бактерии. Если чувствительность имеется, вокруг диска появляется круг, свидетельствующий о гибели микроорганизмов. Если чувствительность отсутствует, этот круг не появится, бактерии сохранятся в прежнем виде.

Каждый результат заносят в бланк исследования. Его распечатают в виде таблицы, в которой указаны найденные микроорганизмы и их чувствительность к разным группам антибиотиков. Результаты может забрать пациент или лечащий врач, интерпретацией должен заниматься только специалист.

Расшифровка анализа

При бактериологическом анализе выделяют несколько степеней обсемененности, необходимых для определения стадии заболевания и мониторинга проводимого лечения:

Рост колоний отсутствует.
До 10 колоний (105 КОЕ/мл).
Больше 15 колоний (106 КОЕ/мл).
Свыше 100 колоний.

Результаты антибиотикограммы выдают в единицах наименьшей подавляющей (угнетающей рост бактерий) концентрации лекарственного средства. Буква «S» означает восприимчивость микроорганизма (лекарство подавляет размножение бациллы), «R» - устойчивость микроба к антибиотику (препарат на нем не отражается).

Результаты специфического посева предоставляют лечащему врачу информацию, которая необходима для проведения эффективной терапии конкретного инфекционного процесса. Применение препаратов широкого спектра действия без бактериологического исследования практически уходит из медицинской практики - по причине распространения высокоустойчивых разновидностей бактерий они все чаще малоэффективны. К тому же неспецифическое лечение приводит к нарушению нормальной микрофлоры организма, адаптации и приобретении устойчивости к противомикробным препаратам патогенной флоры, что усложняет проведение лечения.

Чувствительность к антибиотикам при специфических посевах

Кошурин Дмитрий Валерьевич