Определение наличия амилоида

Гистологический анализ определения наличия амилоида - это метод исследования пораженной ткани органов или спинного мозга, который проводится для уточнения характера заболевания.

Характеристики исследования:

Тип биоматериала: ткани и кусочки органов человека
Синонимы (rus): Микроскопическое исследование материала с определением наличия амилоида
Синонимы (eng): Microscopic examination of the material to determine the presence of amyloid
Метод исследования: гистологический анализ

Что такое амилоид?

Амилоид - это белковое вещество, которое развивается в различных органах и ведет к их патологическому изменению, так называемый процесс «перерождения». Постепенно нормальная ткань органа превращается в однородную, перерождение органов наступает в результате текущего в организме болезнетворного процесса. Основным компонентом амилоида являются фебрильные белки АА (белки острой фазы воспаления) и AL (аномальные цепи иммуноглобулинов).

Бета-амилоид - это вещество, которое находится в спинномозговой жидкости человека. Снижение концентрации которого, ведет к развитию деменции и болезни Альцгеймера.

Амилоидозы или амилоидные заболевания возникают в результате появлений аномалий в формировании пространственной структуре белков, что приводит к образованию агрегатов фибриллярной структуры – амилоидов.

В каких случаях определяется амилоид?

Определение наличия амилоида специалисты назначают при заболеваниях:

почечной недостаточности;
ревматоидного артрита;
остеомиелита;
туберкулеза;
сифилиса;
лимфогранулематоза;
опухолевых образований различной этиологии;
бактериального эндокардита.

Исследование показали, что амилоидоз носит наследственный характер, поэтому анализ на гистологию и определение амилоида необходимо сдать тем людям, среди родственников которых есть больные с этой патологией.

Анализ амилоида

Первоначально производится забор ткани при помощи пункции, затем по правилам проведения биопсии материал подготавливается к исследованию на протяжении некоторого времени. После обезжиривания ткани специалист делает на ней разрезы специальным, тоником ножом.

Амилоид является фибриллярным белком он хорошо окрашивается при помощи йодного красителя. Также при проведении анализа может быть использован конго красный. После окрашивания материала раствором йода, используют серную кислоту. Амилоид меняет свой цвет и становиться грязно-зеленым или сине-фиолетовым.

Важность исследования

сердечная недостаточность Амилоидоз является тяжелым заболеванием, трудно поддающимся терапии. В отношении данной патологии не разработано специфических методов терапии, которые могли бы полностью устранить ее. Но если накопление белкового вещества выявлено на ранних этапах развития, можно замедлить перерождение клеток и тканей, что позволит улучшить и продлить качество жизни. Для этого необходимо провести своевременную диагностику при помощи микроскопического исследования биоматериала с определением наличия амилоида. Тогда врач назначит лечение, снижающее темп развития следующих осложнений:

увеличение нагрузки на сердце, что может привести к сердечной недостаточности или инфаркту миокарда;
нарушение кровообращения в тканях головного мозга, что приводит к инсульту с последующим отмиранием некоторых участков нервных волокон;
тромбоз, который образуется вследствие прилипания белка к эндотелию вен, что впоследствии вызывает нарушение кровотока и риск поражения тканей, органов (чаще всего такое отклонение образуется в венах почек);
частые инфекционно-воспалительные процессы вследствие резкого снижения функции иммунитета (например, у пациентов периодически появляется пиелонефрит, бронхит, пневмония, гломерулонефрит).

В ходе проведения теста результаты получают с высокой степенью точности, так как врач-цитолог отслеживает структуру всех клеток визуально. Это позволяет подтвердить диагноз на ранних этапах развития, даже если клиническая симптоматика еще не проявляется. Например, белок определяют в случае, если у пациента присутствует негативная наследственность с развитием амилоидоза среди близких родственников. Тогда можно полноценно следить за состоянием его здоровья и назначать своевременные методы терапии.

Для чего необходим анализ

Микроскопическое исследование биоматериала с определением амилоида проводится для получения ряда важной информации:

подтверждение или опровержение информации по возможному содержанию белка амилоида в структуре тканей;
степень распространения белка по ткани, что указывает на тяжесть патологического процесса;
составление прогноза, врач сможет значительно продлить период жизни пациента в случае подтверждения диагноза на ранних этапах развития (если амилоид выявлен уже на поздних стадиях, это всегда свидетельствует о высоком риске наступления летального исхода в ближайшие годы);
составление правильного плана лечения с назначением оптимальных лекарственных средств, которые замедлят отложение белка в структуре тканей;
оценка результата терапии в ходе ее применения или после завершения всех тактик, чтобы определить наступление временной ремиссии или дальнейшее прогрессирование патологического процесса.

Амилоидоз относится к хроническим патологиям, поэтому он будет со временем только прогрессировать. Вследствие этого потребуется периодически повторять микроскопическое исследование биоматериала, чтобы отслеживать болезнь в динамике и выявлять эффективность терапии.

Особенности анализа

Для микроскопического исследования биоматериала с определением амилоида выделяют ряд особенностей:

в качестве основного биоматериала является небольшой кусочек ткани из предполагаемого очага поражения (можно извлекать не только ткань, но также проводить аспирацию жидкости);
в первоначальной форме биоматериал исследовать невозможно, сначала его клетки фиксируют и окрашивают для изготовления микропрепаратов, только затем переносят в кабинет цитолога для микроскопии;
из образца создают не менее 3 препаратов, так как отложения белка амилоида могут содержаться в небольшом участке ткани на ранних этапах развития, поэтому требуется отследить большое количество клеточных структур;
сбор образцов проводят из разных зон предполагаемого патологического процесса, чтобы не упустить содержание амилоида в каком-либо из них;
в процессе оценки амилоида под микроскопом можно выявить и другие патологические структуры, например, патогенные микроорганизмы, злокачественные клетки, фиброз;
при выявлении патологического процесса стекла сохраняют на период лечения, а также ремиссию, чтобы при потребности проведения повторного теста врач мог сравнить результаты разных анализов.

Диагностика сложная, многоступенчатая, ее может выполнять только квалифицированный врач-лаборант и цитолог. Метод доступен в клинике, где его выполняют строго по этапам, чтобы всегда получать достоверные данные.

Подготовка пациента

Перед сбором биоматериала пациенту необходимо пройти небольшую подготовку:

сбор образца тканей только на голодный желудок, последний период употребления пищи за 8 часов, а жидкости за 3 часа;
исключение употребления лекарственных препаратов, которые могут повлиять на баланс белка, если диагноз устанавливается впервые;
исключение употребления алкогольных напитков за 1-2 дня;
запрет курения непосредственно перед сбором образцов тканей.

Важно помнить, что ткани собирают посредством инвазивной процедуры, поэтому предварительно осуществляют местную или общую анестезию.

Создание микропрепаратов

Как только врач выполняет надрез или аспирацию биоматериала, его сразу же размещают в стерильный контейнер, в котором транспортируют в лабораторию для создания микропрепаратов:

первоначальная обработка образцов спиртом, чтобы сохранить клетки в первоначальном виде, предотвратить явление некроза, из-за которого можно получить ложные сведения;
расположение стекол с нанесенным биоматериалом на поверхность рельсов с содержанием емкости снизу (в нее будет сливаться лишняя жидкость);
поочередное нанесение разных красителей (йод, конго красный, серная кислота), чтобы добиться тщательного окрашивания каждой клетки и иных компонентов в образце;
смывание каждого примененного красителя дистиллированной водой;
сушка в естественных условиях, при комнатной температуре, но при отсутствии распространения прямых солнечных лучей.

Каждый созданный микропрепарат подписывают данными пациента, располагают в конверте. Затем отправляют к цитологу.

Микроскопия

Микроскопия Конверты с микропрепаратами перемещают в кабинет цитолога. Он просматривает каждый из них под микроскопом с соблюдением следующих правил:

микропрепарат не просто устанавливают на предметном столике микроскопа, но также закрепляют фиксатором для исключения случайных сдвигов;
просмотр через окуляр с минимальным приближением – изучение общего расположения клеток в ткани, оценка возможности содержания патологических очагов с включением разного количества белковых структур;
просмотр через окуляр с максимальным приближением, а затем через иммерсионный объектив – тщательное изучение полноценной структуры клеток, а также включений белка.

В процессе изучения ткани под микроскопом указывают все выявленные данные. А точнее особенности клеточного состава, наличие или отсутствие отложений белка и другие возможные патологические процессы. Их соотносят с историей болезни, симптомами, затем уточняют диагноз и назначают терапию.

Интерпретация результатов анализа

Постановка диагноза основывается на оценке совокупности симптомов и результатов анализов. При проведении забора биоматериала из костного мозга оценивается наличие плазматических клеток и наличие амилоида. Подсчет плазматических клеток под микроскопом после проведения окрашивания и наличие в них структур амилоида поможет специалисту поставить пациенту заключительный диагноз.

При проведении гистологического исследования важно отличить два вида амилоидов друг от друга АА амилоид и AL.

Недостаточное количество материала, взятое на исследование может привести к ложноотрицательному результату исследования.
Ложноположительный результат пациент может получить при отсутствии необходимого лабораторного оборудования или сведений о состоянии больного.
Ориентировочный ответ - не является точным диагнозом, но такое заключение поможет врачу определить круг патологических заболеваний, которые помогут дифференцировать патологию, поставить верный диагноз и назначать пациенту лечение.

Гистология: Амилоид

Потапова Оксана Валентиновна