Гистология: биопсия 1 категории сложности

Гистологическое исследование биопсии 1 категории сложности

Гистологическое исследование биопсии, полученного из очага патологического процесса, проводится для определения доброкачественных и злокачественных опухолей.

Характеристики исследования:

• Тип биоматериала: ткани и кусочки органов человека
• Синонимы (rus): Гистологический анализ биопсийного и операционного материала, Биопсия ткани органа 1 категории сложности
• Синонимы (eng): Histological analysis of biopsy and surgical specimens, Biopsy tissue on 1 category of complexity
• Методы исследования: микроскопия
• Сроки выполнения: 3-5 дней

Когда назначают биопсию 1 категории сложности?

Гистологическое исследование биопсии 1 категории сложности оценивает патоморфологическое состояние операционного материала:

• анальной трещины;
• грыжевого мешка при не ущемленной грыже;
• желчного пузыря при не деструктивных формах холецистита или травме;
• стенок раневого канала.

Опытные специалисты назначают анализ для уточнения или дифференцирования диагноза - при микроскопическом исследовании образцов патологических тканей, взятых при хирургическом вмешательстве можно выявить изменения в их клеточном строении. Особое значение гистологическое исследование имеет при диагностировании злокачественных новообразований.

Важность исследования

Если врач-патоморфолог в ходе извлечения кусочков ткани из патологического очага определяет первую категорию сложности, образец отправляют к цитологу для дальнейшего изготовления микропрепарата и проведения гистологического исследования. К первой сложности относят неспецифические воспалительные очаги острого или хронического типа без развития осложнений. Но даже если осложнения не развиваются, требуется своевременно изучить клеточный состав под микроскопом, чтобы достичь следующих результатов:

• оценка точного клеточного состава в изучаемых тканях, чтобы судить о расположении клеток в образце, их строении, соответствии степени зрелости (атипичные клетки не зрелые, а нормальные – имеют оформленное ядро, органеллы, мембрану);
• оценка стадии развития заболевания в зависимости от степени изменения клеточного состава, чем больше определяют очаги поражения, тем сильнее развивается патологический процесс;
• дифференциальная диагностика между воспалением, эрозией, язвой, воспалением, опухолью и другими изменениями, которые могут происходить на клеточном уровне;
• дифференциальная диагностика между злокачественной или доброкачественной опухолью, так как от степени развития клеток зависит подбираемая тактика лечения (при доброкачественном процессе выбирают выжидательную тактику или хирургическое вмешательство, при злокачественном – облучение и операцию);
• оценка эффективности проводимого лечения, если оно применяется продолжительно или уже было завершено, чтобы судить о правильности назначаемых методик лечащим врачом или возможных ошибках.

Ткани для исследования берут в процессе хирургического вмешательства. Диагностику назначает опытный врач, который хочет не только провести лечение при помощи операции, но также изучить очаг поражения на клеточном уровне. Так можно подтвердить диагноз, оценить эффективность или ошибки в лечении, выявить возможное выздоровление или ремиссию.

Гистологическое исследование можно назначать предварительно до операции или уже в процессе ее проведения, если патологический очаг был выявлен случайно. Часто именно с помощью гистологического исследования биопсии первой категории сложности можно установить дифференциальный диагноз, когда остальные лабораторно-инструментальные тесты не приносят никакой эффективности.

Подготовка

Для изъятия биоптата с целью дальнейшего проведения гистологического исследования необходимо предварительно провести хирургическое вмешательство. Вне зависимости от вида применяемой операции требуется тщательно подготовиться:

• предварительная консультация с лечащим врачом, хирургом, чтобы обсудить все виды употребляемых лекарственных средств, в особенности влияющих на состав клеток пораженной области и свертывающую систему крови;
• исключают любые препараты, которые могут повлиять на пациента, привести к осложнениям во время хирургического вмешательства, сбора тканей для биопсии, а также вызвать кровотечение или тромбоз;
• последний период употребления пищи – за 10 часов до хирургического вмешательства, но если оно проводится ближе к вечеру, период можно сократить до 5 часов при условии употребления легкой еды;
• запрет употребления тяжелой пищи за 1-2 дня до анализа, чтобы не привести к осложнениям для пищеварительного тракта;
• запрет употребления алкоголя за 1-2 дня, курения – за 1 час до проведения хирургического вмешательства;
• клизма для очищения кишечника непосредственно перед операцией.

Без предварительного плана подготовки допустимо проводить сбор тканей для гистологии только в случае, если операция проводится экстренно.

Особенности анализа

Гистологическое исследование биопсии первой категории сложности характеризуется следующими особенностями:

• биоптат для биопсии берут во время хирургического вмешательства, которое может проходить для лечения основного заболевания или непосредственно с целью получения кусочка ткани пораженной области (также очаг поражения может быть выявлен случайно);
• биоматериал перемещают в стерильный контейнер, затем сразу же отправляют в лабораторию, но в случае потребности продолжительного хранения требуется фиксация спиртом;
• ткани в лабораторном кабинете делят на тонкие слои, для этого используют специальные приборы на основе лазера;
• каждый слой размещают на предметном стекле, затем окрашивают, чтобы получился микропрепарат, подлежащий микроскопии;
• создают минимум 3-5 микропрепаратов, так как одного фрагмента ткани недостаточно, чтобы изучить клеточный состав всей пораженной области;
• в случае выявления заболевания препараты хранят продолжительно, на всем протяжении терапии, чтобы в случае проведения повторного анализа была возможность сравнить ткани, изучить развитие болезней в динамике, оценить назначаемые препараты или иные тактики лечения;
• в случае попадания обильного количества крови в участки исследуемой ткани дальнейший анализ недопустим, так как выявить клеточный состав будет невозможно;
• недопустимо исследовать омертвевшие ткани, так как в них клетки уже были подвергнуты некрозу, поэтому изучить болезнь, провести дифференциальную диагностику между различными видами патологии будет невозможно.

Врачам-хирургам рекомендуется всегда отправлять кусочек ткани на биопсию в случае, если выявлен патологический процесс, но не установлена степень его развития и точный диагноз.

Метод исследования

Изъятые кусочки ткани быстро отправляют в лабораторию в естественной форме. Их подвергают спиртованию только в случае отсутствия лаборатории непосредственно в учреждении. Как только ткани прибыли к врачу-лаборанту, он приступает к последовательному выполнению гистологического исследования биопсии первой категории сложности:

• послойное разрезание ткани на тончайшие фрагменты при помощи лазерного оборудования;
• фиксация клеток этиловым спиртом, чтобы остановить их развитие в первоначальной форме, не дать подвергнуться некрозу;
• размещение стекол с препаратами по рельсам над емкостью;
• нанесение гематоксилина, который необходим для окрашивания ядер, затем смывание дистиллированной водой;
• нанесение двух видов красок по очереди для окрашивания цитоплазмы – OG, EA;
• расположение покровочного стекла, которое защищает окрашенную зону от воздуха и солнца, что предотвращает их выцветание.

Готовые препараты рассматривают под микроскопом по следующим шагам:

• размещение микропрепарата под окуляром микроскопа,
• закрепление боковым держателем, чтобы стекло оставалось на месте, не двигалось при изучении;
• настройка окуляра на ближнее приближение, просмотр клеток;
• постепенное передвижение предметного столика в шахматном порядке, чтобы оценить клеточный состав тканей, выявить его изменения или посторонние включения.

В процессе просмотра стекол врач описывает морфологию нормальных клеток, выявляет обильное количество скопившихся лейкоцитов, определяет вид патогенной микрофлоры в случае ее наличия, изучает возможность потери дифференцировки клеток (это свидетельствует о развитии предракового состояния или непосредственно злокачественной формы). 

Методика проведения анализа

Взятие биоматериала производится во время оперативного вмешательства путем иссечения тканей на границе патологического очага с не измененным участком.

Кусочки некротической или геморрагической ткани на исследование не отбирают! Образец сразу доставляют в гистологический отдел лабораторного центра, если такой возможности нет - биоптат фиксируют в 70% этиловом спирте.

В лабораторных условиях образец ткани уплотняется (для предотвращения разложения) путем пропитывания расплавленным парафином или органическими смолами, нарезается тончайшими послойными пластинами специальными аппаратом (микротомом или ультрамикроскопом), окрашивается специальными красителями, которые используют для гематологических анализов (Романовского, Май-Грюнвальда) по методикам Папаниколау, Лейшману и изучается под микроскопом.

Интерпретация результата анализа

Цель гистологии - обнаружить патологические отклонения в клеточном строении тканей, выявить атипичные клетки, оценить степень распространения патологического процесса.

В заключение анализа квалифицированный специалист - патоморфолог описывает изменения исследуемого образца ткани и указывается предполагаемый диагноз, позволяющий определить ряд патологий для клинического разграничения заболеваний. Заключительный диагноз выставляется лечащим специалистом на основании зарегистрированных изменений и клинических данных.