Гистология: Рецепторы к эстрогенам и прогестерону

Иммуногистохимическое исследование рецепторной чувствительности к эстрогенам и прогестерону в эндометрии

Иммуногистохимическое исследование рецепторной чувствительности к эстрогенам и прогестерону в эндометрии проводится для выявления причин отсутствия фертильности, а также для оценки злокачественности процессов в тканях матки.

Характеристики исследования:

• Тип биоматериала: образцы ткани (биоптат) опухоли молочной железы, опухоли тела матки или полости матки.
• Синонимы (rus): ИГХ рецепторы к эстрогену и прогестерону.
• Метод исследования: гистологический метод
• Сроки выполнения: 7 дней

Рецепторы к эстрогенам и прогестерону

Рецепторы к эстрогенам (ER) и прогестерону (PR)- это чувствительные точки нейронов, которые реагируют на колебания некоторых гормонов, влияющих на рост опухолей и развитие гиперпластических процессов в эндометрии. Расположены они как в тканях эпителия матки, так и в клетках молочной железы. Их определение дает возможность оценить влияние гормональных факторов на прогрессию злокачественного роста, а кроме того выявить наличие других очагов активности, помимо маточного. Входят в программу обязательного скрининга у больных женщин с подозрением на инфильтративную активность рака.

Когда определяют активность рецепторов?

Список показаний для определения активности эстрогеновых и прогестероновых рецепторов ограничен, так как они имеют строгую специфичность.

Иммуногистохимическое исследование проводят при:

• бесплодии;
• опухоли эндометрия;
• дисфункции менструаций;
• гиперпластических процессов в эндометрии.

При бесплодии методика позволит выяснить, может ли плодное яйцо прикрепится к стенке матки. Для рака метод не является способом ранней диагностики. Оценка рецепторной активности позволяет выявить наличие метастазирования, и оценить эффективность лечения в полости матки. При нарушениях овуляции методика выясняет эффективность гормональной терапии. При изменениях в полости матки гиперпластического характера усиление активности рецепторов к эстрогенам и прогестерону свидетельствует о развитии низкодифференцированных опухолей, потенциально опасных для жизни женщины.

Иммуногистохимическое исследование

Материалом для иммуногистохимического исследования служит биоптат эндометрия матки. Он получается либо с помощью выскабливания, либо прямой биопсией ткани эндометрия. Последняя методика предпочтительнее, так как выше качество материала. Но она сложнее, так как требуется проведение гистероскопии.

Биоптат фиксируется в формалине и в 24-часовой срок доставляется в гистологическую лабораторию. После приготовления микропрепарата, проводится обработка специальным реактивом. Краситель окрашивает клетки, которые содержат рецепторы к эстрогенам и прогестерону. Врач-гистолог подсчитывает количество окрашенных клеток и сравнивает с нормой.

Важность исследования

Половые гормоны влияют не только на репродуктивную функцию, но и многие показатели организма. В данном исследовании вычисляют степень чувствительности рецепторов матки к воздействию эстрогена и прогестерона. От этих данных зависит менструальный цикл, способность к оплодотворению и особенности развития злокачественных опухолей в матке. Тест важно проводить не только при первичном подозрении каких-либо отклонений, но и в процессе терапии, чтобы следить за эффективностью лечения в динамике. Если диагностика и последующая терапия отсутствуют или методы лечения назначены без предварительного анализа, могут развиться следующие осложнения:

• бесплодие, которое в запущенных случаях устранить невозможно;
• активное прогрессирование злокачественной опухоли эндометрия матки, от которой впоследствии сформируются метастазы в других тканях и органах;
• нарушение менструального цикла;
• разрастание ткани эндометрия матки, что негативно сказывается на ее функции и способности внедрения оплодотворенной яйцеклетки.

На основании выявленных сведений оценивают степень влияния эстрогена и прогестерона на рецепторы. Причем биоматериалом служит биоптат, полученный из эндометрия матки. Это означает, что для проведения анализа требуется инвазивная методика с предварительным выполнением анестезии. Поэтому диагностику осуществляют строго по показаниям, для профилактики ее не используют. Предварительно пациентке требуется провести общее обследование, выявить очаги патологического процесса при помощи других лабораторно-инструментальных тестов, только потом брать биоптат для проведения иммуногистохимического исследования.

В некоторых случаях по выявленным сведениям можно провести дифференциальную диагностику. Например, если рецепторы недостаточно чувствительны к эстрогену и прогестерону, это свидетельствует о первопричине, приводящей к отсутствию возможности оплодотворения. На основании полученных данных врач сможет назначить оптимальные методы терапии, которые будут воздействовать на выявленное заболевание патогенетически. Поэтому такие методики окажутся более эффективными.

Для чего необходим анализ

Иммуногистохимическое исследование для определения рецепторной чувствительности к эстрогену и прогестерону проводится для получения следующих данных:

• степень тяжести злокачественного новообразования в эндометрии матки;
• показания для назначения химиотерапии в совокупности с хирургической методикой, направленной на лечение опухоли;
• эффективность в процессе применения методик, а также после их полного завершения, чтобы судить о потребности дальнейшей терапии или переходе в ремиссию;
• первопричина женского бесплодия, нарушения менструального цикла;
• потребность в назначении гормональной терапии для восстановления функциональности яичников, уменьшения прогрессии гиперплазии эндометрия матки.

Важно помнить, что по одним лишь сведениям от иммуногистохимического исследования затруднительно устанавливать диагноз. Для повышения его точности необходимы другие лабораторно-инструментальные исследования, при учете которых назначаемые методы терапии будут более эффективными.

Особенности анализа

При выборе иммуногистохимического исследования рецепторной чувствительности к эстрогену и прогестерону наблюдаются следующие особенности:

• основным биоматериалом служат ткани, которые были получены после биопсии эндометрия матки;
• перед сбором биоматериала пациентка должна пройти подготовительные этапы – последний период употребления пищи за 8 часов и жидкости за 3 часа, запрет распития алкогольных напитков за 1 сутки, исключение половых связей за 2-3 дня, отсутствие употребления нерекомендуемых препаратов за 1 неделю (полный перечень лекарств предоставляет врач-гинеколог при назначении исследования);
• суть исследования состоит в получении комплексов антиген-антитело, которые затем изучают при помощи микроскопа благодаря содержанию специфической метки, видимой визуально;
• в первоначальном виде полученные комплексы бесцветные, поэтому дополнительно осуществляют окрашивание препарата, только затем проводят микроскопию;
• само исследование осуществляют при помощи новейшего микроскопа, через который можно рассмотреть образец ткани, а также выполнить фотофиксацию;
• созданные снимки через фотофиксацию сохраняют, чтобы их мог оценить цитолог, гинеколог, онколог (это главное преимущество теста, так как при повторении исследования можно сравнивать данные разных анализов);
• средняя продолжительность исследования составляет 5-7 дней, так как врачу-цитологу требуется много времени для тщательного исследования всех параметров тканей;
• в качестве биоматериала берут кусочки ткани из разных участков патологического очага, так как не во всех из них могут содержаться специфические маркеры заболевания.

В процессе сбора, транспортировки и исследования биоматериала соблюдают полноценные условия стерильности, чтобы микроорганизмы и другие внешние факторы не повлияли на содержимое.

Создание микропрепаратов

Кусочки ткани предварительно подвергают следующей обработке, чтобы получить качественные микропрепараты, подлежащие исследованию:

• заключение тканей в парафин для транспортировки и хранения, который затем удаляют уже в лаборатории;
• нарезание ткани на тончайшие слои;
• внесение реагента на основе ферментов, чтобы вернуть полную антигенную активность образцу;
• нанесение протеинового блока, благодаря которому происходит специфическое окрашивание;
• внесение еще одного реагента, в котором содержатся антитела, избирательно связывающиеся с антигенами для создания иммунных комплексов;
• инкубация при немного повышенной температуре, чтобы комплексы антиген-антитело сформировались быстрее;
• добавление реагента с системой детекции, которая встраивается в структуру иммунных комплексов;
• повторная инкубация для ускорения хода реакции;
• нанесение красителя гематоксилином, который распределяется по всем клеткам и их внутреннему содержимому, благодаря чему каждый элемент можно рассмотреть визуально при помощи микроскопа;
• процедура дегидратации;
• нанесение покровочного стекла на обработанные срезы тканей, чтобы в таком виде их можно было установить в микроскоп.

Дальнейшие действия лаборант не выполняет, они доступны только для врача-цитолога.

Микроскопия

Цитолог устанавливает каждый микропрепарат под микроскопом, изучая следующие особенности тканей:

• наличие или отсутствие иммунных комплексов антиген-антитело;
• степень распространения иммунных комплексов по образцу;
• подсчет иммунных комплексов при помощи процентного отображения уровня клеток, имеющих чувствительность к гормонам (эстрогену и прогестерону).

Все увиденные данные цитолог фиксирует в результате анализа. В них вносят данные пациента, показатели нормы отсутствуют. Это связанное с тем, что референсные значения зависят от многих факторов (возраст, гормональная активность). Затем результаты микроскопии отправляют к гинекологу или онкологу для расшифровки.

Расшифровка анализа

Ответ гистолога при иммуногистохимическом исследовании сугубо специфичный. Для рядового пациента будет непонятен. Суть заключения - в количественном процентном отображении клеток, чувствительных к рецепторам к эстрогенам и прогестерону в эндометрии.

Нормы строго индивидуальны, зависят от проводимой гормональной терапии, а также от возраста пациентки. Общий принцип результата - чем больше экспрессия рецепторной активности, тем выше вероятность прогрессирования опухоли. Чем ниже активность, тем меньше возможность естественного оплодотворения. Так как ответ не содержит информации, которая будет неверно истолкована пациенткой, то он может быть выдан на руки.