Иммуногистохимическое исследование рецепторной чувствительности и пролиферативного показателя

Иммуногистохимическое исследование рецепторной чувствительности к эстрогенам (ER) и прогестерону (PR), а также пролиферативного показателя (Ki-67) применяют при подозрении на онкологические заболевания.

Характеристики исследования:

Тип биоматериала: Аспират из полости матки.
Синонимы (rus): Определение рецепторов эстрогена, прогестерона и Ki-67 в эндометрии.
Синонимы (eng): immunocytochemistry of progesterone, immunocytochemical analysis ofsteroid-receptor and Ki-67, estrogen receptors and Ki-67.
Метод исследования: жидкостная цитология + иммуноцитохимическое исследование.
Сроки выполнения: 7 дней

В каких случаях назначают анализ?

Иммуногистохимическое определение ER и PR, а также индекса пролиферации ki-67 назначают:

женщинам с раком молочной железы (такие опухоли считают гормонозависимыми, их рост и метастазирование связаны с продукцией эстрогена и прогестерона);
при женском бесплодии и определяют наличие специфических рецепторов (ER и PR) в эндометрии слизистой оболочке, выстилающей матку изнутри;
в рамках программы ЭКО перед назначением гормональных препаратов в высоких дозах;
при онкологических образованиях в теле матки.

Важность исследования

Одна из самых частых разновидностей злокачественного процесса у женщин – опухоль эндометрия матки. Важно не только определить дифференциальный диагноз, но также оценить различные параметры новообразования:

степень распространения по тканям;
степень злокачественности клеток;
активность пролиферации ткани опухоли, от чего зависит прогноз, назначаемые методы терапии.

Для проведения иммуногистохимического исследования необходимо взять биоматериал посредством аспирации жидкости из тела матки. По этим данным можно одновременно установить первичный диагноз благодаря выявлению атипичных клеток, а также отследить многие параметры злокачественного процесса. Благодаря выявленным сведениям назначают оптимальные методы терапии, которые будут воздействовать на онкологический процесс патогенетически, чтобы удалить опухоль и предотвратить ее прогрессирование.

В случае отсутствия своевременной диагностики посредством иммуногистохимического исследования могут развиться следующие осложнения:

увеличение опухоли в размерах, которая будет сдавливать нормальные ткани, вызывая их повреждение и снижение функциональности;
распространение атипичных клеток через лимфу и кровь с появлением вторичных опухолей в других тканях и органах в виде метастазов;
уменьшение степени дифференцировки клеток, что делает злокачественный процесс более активным, поэтому он меньше поддается терапии;
прорастание опухоли в окружающие здоровые ткани, из-за чего требуется не просто удалить новообразование, но и весь орган, что приведет к нарушению репродуктивной функции.

Необходимо помнить, что данные исследования применяют не только при подозрении злокачественного процесса, но также для отслеживания состояния репродуктивной системы в процессе подготовки к ЭКО. Благодаря исследованию можно понять, влияют ли половые гормоны на рецепторы матки, чтобы приступить к внедрению зародыша.

Для чего необходим анализ

Оценка рецептурной чувствительности к эстрогену и прогестерону, изучение пролиферативной активности в комплексе требуется для получения следующих данных:

подтверждение или опровержение диагноза злокачественного новообразования в полости матки;
степень дифференцировки злокачественных клеток;
чувствительность рецепторов на поверхности матки к эстрогену и прогестерону, так как большинство злокачественных новообразований появляется и увеличивается в размерах за счет влияния половых гормонов;
степень влияния прогестерона и эстрогена на рак молочной железы;
подбор оптимальных методов терапии для лечения злокачественного процесса в матке;
эффективность методов терапии опухоли в процессе их применения и после завершения, чтобы своевременно корректировать направление, определять прогрессирование новообразования или переход в стадию ремиссии;
подготовительные процедуры к выполнению экстракорпорального оплодотворения, чтобы оценить степень влияния половых гормонов на маточные рецепторы.

Так как выявленные результаты могут по-разному влиять на репродуктивную систему, требуется учитывать не только их, но и сведения других лабораторно-инструментальных тестов. Только так можно в точности установить диагноз, назначить адекватные методы терапии, которые быстро приведут к результату и предотвратят осложнения.

Особенности анализа

В случае применения иммуногистохимического исследования для оценки рецепторной чувствительности к эстрогену и прогестерону, пролиферативной активности учитывают ряд данных:

основным биоматериалом для исследования служит жидкость из тела матки, которую получают при помощи аспирации;
образец хранят в стерильных условиях, сразу же транспортируют в лабораторию, где приступают к подготовке для последующего выполнения иммуногистохимического исследования;
биоматериал предварительно обрабатывают реагентами и красителями, чтобы создать полноценный образец, где можно выявить иммунные комплексы и степень их распространения;
после завершения методики изучают индекс пролиферации опухоли, по этим сведениям определяют ее агрессивность и возможность проведения гормональной терапии;
в процессе оценки маркеров применяют новейший микроскоп, через который врач отслеживает иммунные комплексы визуально, а также рассчитывает их в процентном содержании;
при проведении диагностики допустимо выполнение фотофиксации, чтобы создать фотографии выявленных сведений из аспирата (тогда результаты смогут увидеть сразу несколько врачей, а также доступны их сравнения с данными от нового анализа для отслеживания динамики патологического процесса);
при подготовке к ЭКО достаточно лишь оценить степень чувствительности рецепторов к эстрогену и прогестерону, так как у таких пациенток отсутствует злокачественный процесс.

Все сведения распечатывают на лабораторном бланке, отправляя сразу лечащему врачу. На это может уйти около 5-7 дней, так как процедура подготовки и изучения биоматериала продолжительна.

Важно помнить, что лаборант и цитолог лишь осуществляют диагностику, ее интерпретацию должен проводить онколог. Он оценивает возможность гормональной терапии, составляет прогноз развития патологии благодаря выявлению агрессивности клеток опухоли.

Создание микропрепаратов

Аспират из полости матки размещают в стерильный контейнер, сразу же отправляя в лабораторию. Там выполняют следующие процедуры для подготовки образца:

соединение биоматериала и реагента на основе ферментов, чтобы активировать содержащиеся антигены;
внесение протеинового блока, направленного на окрашивание элементов, подлежащих идентификации;
инкубация для ускорения биохимической реакции;
внесение реагента на основе иммунологических компонентов, чтобы создать специфические комплексы антиген-антитело, которые идентифицируют через микроскоп;
инкубация;
внесение еще одного реагента с системой детекции, структура которого встраивается в иммунные комплексы, поэтому обнаружение искомых компонентов облегчается;
инкубация;
удаление лишней жидкости, чтобы биоматериал можно было разместить под покровочное стекло и идентифицировать содержимое под микроскопом.

На этом действия лаборанта заканчиваются, саму идентификацию всех параметров определяет цитолог.

Микроскопия

Готовый образец окрашенного биоматериала размещают под микроскоп, затем выявляют следующие параметры:

наличие или отсутствие специфических иммунных комплексов антиген-антитело, на поверхности до которых должна содержаться метка (их хорошо видно под микроскопом за счет окрашивания);
концентрация иммунных комплексов в процентном содержании, данные подсчитывает цитолог;
оценка общего клеточного состава злокачественного новообразования.

В конце исследования врач проводит расчет индекса, чтобы указать пролиферативную активность. В данных одновременно указывают индекс процентном содержании, а также его значения. Оценку возможности проведения гормональной терапии по индексу пролиферативной активности определяет лечащий врач (онколог).

Иммуногистохимическое исследование

Для проведения иммуногистохимического исследования берут опухолевую ткань пациента. Это делают специальной тонкой иглой для биопсии или осуществляют забор во время операции. Из полученного образца делают тонкий срез для микрокопирования и окрашивают его специальными реагентами. В ткани происходит реакция «антиген-антитело», позволяющая судить о наличии тех или иных веществ в опухоли.

Иммуногистохимическое сследование полученного материала включает в себя:

наличие рецепторов к эстрогену (ER) и прогестерону (PR);
оценка экспрессии опухоли с помощью маркера ее активности пролиферативного показателя(ki -67).

Рецепторы к эстрогену (ER) и прогестерону (PR)

Эстроген и прогестерон - основные женские половые гормоны. Они вырабатываются яичниками и оказывают мощнейшее влияние на функционирование репродуктивной системы женщины. Рецепторы к эстрогену (ER) и прогестерону (PR) располагаются на поверхности опухолевой клетки. Это белковые образования. Подвергаясь влиянию женских половых гормонов, они формируют особый комплекс, способный стимулировать появление новых опухолевых клеток.

Таким образом, иммуногистохимическое исследование ER и PR способно определить доброкачественный или злокачественный характер опухоли, ее чувствительность к гормонам, скорректировать и уточнить лечение, установить эффективность терапии.

Следует отметить, что механизм действия некоторых препаратов (тамоксифен, фарестон) направлен на блокировку эстрогеновых и прогестероновых рецепторов. Чем достигается уменьшение или полная остановка роста опухоли.

Индекс пролиферации опухоли ki -67

Индекс пролиферации опухоли ki -67 - это показатель скорости ее деления. В зависимости от величины пролиферативного показателя ki -67 определяют степень «агрессивности» новообразования и характер лечения:

до 15 % - низкая «агрессивность», назначение гормонотерапии;
более 30 % - высокая «агрессивность» опухоли, показано химиотерапевтическое лечение.

Обычно при низком индексе ki - 67 и высоком содержании эстрогенов (ER) и прогестерона (PR) гормонотерапия эффективна и дает хороший прогноз. При высокой агрессивности опухоли и ее низкой чувствительности к гормонам, как правило, бывает обратная картина и возникает необходимость корректировки лечения.

Рецепторы, пролиферативная активность

Потапова Оксана Валентиновна