Посев на флору с определением чувствительности к антибиотикам

Бактериология: посев с определением чувствительности

Бактериологический посев на микрофлору с определением чувствительности к антибиотикам - метод исследования, позволяющий выявить патогенные микроорганизмы и противомикробные средства к ним.

Подготовка к исследованию:

• Необходимо отказаться от приема антибиотиков
• Женщинам урогенитальный мазок или мочу рекомендуется сдавать до менструации или через 2 дня после ее окончания
• Мужчинам в течение 3 часов до сдачи мочи или урогенитального мазка не следует мочиться

Характеристики исследования:

• Тип биоматериала:  мокрота, моча, сперма, сок простаты, молоко, слизь цервикального канала, мазок из зева и носа, пазух, ротовой полости, мазок из уретры, влагалища и цервикального канала, а также соскоб с шейки и полости матки, отделяемое с ран, материал из ушей
• Синонимы (rus): Посев на флору, бакпосев с определением чувствительности к антибиотикам
• Синонимы (eng): Inoculation of flora, the cultures with the definition of sensitivity to antibiotics
• Методы исследования: микробиологические
• Сроки выполнения: 3-5 дней

Когда назначают бакпосев?

Бакпосев на микрофлору с определением чувствительности к антибиотикам назначают при:

1. Инфекционных заболеваниях различной локализации;
2. Инфекциях, трудно поддающихся антибактериальной терапии;
3. Составлении антибиотикограммы относительно условно-патогенной микрофлоры в период беременности.

Методы исследования

Для определения чувствительности возбудителя к противомикробным препаратам существует несколько методов исследования:

1. Методика с применением дисков. На питательную среду, предварительно засеянную штаммом микроорганизма, накладывают бумажные диски, пропитанные антибактериальным препаратом. Чувствительность к нему вызовет подавление роста колоний вокруг диска. Результат анализа оценивается спустя сутки.
2. Методика разведений. Способ позволяет оценить степень чувствительности выделенных штаммов. Для этого проводят посев микрофлоры на питательные среды, в которых содержатся противомикробные средства в различных концентрациях. Для оценки результата выбирается тот образец, в котором рост микрофлоры был подавлен с применением минимально возможной концентрации антибиотика.
3. Методика быстрых тестов. Современные планшетки и тест-полоски позволяют провести анализ максимально быстро и точно.

Характеристика определяемой микрофлоры

Аэробная микрофлора – это бактерии, для жизнедеятельности и размножения которых требуется взаимодействие с кислородом. Под его влиянием осуществляется метаболизм и выполнение остальных функций. Для бактерий характерны следующие особенности:

• при окислении микроорганизмы вырабатывают токсины, негативно влияющие на ткани человека;
• отсутствует выраженное ядро;
• вхождение в состав условно-патогенной микрофлоры, в основном бактерии сосредоточены на кожных покровах.

Факультативные анаэробы – это микроорганизмы, которые живут и размножаются без взаимодействия с кислородом, но при соприкосновении с ним не погибают (в отличие от истинных анаэробов). Поэтому при заражении этими бактериями недостаточно соприкосновения тканей с кислородом. Дополнительно требуется антисептическая, антибактериальная обработка.

Так как аэробы и факультативные анаэробы невозможно дифференцировать визуально для лечения, требуется лабораторная диагностика. С этой целью проводят забор биологического материала, его посев на питательную среду. В процессе теста определяют не только патогенную микрофлору, но и ее восприимчивость к разным видам антибиотиков.

Важность анализа

В норме условно-патогенные бактерии, относящиеся к аэробам и факультативным анаэробам, не приносят никакого вреда. Они могут продолжительно концентрироваться на поверхности кожи и слизистых оболочках. Если на человека влияет повреждающий фактор (переохлаждение, снижение функции иммунитета, травмы), они начинают активно размножаться, вызывая инфицирование с дальнейшим развитием гнойно-воспалительного очага. 

Это может привести к следующим осложнениям:

• интоксикация организма;
• распространение инфекции на внутренние органы;
• постепенное увеличение площади поражения с вовлечением большого объема здоровых тканей в инфекционный процесс;
• проникновение бактерий в системный кровоток, что может спровоцировать перикардит (инфекционное поражение тканей сердца) или сепсис, часто вызывающий смертельный исход при отсутствии лечения в ближайшие часы.

Своевременно произведенная диагностика позволяет добиться следующих целей:

• обнаружение точного вида патогенного микроорганизма из аэробной и факультативно-анаэробной флоры, которая вызывает поражение;
• определение чувствительности к широкому списку антибиотиков, в который минимально входит 20 действующих веществ;
• выведение результатов чувствительности в 2 видах – обнаружение степени чувствительности (низкая, средняя, высокая), оценка минимальных ингибирующих концентраций МИК (позволяет подобрать оптимальную дозу препарата, вызывающую уничтожение бактерий, но не вредящую организму);
• дополнительная оценка чувствительности к бактериофагам для проведения более щадящей терапии.

Обычно врачи назначают тест, если лечение не требуется проводить экстренно. Это связано с тем, что минимальный период проведения анализа составляет 4-5 дней. Поэтому врач должен исключить риск развития осложнений в этот период.

Правила подготовки

При направлении на бактериологический посев лечащий врач даст общие рекомендации по правилам подготовки, чтобы не допустить ложных результатов:

• запрет употребления местных или системных антисептиков, антибиотиков, фунгицидных средств за 10-14 дней до исследования;
• запрет любой обработки очага инфекции в день сдачи анализа (запрещено удалять гной даже проточной водой, чтобы выявить точную концентрацию бактерий);
• при проведении гинекологического мазка женщинам требуется учитывать менструальный цикл, выбирая день за неделю до или после этого периода;
• при проведении урологического мазка мужчинам нельзя мочиться за 3 часа до исследования;
• при взятии образца из любого отдела ЖКТ нельзя употреблять пищу, чистить зубы, полоскать горло, пить в день сдачи анализа.

Важно оставить место локализации инфекции в нетронутом виде, чтобы получить достоверные данные по степени размножения бактерий, их виду и чувствительности к препаратам.

Ход исследования

Предварительно медсестра или врач проводит забор биологического материала. Его размещают в стерильной пробирке или контейнере, плотно закручивая покрышкой. Важно не допустить взаимодействия с другими видами бактерий, чтобы результаты анализа получились корректными. Далее его проводят по этапам:

• подготавливают чашку Петри и содержащуюся питательную среду, куда ватной палочкой распределяют образец биологического материала тонким слоем;
• ожидают роста микрофлоры, которая может происходить в течение 3-7 дней;
• если роста микрофлоры не произошло или он незначителен, дальнейшие действия не проводят, так как это относится к варианту нормы;
• при обильном произрастании часть бактерий перемещают на предметное стекло и окрашивают, чтобы лаборант смог увидеть очертания бактерий под микроскопом (они приобретут фиолетовый, красный, розовый оттенок);
• перемещение предметного стекла под микроскоп, изучение содержимого в 10 квадратах, где определяют объем и разновидность бактерий;
• переносят полученные данные на бланк анализа, чтобы врач смог оценить вид патогенного микроорганизма и его количество.

Далее проводят исследование, в ходе которого выявляют степень чувствительности патогенной микрофлоры к разным видам антибиотиков. Используют не менее 20 действующих веществ. Чувствительность может быть отсутствующей, низкой, средней и высокой. Недопустимо применять лекарства с отсутствием или низкой степенью чувствительности. Иначе это может не вызвать эффекта или приведет к развитию резистентного штамма, на который не повлияют и другие препараты.

Результат отдают лечащему врачу или пациенту. Самостоятельная расшифровка и лечение недопустимо, так как врач должен подобрать вид лекарства, его дозировку в зависимости от проявляющихся симптомов, наличия противопоказаний и побочных эффектов.

Интерпретация результатов анализа

Под влиянием антибиотиков происходит либо подавление роста колоний, либо их полное уничтожение.

Возбудитель считается устойчивым к антибактериальному препарату, если при проведении анализа выявлен рост микроорганизмов, несмотря на применение антибиотика. Если же размножение возбудителя полностью подавлено, то речь идет о чувствительности микроба к данному антибиотику.

Определение данных свойств патогенной микрофлоры позволяет прицельно воздействовать на нее при назначении схемы лечения. Это позволяет повысить эффективность проводимой терапии, а также предупредить возникновение последующей антибиотикорезистентности и мутации болезнетворных микроорганизмов.