Антитела IgA к аденовирусу

Доронин Иван Михайлович
Автор статьи: Доронин Иван Михайлович Заведующий отделом ПЦР и генетики,
Данное исследование временно не выполняется нашей лабораторией

Анализ определения антител (АТ) IgA к аденовирусу (anti-Adenovirus IgA)

Анализ на выявление в сыворотке крови антител (АТ) IgA к аденовирусу, которые являются маркером имеющей место аденовирусной инфекции, в текущий момент или в прошлом, представляет собой лабораторно-диагностическое серологическое исследование.

Подготовка к исследованию:

  • исследование проводится утром, натощак;
  • с последнего приема пищи должно пройти не менее 8 часов;
  • исключить прием алкоголя не менее чем за 24 часа до взятия биоматериала;
  • не рекомендуется сдавать кровь на серологию после флюорографии, рентгена, физиотерапевтических процедур.

Тип биоматериала: венозная кровь

Синонимы (rus): Антитела класса IgA к аденовирусу

Синонимы (eng): Anti-Adenovirus IgA

Методы исследования: иммуноферментный анализ

Сроки выполнения: 5-7 дней

Общая информация о аденовирусе и его выявлении

Аденовирус относится к ДНК-содержащим вирусам, характеризуется высокой естественной восприимчивостью в человеческом организме. Является возбудителем аденовирусной инфекции с поражением респираторной системы, конъюнктивы глаз, оболочек мозга, органов дыхательной, мочеполовой, пищеварительной системы. Выявлено 6 патогенных типов (A-F), свыше 40 серотипов, среди которых имеются клинически значимые.

Серологическое исследование проводится с целью выявления в сыворотке крови антител класса IgA, к антигенам аденовируса как возбудителя инфекционного процесса.

Появление в крови АТ класса IgA, как и классов IgM и IgG, есть следствие иммунного ответа организма на внедрение инфекционного агента.

Антитела IgA являются секреторными, обеспечивают защиту преимущественно кожи и слизистых от возбудителя инфекционного процесса. Их появление обнаруживается в течение первых дней после внедрения аденовируса с последующим нарастанием концентрации. Антитела обнаруживаются при первичном инфицировании, при повторной инфекции, как в острой стадии, так и после ее завершения и выздоровления.

В качестве лабораторного метода находит применение ИФА (иммуноферментный анализ):

  • представляет собой непрямой метод определения, поскольку с его помощью диагностируют не наличие собственно аденовируса как возбудителя, а иммунную реакцию на него в виде появления антител IgA;
  • обладает достаточно высокой чувствительностью (свыше 70%);
  • предполагает использование парных сывороток, взятие которых имеет место в острой стадии инфекции (обычно на третий-пятый день) а затем спустя, по крайней мере, десять дней, с целью демонстрации нарастания титра АТ;
  • клинически значимым показателем нарастания титра АТ является его четырехкратное значение, как минимум.

Показания для назначения анализа

Анализ назначается педиатрами, терапевтами, инфекционистами и показан при проведении лабораторной диагностики с целью подтверждения клинического диагноза имеющего место инфекционного процесса, обусловленного аденовирусом, в текущий период или ранее.

Потребность в анализе

Аденовирус – это распространенный патогенный микроорганизм, который часто поражает людей любого возраста. Если своевременно выявить его, можно провести правильное лечение, чтобы пациент выздоровел в короткие сроки. Тогда вместо 7-10 дней потребуется не более 3-5 суток на полное выздоровление. Также можно избежать многих осложнений, в том числе присоединения бактериальной инфекции.

Выполнение иммуноферментного анализа для выявления титра иммуноглобулинов класса A требуется по следующим причинам:

  • определение точного вида вируса, вызвавшего клиническую симптоматику, так как многие из них проявляются схожими признаками;
  • точная дифференциальная диагностика патогенного микроорганизма при подозрении на несколько видов вирусов;
  • выявление точной стадии развития болезни, IgA начинают выделяться только в острый период, когда она только началась;
  • выявление периода, когда острая стадия завершается, поэтому иммуноглобулины этого типа полностью исчезают из организма;
  • определение периода, при котором инфекция не завершается, а вызывает осложнения, при которых IgA сохраняются в исходном количестве или увеличиваются.

Данные от исследования будут понятны только лечащему врачу, так как на бланке будут выведены лишь значения уровня антител в цифрах. В тексте не указывают, что именно это означает. Если пациент начнет интерпретировать их уровень самостоятельно, он может ошибиться с диагнозом, из-за чего будет лечиться неправильно.

Особенности анализа

При определении титра IgA методом иммуноферментного анализа выделяют ряд некоторых особенностей.

  1. Анализ можно сдавать в любое время суток. Временной промежуток не влияет на количество антител. Если они присутствуют в системном кровотоке, они будут находиться в нем в исходном количестве в любое время суток. Но IgA будут уменьшаться по мере развития болезни и выздоровления.
  2. Тест точный и достоверный. Это опосредованно использованием полуавтоматического оборудования, которое самостоятельно подсчитывает число иммуноглобулинов, выдавая их на бланке. Врач-лаборант лишь разливает биологический материал и реагенты по планшету.
  3. Для теста требуется только венозная кровь. Никакие другие биологические жидкости или ткани не покажут точный уровень иммуноглобулинов, так как они должны циркулировать в кровотоке.
  4. Определение  титра IgA возможно только в заданный промежуток времени. Обычно это с 3-5 дня после первичного заражения, вплоть до 2 недель болезни. Если проводить исследование раньше или позже, иммуноглобулины не будут выявлены, что приведет к появлению ложноотрицательных данных.
  5. Помимо положительных и отрицательных тестов, при определении IgA бывает и сомнительный результат. Например, если исследование проведено на третьи сутки после заражения, когда антитела только начали вырабатываться, но в минимальном количестве. В этом случае врач обязан выдать повторное назначение через 5-7 дней. Тогда иммуноглобулины острой фазы уже должны проявиться.

Назначение на анализ можно получить у лечащего врача. Например, педиатра, терапевта, инфекциониста, пульмонолога. Но многие пациенты хотят проходить его самостоятельно, чтобы отслеживать тенденцию развития болезни.

Этапы выполнения анализа

Иммуноферментный анализ предоставляет пациенту и врачу точные и достоверные данные только в случае, если все его этапы пройдены правильно. В первую очередь от человека требуется правильная подготовка. Как только она завершится, приходят в кабинет медицинской сестры, где сдают венозную кровь. Она наполняется в пробирку с антикоагулянтом, поэтому риск образования тромбоцитарного сгустка полностью исключается. Затем биологический материал перевозят непосредственно в лабораторию, где производят остальные этапы исследования.

  1. Размещение пробирок в аппарате для центрифугирования. Их устанавливают в специальных держателях по кругу, чтобы поддерживать равновесие. Подключают аппарат, который прокручивает пробирки на высоких скоростях, до 1.000 оборотов в минуту. Как только он отключается, венозная кровь разделяется на 2 фазы. Снизу появляются форменные элементы, которые придают красный оттенок. Наверху высвобождается плазма крови. Она полупрозрачная, желтоватая. Сверху сосредоточены все компоненты, имеющие минимальную массу, в том числе антитела.
  2. Перемещение плазмы на лабораторный планшет. Для этого используют специальный шприц, которым отмеряют требующееся количество жидкости, то есть 1 мл. На планшете уже сосредоточены реагенты. Это конъюгат с мечеными антигенами, заведомо положительный образец, физиологический раствор в качестве отрицательной пробы. Плазму добавляют к конъюгату, чтобы между антителами пациента и искусственными антигенами началась иммунологическая реакция. То есть образуются комплексы «антиген-антитело».
  3. Перемещение планшета в прибор для инкубации. В нем немного повышают температуру, чтобы она достигла человеческих критериев. Так иммунные комплексы сформируются быстрее, в течение нескольких минут.
  4. Подсчет данных фотокалориметром. Планшет перемещают из инкубатора в фотокалориметр. Это аппарат, который подсчитывает искомые данные при помощи пропускания световых лучей. Они измеряют уровень антител благодаря вычислению меченой метки на антигенах. Аппарат указывает подсчитанный уровень параметра на бланке, распечатывая его лаборанту.

Лаборант выдает вычисленные данные пациенту или лечащему врачу, после чего требуется правильная интерпретация. Если тест проведен правильно, можно сразу определить диагноз и начать лечение.

Иммуноферментный анализ предоставляет точные данные о наличии или отсутствии аденовирусной инфекции в теле пациента. Однако многие врачи советуют вычислять не только иммуноглобулины острой фазы, но также и IgG. Важно учитывать ряд критериев анализа, которые помогут не допустить получения ложноотрицательных или ложноположительных данных, сомнительных результатов.

Результаты анализа и их интерпретация

После прохождения анализа обследуемый получает результат, формулировка которого может быть положительной, отрицательной или содержать рекомендацию пройти дополнительное тестирование из-за недостаточно однозначных, сомнительных данных.

В случае отрицательного результата при отсутствии в сыворотке крови АТ IgA к аденовирусу делается заключение:

  • об отсутствии аденовирусной инфекции;
  • об инкубационном периоде заболевания;
  • о возможных низких пороговых значениях АТ, обусловленных чувствительностью метода (особенно часто у пациентов-детей);
  • об имевшей место инфекции в прошлом.

В случае положительного результата при выявлении антител IgA выдается заключение о подтверждении острой аденовирусной инфекции, либо текущей, либо перенесенной относительно недавно.

Серологический анализ по выявлению АТ IgA к аденовирусу в сочетании с выявлением антител IgG служит дополнительным подтверждением данных клинического обследования.