Определение антигена лямблий в кале

Доронин Иван Михайлович
Доронин Иван Михайлович Заведующий отделом ПЦР и генетики,

Серологический анализ на определение антигена лямблий в кале


Определение антигена лямблий (Giardia lamblia)в кале при помощи иммунохроматографического анализа - современный способ диагностики. Высокая специфичность и чувствительность, отсутствие субъективных факторов позволяет выявлять наличие как цист, так и трофозоитов в образцах фекалий.

Подготовка к исследованию:

  • Исследование проводится утром, натощак
  • С последнего приема пищи должно пройти не менее 8 часов
  • Исключить прием алкоголя не менее чем за 24 часа до взятия биоматериала
  • Не рекомендуется сдавать кровь на серологию после флюорографии, рентгена, физиотерапевтических процедур

Тип биоматериала: венозная кровь

Синонимы (rus): Иммунохроматографический тест для качественного определения Giardialamblia в образцах кала

Синонимы (eng): Giardialamblia Ag

Методы исследования: иммуноферментный анализ

Сроки выполнения: 5-7 дней


Зараженность лямблиозом у детей в несколько раз выше, чем у взрослых и достигает 15%. При отсутствии диагностики и адекватной терапии носительство приводит первоначально к диспепсическим расстройствам и подъему температуры. 

Хроническая форма лямблиоза характеризуется более серьезными нарушениями:
  • заболеваниями ЖКТ;
  • аллергическими реакциями;
  • кожными проявлениями;
  • отставанием в развитии;
  • психосоматическими расстройствами.
Проблема точной диагностики лямблиоза может заключаться в биологии протозойного организма. Он существует в форме цист (при их заглатывании происходит заражение) и вегетативного организма - трофозоита. Последний живет и размножается в тонком кишечнике. Причем выброс новых цист происходит не постоянно, а эпизодически.
Поэтому даже при наличии явных признаков заражения обнаружить в кале цисты можно не всегда - требуется несколько раз сдать анализ. 
Трофозоиты плохо сохраняются, их можно увидеть только в теплых образцах фекалий. Результат может зависеть от правильности доставки материала и опыта лаборанта.
Дуоденальное зондирование для обнаружения трофозоитов - сложная процедура, сделать ее ребенку можно не всегда.
Анализ на антитела в крови к лямблиям для диагностических целей не годится, так как они образуются не сразу после заражения.

Преимущества ИФА на антиген лямблий в кале


Иммуноферменнтный анализ на обнаружение специфических антигенов в кале лишен всех вышеуказанных недостатков.
Чувствительность и специфичность метода практически 100%, поэтому положительный анализ означает точное присутствие в образце цист или трофозоитов лямблий и является диагностически достоверным.
Метод не требует инвазивных вмешательств - дуоденального зондирования или взятия венозной крови.
Образцы стула для анализа не нуждаются в срочной доставке в лабораторию как для микроскопии. Их можно хранить до 3-х суток в охлажденном виде и даже замораживать. На точность анализа это не повлияет.

Методика проведения и интерпретация результатов


Биоматериал для исследования - кал, который желательно собрать в небольших количествах из нескольких участков.

Метод состоит из нескольких этапов:
  • добавление в образец антител для притягивания антигенов лямблий;
  • добавление конъюгата, пероксидазы и анти-антител для удаления дополнительных антител, не вступивших в реакцию;
  • промывка от несвязанных ферментов;
  • добавление хромогена для проявления взаимодействия ферментативного комплекса и пероксида;
  • торможение реакции стоп-раствором, изменение окраски с синей на желтую.


Визуальная оценка или ридер-контроль

Лунка с положительной пробой окрашена в более темный цвет, чем отрицательный контрольный образец, что можно определить визуально. Считыватель показывает бóльшую оптическую плотность положительных проб против контроля и меньшую - отрицательных.