Определение антигена лямблий в кале
Серологический анализ на определение антигена лямблий в кале
Определение антигена лямблий (Giardia lamblia) в кале при помощи иммунохроматографического анализа позволяет выявлять наличие как цист, так и трофозоитов лямблий в образцах фекалий.
Подготовка к исследованию:
- исключить прием алкоголя не менее чем за 24 часа до сдачи биоматериала;
- не рекомендуется сдавать кал после флюорографии, рентгена, физиотерапевтических процедур.
Характеристики исследования:
- Тип биоматериала: кал
- Синонимы (rus): иммунохроматографический тест для качественного определения Giardialamblia в образцах кала
- Синонимы (eng): Giardialamblia Ag
- Методы исследования: иммуноферментный анализ
- Сроки выполнения: 5-7 дней
Зараженность лямблиозом у детей в несколько раз выше, чем у взрослых и достигает 15%. При отсутствии диагностики и адекватной терапии носительство приводит первоначально к диспепсическим расстройствам и подъему температуры.
Хроническая форма лямблиоза характеризуется более серьезными нарушениями:
- заболеваниями ЖКТ;
- аллергическими реакциями;
- кожными проявлениями;
- отставанием в развитии;
- психосоматическими расстройствами.
Проблема точной диагностики лямблиоза может заключаться в биологии протозойного организма. Он существует в форме цист (при их заглатывании происходит заражение) и вегетативного организма - трофозоита. Последний живет и размножается в тонком кишечнике. Причем выброс новых цист происходит не постоянно, а эпизодически. Поэтому даже при наличии явных признаков заражения обнаружить в кале цисты можно не всегда - требуется несколько раз сдать анализ. Трофозоиты плохо сохраняются, их можно увидеть только в теплых образцах фекалий. Результат может зависеть от правильности доставки материала и опыта лаборанта. Дуоденальное зондирование для обнаружения трофозоитов - сложная процедура, сделать ее ребенку можно не всегда. Анализ на антитела в крови к лямблиям для диагностических целей не годится, так как они образуются не сразу после заражения.
Преимущества ИФА на антиген лямблий в кале
Иммуноферменнтный анализ на обнаружение специфических антигенов в кале лишен всех вышеуказанных недостатков. Чувствительность и специфичность метода практически 100%, поэтому положительный анализ означает точное присутствие в образце цист или трофозоитов лямблий и является диагностически достоверным. Метод не требует инвазивных вмешательств - дуоденального зондирования или взятия венозной крови. Образцы стула для анализа не нуждаются в срочной доставке в лабораторию как для микроскопии. Их можно хранить до 3-х суток в охлажденном виде и даже замораживать. На точность анализа это не повлияет.
Важность анализа
Лямблии проникают в организм человека фекально-оральным путем, после чего распространяются по ЖКТ. Они вызывают диспепсические расстройства, нарушение формирования стула, аллергические реакции и другие симптомы. Если своевременно не провести лечение острой стадии, она перейдет в хроническую, патологию будет устранить тяжелее. Поэтому врачи рекомендуют своевременно проводить определение антигенов лямблий в образцах фекалий, чтобы определять патогенный микроорганизм и проводить правильное лечение.
Выполнение иммунохроматографического теста предоставляет для врача и пациента ряд преимуществ:
- обнаружение точного вида патогенного микроорганизма, вызвавшего симптомы пищеварительных расстройств и гиперчувствительности иммунитета;
- дифференциальная диагностика с заражением другими возбудителями, разными видами кишечных расстройств, аллергическими реакциями и другими патологиями;
- назначение правильных методов терапии, которые быстро приведут к эффекту, устранив риск осложнений лямблиоза;
- исключение риска назначения неправильных препаратов, например, антибиотиков или антисептиков, которые могут вызвать побочные реакции;
- предотвращение перехода острой стадии лямблиоза в хроническую;
- предотвращение распространения лямблий в печень, что может угрожать развитием гепатита и фиброза;
- оценка качества проведенного лечения, после которого индикаторная полоска в тест-системе не должна показывать положительного результата.
Назначение на иммунохроматографический тест для определения антигенов лямблий в образцах фекалий получают у терапевта, инфекциониста, педиатра, гастроэнтеролога или иного специалиста, который заподозрил лямблиоз.
Показания
После заражения лямблиями первоначально наступает инкубационный период. Он длится 1-3 недели, в этот период не проявляется никаких признаков болезни. Профилактически проведенный анализ дает отрицательные результаты. Поэтому определение антигенов лямблии в образцах фекалий рекомендуется повторять несколько раз, чтобы исключить риск недостоверных данных.
Анализ назначает врач при наличии следующих симптомов лямблиоза:
- абдоминальная боль, ухудшение аппетита, тошнота, отрыжка, вздутие живота, метеоризм;
- изменение качества стула, он становится водянистым, жидким, пенистым, в нем появляются частички жира, слизи, гноя, в тяжелых случаях крови;
- уменьшение массы тела, истощение;
- увеличение лимфатических узлов, ухудшение работоспособности, недомогание, обмороки, уменьшение артериального давления;
- аллергические реакции – крапивница, дерматит, шелушение и зуд на коже.
Все эти признаки являются прямым показанием к проведению анализа. Его можно выполнять профилактически, если ранее пациент проходил лечение или он тесно контактировал с человеком, у которого был подтвержден диагноз лямблиоза.
Подготовка, сбор, хранение и транспортировка образца
Перед выполнением анализа пациенту рекомендуется подготовиться. Помимо основных этапов подготовки он не должен принимать антибиотики, противовирусные средства, фунгициды за 7-10 дней до теста.
После подготовки выполняют сбор фекалий по правилам:
- покупают стерильный одноразовый контейнер в аптеке, к нему должна прилагаться ложка и крышка (посторонние емкости не используют, в них содержатся микроорганизмы и вещества, которые испортят результат теста);
- для сбора биоматериала используют стерильную ложку, которая идет в комплекте с контейнером, другие предметы применять нельзя;
- опорожняют кишечник, собирая небольшое количество каловых масс из разных участков, чтобы увеличить шанс на обнаружение лямблий при их наличии;
- в собранный образец фекалий добавляют участки с кровью, гноем, слизью, если они присутствуют;
- плотно закручивают контейнер крышкой.
Собранный образец фекалий хранят и транспортируют по правилам:
- контейнер с каловыми массами сразу же отправляют в лабораторию, во время транспортировки температура не должна превышать 22-23°;
- если сразу же транспортировать образец не получается, его устанавливают на дверцу холодильника при температуре 4-5°;
- замораживание недопустимо;
- при хранении и транспортировке нельзя допускать распространения прямых солнечных лучей на контейнер.
Чем раньше образец с биоматериалом поступит в лабораторию, тем достовернее данные. Поэтому сразу после утреннего опорожнения кишечника собирают фекалии и отдают в лабораторию.
Методика проведения и интерпретация результатов
Биоматериал для исследования - кал, который желательно собрать в небольших количествах из нескольких участков.
Метод состоит из нескольких этапов:
- добавление в образец антител для притягивания антигенов лямблий;
- добавление конъюгата, пероксидазы и анти-антител для удаления дополнительных антител, не вступивших в реакцию;
- промывка от несвязанных ферментов;
- добавление хромогена для проявления взаимодействия ферментативного комплекса и пероксида;
- торможение реакции стоп-раствором, изменение окраски с синей на желтую.
Визуальная оценка или ридер-контроль
Лунка с положительной пробой окрашена в более темный цвет, чем отрицательный контрольный образец, что можно определить визуально. Считыватель показывает бóльшую оптическую плотность положительных проб против контроля и меньшую - отрицательных.
Дополнительные рекомендации
После основных этапов проведения иммуноферментного анализа для определения антигенов лямблии в образцах фекалий идентифицируют окраску. Если она так и осталась темно-синей, пациент здоров, патологии нет. При наличии желтого окрашивания в лабораторном бланке прописывают наличие лямблий. Методика качественная, то есть в процессе ее проведения выявляют наличие или отсутствие лямблий. Их точное количество не определяют.
В процессе подготовки, выполнения теста и расшифровки рекомендуется придерживаться следующих рекомендаций:
- тест лучше всего повторять дважды, чтобы не допустить ложноположительных или ложноотрицательных данных;
- если симптоматика размыта, можно провести диагностику не только лямблиоза, но и других кишечных инфекций одновременно;
- самостоятельная расшифровка недопустима, так как пациент сможет по бланку вычислить наличие или отсутствие лямблиоза, но врач дополнительно оценит его анамнез и назначит правильное лечение;
- проведение количественного теста не требуется, так как инфекция требует незамедлительного лечения вне зависимости от степени ее распространения;
- после завершения терапии обязательно проходят анализ повторно, хроническая стадия лямблиоза трудно поддается терапии, могут понадобиться дополнительные препараты.
Несмотря на выполнение качественного теста без точного подсчета уровня лямблий, результаты всегда будут достоверными и информативными. С ними врачу легче провести терапию.