Антигены системы Rh (C, E, c, e), Kell – фенотипирование эритроцитов

Анализ крови на эритроцитарные антигены

Анализ на антигены системы Rh (C, E, c, e) – фенотипирование эритроцитов, то есть оценка полноценного антигенного состава на поверхности этих клеток крови. Чаще всего методику используют при потребности в переливание биологической жидкости в акушерстве-гинекологии, так как конфликты могут возникнуть в первую очередь при несовместимости по резус-фактору у матери и плода. Также методика важна в трансфузиологии, если пациенту требуется переливание крови. Важно диагностировать свойства антигенного состава эритроцитов своевременно, чтобы предотвратить их гемолиз, что чаще всего приводит к тяжелым поражениям внутренних органов и быстрой гибели пациента.

Тип биоматериала: Венозная кровь

Синонимы (rus): Анализ крови на фенотип, риск гемотрансфузионных осложнений

Синонимы (eng): Antigens of Rh (C ,E, c, e) system, Kell – phenotyping

Метод исследования: Реакция агглютинации

Для чего проводится анализ на антигены системы Rh (C, E, c, e)

При ведении женщины в состоянии беременности или планируемом хирургическом вмешательстве важно определить все параметры резус-фактора. Требуется понимать, что это не просто антиген, а целый комплекс молекул. Поэтому исследуют не наличие или отсутствие резус-фактора, а все его параметры:

• D-антиген, по наличию которого определяют резус-фактор, так как он наиболее значимый;
• С, с-антиген – рецессивные комплексы;
• Е, e-антиген – доминантные комплексы;
• Kell – система группы крови.

Исследование перечисленных параметров важно для достижения следующих целей и выявления данных:

• оценка состояния антигенного состава эритроцитов перед переливанием крови, чтобы предотвратить несоответствие биологических жидкостей, что может привести к тяжелым осложнениям или летальному исходу вследствие массовой гибели клеток;
• оценка риска резус-конфликта во время беременности, если у женщины резус-фактор отрицательной, а у плода положительный вследствие передачи этого свойства по наследству от отца;
• оценка риска развития гемолитической болезни новорожденного уже после завершения беременности и успешно проведенных родов, чтобы своевременно предпринять адекватные методы терапии, исключающие риск гемолиза эритроцитов у ребенка;
• оценка состояния параметров крови у людей, которые хотят стать донорами биологической жидкости, чтобы в будущем исключить возможность несоответствия антигенного состава эритроцитов у донора и реципиента.

Без выполнения лабораторного анализа невозможно провести хирургическое вмешательство, так как при обильной потере крови пациенту может потребоваться ее переливание от донора. В этом случае требуется строгое соответствие между донором и реципиентом по всем антигенным структурам на поверхности эритроцитов.

Что входит в комплекс

В современной лабораторной диагностике определяют не только наличие или отсутствие резус-фактора на поверхности эритроцитов. Это сложная система, которая включает в себя множество генетических параметров. Представлены наиболее важные из них:

• D-антиген, который обладает высокой степенью иммуногенности, поэтому его выявление свидетельствует о наличии резус-фактора;
• С-антиген, который часто встречается у лиц, проживающих в Азии и Африке;
• С-антиген, чаще всего встречающийся в белой популяции;
• Е-доминантный антиген, чаще встречающийся у азиатских и афроамериканских народов;
• e-доминантный антиген, чаще появляющийся у белой популяции, выделяется на поверхности эритроцитов в большей степени, чем все другие виды;
• Kell – система группы крови, насчитывающая 35 антигенов, которые важно учитывать в трансфузиологии и акушерстве-гинекологии.

Каждый из этих антигенов может входить во взаимосвязь с антителами, что и приводит к массовому склеиванию и гибели эритроцитов. Такое состояние может развиться вследствие несоответствия резус-фактора у матери и ребенка, а также после переливания крови от донора к реципиенту.

Когда назначают анализ

Исследование не входит в обязательный лабораторный профиль, поэтому его не применяют в профилактических целях при общей диспансеризации. Выделяют два направления медицины, в которых требуется обязательное выполнение анализа:

• трансфузиология, хирургия;
• акушерство-гинекология.

В этих разделах медицины выделяют следующие показания, при которых врач назначает исследование:

• планирование хирургического вмешательства или иных процедур, при которых может возникнуть потеря крови;
• наличие беременности, в этом случае тест обязателен как при совместимости, так и несовместимости матери и отца ребенка по резус-фактору и группе крови (это связано с тем, что при естественном родоразрешении или операции Кесарево сечение могут возникнуть осложнения, при которых потребуется переливание крови);
• рождение ребенка с положительным резус-фактором от матери, у которой он отсутствует, чтобы своевременно выявить риск гемолитической болезни и назначить лечение, исключающее склеивание эритроцитов;
• обязательное обследование доноров крови перед сбором биологической жидкости для переливания.

Несмотря на наличие обязательных показаний, пациент может обследоваться самостоятельно при желании. Например, если он хочет выявить собственную группу крови, резус-фактор и точное значение всех антигенных структур на поверхности эритроцитов.

Подготовка к анализу

Несмотря на отсутствие строгой подготовки к проведению лабораторного теста, врачи советуют придерживаться следующих рекомендаций:

• отсутствие употребления пищи за 8 часов до исследования, в кабинет медсестры приходят утром, натощак (можно пить лишь чистую, негазированную воду);
• за 2-3 дня не рекомендовано употреблять алкоголь (если кровь будет собираться для переливания, его распитие запрещено);
• отсутствие курения за несколько часов до теста, но желательно избегать его за 1 сутки;
• легкий ужин накануне теста, нежелательно употреблять тяжелую и жирную еду;
• отсутствие сильных психоэмоциональных переживаний, стрессов, тяжелой физической нагрузки за 1-2 дня;
• запрет употребления новых лекарственных средств, о которых не был предупрежден лечащий врач в момент назначения анализа.

С собой рекомендуется брать еду и сладкий напиток. Сразу после сбора биоматериала важно перекусить, чтобы избежать головокружения, потери сознания из-за голода или стресса на фоне сдачи крови.

Методика проведения анализа

Первая методика, которую используют для определения резус-фактора – это применение моноклональных антител. Для нее используют цельную венозную кровь, но лучше всего применять взвесь эритроцитов пациента. Процедура простая, выполняется в ней несколько этапов:

• нанесение моноклональных антител в лунку планшета (чаще всего это Цоликлон а-D);
• поверхностное нанесение взвеси эритроцитов;
• аккуратное перемешивание биологических жидкостей и выжидание нескольких минут.

О наличии резус-фактора свидетельствует появление агглютинатов в жидкости. Это небольшие хлопья белого цвета, выпадающие в осадок. Если же реактив окрашивается в розовый цвет, но хлопьев не образуется, это свидетельствует об отрицательном резус-факторе.

Более детальные сведения можно получить в случае использования гель фильтрации. Предварительно в глубокие пробирки наносят фильтрационный гель, который задерживает лишь эритроциты, содержащие антигены. Сверху добавляют взвесь эритроцитов, затем ожидают небольшой период времени. После его завершения судят о степени проникновения эритроцитов через гель и возможность их выпадения в осадок в глубине пробирки. Тогда можно выявить не только отрицательные или положительные результаты, но и степень накопления антигенов.

Расшифровка анализа

При проведении методики моноклональных антител выявляют наличие или отсутствие резус-фактора. Ель применяется гель фильтрация, результат может быть разным:

• отрицательный – выпадение осадка из эритроцитов на дне пробирки;
• очень слабоположительный – выпадение осадка и расположение остаточных эритроцитов в более высоком слое;
• слабоположительный – распространение эритроцитов во всей толщине геля;
• положительной – размещение эритроцитов верхнем слое геля, а также небольшая концентрация точечных элементов немного ниже;
• сильноположительный – отсутствие прохождения эритроцитов через гель, все они располагаются сверху.

Если антигены полностью отсутствуют, всегда есть риск образования иммунологической реакции при попадании малейших титров антигенов. Чем больше положительный результат, тем лучше для пациента, так как риск резус-конфликта или гемолитической болезни ниже.