Candida Albicans (ПЦР количественно)

Количественное молекулярно-биологическое исследование на Candida Albicans

Кандида является разновидностью дрожжевых грибков, одной из излюбленных локализаций которой являются половые пути. Грибок отлично размножается в среде, содержащей углеводы, поэтому часто становится своеобразным маркёром сахарного диабета.

Дрожжи в норме встречаются в половых путях и обычно обитают в комплексе с прочими полезными бактериями, не причиняя каких-либо неудобств. Candida Albicans является возбудителем половых инфекций, которые могут поражать ещё и полость рта, а так же кишечник. В умеренных концентрациях, кандида не приносит никакого вреда. Когда плотность возбудителя значительно превышает норму, возникает заболевание, известное, как молочница.

Клиническая картина

У женщин.  Грибы рода Candida albicans поражают преимущественно половые органы, выступая причиной развития вульвита или вульвовагинита. При данных патологиях отмечается:

• образование белого налета творожной консистенции на слизистой наружных половых органов;
• боль при мочеиспускании;
• дискомфорт при половом акте;
• отек и покраснение вульвы;
• зуд в области половых органов. 

У мужчин. Чаще всего кандидоз у мужчин сопровождается баланитом и поститом. Характерными проявлениями патологиями выступают:

• образование на головке полового члена творожистого белого налета;
• появление изъязвлений на слизистой наружных половых органов;
• зуд в области головки полового члена;
• боль и жжение при мочеиспускании и сексуальном контакте.

Факторы, провоцирующие рост Candida albicans

• Патологии эндокринной системы (нарушения работы щитовидной и паращитовидной желез, сахарный диабет).
• Прием лекарственных препаратов, оказывающих влияние на иммунитет и микрофлору (антибактериальные средства, иммуносупрессоры, кортикостероиды, контрацептивы).
• Иммунодефицитные состояния, имеющие физиологическую (беременность, лактация, менструация) или патологическую природу (трансплантация органов, онкология, трансплантация органов, лучевая терапия, химиотерапия).

ПЦР в диагностике молочницы

Количественным способом обнаружить этот дрожжевой грибок можно при помощи полимеразной цепной реакции. Суть метода достаточно проста. Из имеющегося биологического материала извлекают геном возбудителя, который подвергают обработке и многократному «клонированию», после чего подсчитывают число элементов ДНК или РНК, и делают вывод о наличии инфекции.

Основным материалом для исследования, как и при прочих генитальных патологиях, является соскоб из пораженной области.

Показания к проведению ПЦР на Candida Albicans

Основными показателями, способными натолкнуть врача на мысль о необходимости проведения ПЦР на кандиду, считаются некоторые состояния пациента.

1. Возникшие при лечении антибактериальными препаратами поражения кожи и слизистых оболочек.
2. Воспалительные заболевания полости рта острые и хронические.
3. Различного рода воспалительные процессы влагалища.
4. Случаи, когда имеется подозрение на наличие кандидозов любых локализаций.
5. Наличие симптомов кандидозного баланопастита, вульвовагинита и иных патологий, вызываемых грибами рода кандида.
6. Заболевания мочеполовой системы, имеющие хроническую форму.
7. Инфекции, передающиеся половым путем (в том числи и при ВИЧ-инфицировании).
8. Оценка эффективности лечения после прохождения противогрибковой терапии.
9. Профилактическое скрининговое обследование.

Подготовка к обследованию

Дрожжевые грибы довольно просто обнаруживаются в соскобе, поэтому какой-то особой подготовки для проведения исследования не требуется. Единственное, что для получения более точного результата, нужно соблюсти несколько правил:

1. Забор материала не проводится в дни менструаций и в течение 3 дней после у женщин.
2. За два дня до анализа необходимо воздержаться от сексуальной активности.
3. Перед исследованием недопустимо подмываться – гигиенические процедуры проводятся вечером накануне исследования.
4. Интравагинальные спринцовки до исследования запрещены.
5. За несколько дней до исследования стоит отменить прием антибиотиков и гормональных средств, а также использование вагинальных свечей, если таковые применялись.
6. Предупредите врача о принимаемых лекарствах, так как некоторые из них могут повлиять на результат анализа.
7. Рекомендуется не мочиться за 2 часа до анализа.

Особенности забора отделяемого слизистых оболочек для проведения исследования

У женщин. Забор биоматериала проводится на гинекологическом кресле. При помощи зеркала обнажается шейка матки, после чего проводится осмотр половых путей. Наружное отверстие уретры обрабатывается стерильным ватным тампоном. В уретру вводится специальная щеточка, при вращательном движении которой осуществляется соскоб отделяемого слизистых оболочек. Медицинский инструмент извлекается и отправляется в пробирку, где тщательно ополаскивается в транспортной среде, которой она заполнена и отжимается о стенки специализированного сосуда.

У мужчин. Наружное отверстие мочеиспускательного канала обрабатывается ватным тампоном. В уретру осторожным движением вводится стерильный зонд, погружаемый на глубину 2-3 см. Осуществляется вращательное движение металлическим инструментом, тем самым производится соскоб эпителиальной ткани. Зонд извлекается и помещается в специализированный сосуд (пробирку), заполненный транспортной средой, где споласкивается и отжимается.

Количественный анализ на концентрацию Candida albicans для оценки эффективности терапии

Количественное ПЦР исследование ДНК Candida albicans позволяет определить точную концентрацию ДНК дрожжевого грибка. Прохождение анализа является обязательным мероприятием до проведения терапии. Впоследствии это позволить оценить результативность лечебного воздействия, которая определяется путем сопоставления первоначальных и последующих итоговых значений. Повторный анализ на Candida albicans целесообразно проводить спустя 14 дней после завершения лечения. Снижение концентрации дрожжевого грибка свидетельствует об эффективности лечебной терапии, в то время как ее рост, напротив, указывает о безрезультативности лечебного воздействия. В таком случае врач корректирует схему лечения.

Что необходимо учитывать при исследовании Candida albicans в динамике

При проведении повторного анализа на концентрацию грибов рода кандида настоятельно не рекомендуется изменять медицинское учреждение, то есть проходить повторное исследование необходимо в том же месте, где и первоначальное. Это обусловлено тем, что в распоряжении лабораторных центров находится разная аппаратура и отличающиеся по степени чувствительности тест-системы. В этой связи объективно сопоставить результаты анализов, полученные путем различных методик исследования, не представляется возможным.

Расшифровка результатов

В случае получения ответа «не обнаружено» при проведении ПЦР, делается вывод о том, что возбудителя нет в исследуемом материале или его концентрация на столько мала, что тест не чувствителен к ней.

При получении ответа «обнаружено» нужно обратить внимание на титр. Содержание кандиды в концентрации 103 в миллилитре материала является допустимым и не требует проведения лечения. При концентрации кандиды более 103 говорит о наличии у больного кандидоза, который необходимо обязательно пролечить.

Не стоит забывать и о том, что бывают случаи, когда даже при допустимой концентрации возбудителя в биологическом материале, у человека имеются яркие клинические проявления. Такая ситуация не должна остаться без внимания. В подобных случаях кандиду нужно санировать и искать прочие возбудители инфекций, способные усилить клиническую картину.

Результаты анализа интерпретируются врачом.  Диагноз ставится на основе совокупности имеющихся данных, включающих в себя сведения из анамнеза, симптоматику патологии, жалобы пациента, информацию, полученную при проведении всех исследований и их комплексной оценке.

Что может повлиять на точность результатов?

Несмотря на то, что количественная ПЦР-диагностика определения ДНК Candida albicans является высокоточным методом исследования, не исключено получение ложноотрицательных итоговых значений. Недостоверность результатов анализа может быть обусловлена несоблюдением рекомендаций по подготовке к проведению тестирования или связана с нарушением техники сбора биологического материала, подлежащего исследованию. В большинстве, ложноотрицательные результаты наблюдаются при прохождении пациентом противогрибковой терапии, поскольку лекарственные средства данной группы снижают концентрацию Candida albicans в отделяемом слизистых оболочек.

Противопоказания и ограничения к проведению исследования

Количественный анализ на уровень грибов рода кандида не имеет абсолютных противопоказаний. При этом, в случае прохождения пациентом колоноскопии или интравагинального УЗИ тестирование проводится по прошествии как минимум 7 суток с даты проведения указанных инструментальных видов обследований.