Chlamydia psittaci, ПЦР (соскоб)

Chlamydia psittaci, определение ДНК (метод ПЦР)

Определение ДНК хламидий (Chlamydia psittaci) в соскобе с ВДП методом ПЦР – вид лабораторной диагностики, направленный на обнаружение бактерий, вызывающих орнитоз, передающийся от птиц. В процессе анализа оборудование выявляет даже малейшие фрагменты микроорганизма, поэтому диагноз устанавливается в точности. Болезнь можно обнаружить даже в тех случаях, когда она не проявляет никаких симптомов, а пациент является лишь носителем. Благодаря своевременно проведенному тесту можно избежать бронхита, пневмонии и даже осложнения виде летального исхода.

Характеристики исследования:

• Тип биоматериала: соскоб с ВДП
• Синонимы (rus): Бактерии рода хламидий, пситтакоз
• Синонимы (eng): Chlamydia psittaci, psittacosis
• Метод исследования: ПЦР

Для чего необходим  ПЦР анализ соскоба на Chlamydia psittaci

Заражение инфекцией Chlamydia psittaci происходит через респираторный тракт. Микроорганизм распространяется в полость носа и рта, глотку. Здесь происходит первичная реакция иммунитета. Для забора биоматериала используют отделяемое из верхних дыхательных путей, содержимое которого оценивают методом ПЦР. 

Анализ рекомендуют врачи для достижения следующих целей:

• дифференциальная диагностика между инфицированием Chlamydia psittaci с последующим развитием орнитоза и другими вирусными, бактериальными, грибковыми микроорганизмами, способными вызвать поражение верхних и нижних отделов дыхательных путей;
• выявление орнитоза даже в тех случаях, когда симптомы не проявляются, а человек является носителем (в этом случае анализ рекомендован людям, которые контактировали с зараженными пациентами или постоянно работают на предприятиях, где сосредоточены разные виды птиц);
• оценка качества назначенной терапии, если она прошла успешно, в исследовании будут обнаружены лишь малейшие фрагменты ДНК или РНК возбудителя, или он вовсе не будет найден;
• периодическое отслеживание состояния здоровья работников птицефабрик, зоопарков, ветеринарных центров.

Патогенным микроорганизмом можно заразиться от любых птиц, но чаще это голуби, утки, курицы, волнистые попугайчики. Бактерия концентрируется на перьях, в носовых ходах, помете. Она быстро распространяется в дыхательную систему человека после контакта. Заболевание опасно, в короткое время вызывает воспалительные процессы слизистой оболочки, что приводит к бронхиту или даже пневмонии. Чем раньше провести исследование, тем выше шанс полного излечения с отсутствием осложнений.

Если провести именно ПЦР исследование, можно в точности установить наличие инфекции, даже если на поверхности слизистой оболочки верхних отделов дыхательных путей обнаружены лишь ее малейшие фрагменты. Анализ назначает терапевт, инфекционист, который предположил диагноз на основании симптомов и частого контакта пациента с птицами.

Общее описание анализа

Для идентификации микроорганизма Chlamydia psittaci используют методику ПЦР. Это наиболее качественный анализ, при помощи которого можно обнаружить даже небольшие фрагменты инфекции. 

Он обладает следующими характеристиками:

• для проведения анализа используют любое количество биоматериала, даже в незначительном объеме можно выявить хламидию (в данном случае используют слизь на поверхности тканей верхних отделов дыхательных путей);
• анализ проводят посредством полуавтоматического оборудования, действия врача-лаборанта заключаются лишь во внесении биоматериала, а также программировании прибора, остальные этапы прибор осуществляет самостоятельно;
• аппарат может выявить не только наличие хламидий, но также их точную концентрацию, но в данном случае этого не требуется, достаточно лишь положительного или отрицательного результата, так как Chlamydia psittaci в норме не должна входить в состав условно-патогенной микрофлоры;
• ход исследования осуществляется в режиме реального времени, прибор выстраивает график, который может наблюдать врач, после этого на бланке распечатывается результат о наличии или отсутствии инфекции;
• результат приходит в течение суток, но при запросе экстренных данных бланк выдают уже через несколько часов;
• для получения достоверных сведений пациенты проходят предварительную подготовку;
• ПЦР-методика предоставляет максимально достоверные результаты, точность достигает практически до 100%;
• так как для забора биоматериала не требуется инвазивных процедур, достаточно провести соскоб с поверхности слизистой оболочки, анализ можно повторять многократно (например, для постановки диагноза, его проверки, выявления качества терапии).

В завершении анализа аппарат распечатывает бланк, в котором содержатся результаты. Его передают пациенту или врачу, который направлял запрос на исследование.

Когда назначают анализ

Для назначения анализа на обнаружение Chlamydia psittaci путем проведения ПЦР требуется наличие двух факторов:

1. Клиническая симптоматика, характерная для орнитоза. К ней относится продолжительный кашель, который не устраняется стандартными препаратами. У пациента повышается температура до субфебрильных значений, то есть 37-37,5°. При употреблении антибиотиков эффекта не возникает.
2. Частый контакт с птицами. Это люди, которые работают на птицефабриках, в ветеринарных центрах, зоопарках, зоомагазинах.

Анализ можно проходить как при наличии симптомов, так и при их отсутствии, для профилактических целей.

Подготовка к анализу

Перед назначением исследования лечащий врач предупреждает пациента о потребности предварительной подготовки:

• отсутствие употребления антибиотиков за неделю до исследования;
• отсутствие употребления любых новых лекарственных средств, о которых ранее не был предупрежден лечащий врач за 2 недели;
• отсутствие употребления местных антисептиков за 2 дня до сдачи теста;
• приход в лабораторию для сдачи биоматериала в утреннее время, перед этим допустимо обрабатывать рот кипяченой водой.

Так как биоматериал собирает медсестра, емкость для его хранения предоставляет лаборатория. Образец вместе с ватной палочкой устанавливают внутри, плотно закручивают крышку. На контейнере указывают данные пациента. Других подготовительных этапов не требуется, так как анализатор сможет выявить даже незначительные фрагменты микроорганизма.

Методика проведения ПЦР анализа Chlamydia psittaci

Собранный материал сразу же отправляют в лабораторию, чем раньше исследовать его, тем достовернее будут результаты. 

Тест проводят по последовательным этапам:

• врач-лаборант изготавливает реагенты для ПЦР аппарата, в которые добавляют флюоресцентную метку, требующуюся для взаимодействия с искомым генетическим материалом, характерным именно для Chlamydia psittaci;
• дополнительно применяют праймер с целью ограничения начала и конца амплифицируемого участка;
• смешивают реактив и праймер в лунках лабораторного планшета;
• добавляют образец слизистых выделений из верхних отделов дыхательных путей пациента, ожидая, пока частицы вступят во взаимосвязь, спровоцировав флюоресцентное свечение на микроскопическом уровне;
• включают ПЦР анализатор, который начинает сканировать содержимое;
• ожидают построение графика в режиме реального времени, который уже может анализировать врач-лаборант;
• ожидают оценки наличия или отсутствия генетического материала микроорганизма, после завершения работы аппарат распечатает эти данные.

Бланк лабораторного анализа передают пациенту. Самостоятельно он сможет понять наличие или отсутствие Chlamydia psittaci, вызывающей орнитоз. Но лечение должен назначать именно врач, так как он подберет оптимальный антибактериальный препарат, на который будет реагировать микроорганизм.

Расшифровка анализа

Расшифровкой данных лабораторного анализа занимается терапевт, инфекционист. Важно понять, есть ли в слизистом отделяемом верхних дыхательных путей бактерия, ее точная концентрация не важна. Поэтому результаты бывают двух видов:

1. Положительно. В слизистом отделяемом выявлена бактерия Chlamydia psittaci. Подобное поражение требует обязательного лечения, даже если клиническая симптоматика отсутствует. Носительство может быть опасно как для самого пациента, так и для окружающих людей.
2. Отрицательно. Бактерия не обнаружена, лечение не требуется. Если у пациента присутствуют симптомы инфекции, ищут другой возбудитель.

Возможно появление сомнительных результатов, если была проведена неправильная подготовка. В этом случае потребуется пересдача лабораторного анализа. При правильной подготовке и сборе биоматериала результат всегда точный и достоверный.