Цитология: микропрепарат костной ткани

Цитологическое исследование микропрепарата костной ткани

Практикующим специалистам-ортопедам в повседневной практике приходится иметь дело с неспецифическими (остеомиелитом) и специфическими (туберкулезом) воспалительными процессами в костной ткани, эозинофильной гранулемой и опухолями костной ткани, которые являются довольно распространенными онкологическими заболевания. Однако своевременное диагностирование и инновационные методики лечения рака костей способствуют уничтожению злокачественного очага. Отличительная особенность новообразований костной ткани в том, что она не имеет четких границ и может легко прорастать в близлежайшие ткани. Именно поэтому очень важно своевременно выявить нарушение морфологического строения патологических очагов.

Микропрепарат костной ткани позволяет оценить характеристику структуры клеточных элементов для установления происхождения опухолевидного и неопухолевого поражения.

Тип биоматериала: Образец костной ткани

Синонимы (rus): Метод изучения клеточного состава тканей

Синонимы (eng): Intraoperative cytological method

Методы исследования: Цитологическое исследование

Важность исследования

В костях могут развиваться различные заболевания, которые нарушают их структуру, приводят к хрупкости, вызывают осложнения как для опорно-двигательного аппарата, так и соседних органов. Поэтому важно своевременно проводить дифференциальную диагностику болезни, опираясь не только на симптомы, но и лабораторные тесты. С этой целью проводят цитологическое исследование микропрепарата костной ткани. Важно назначать именно его благодаря появлению следующих преимуществ для врача и пациента:

• определение наличия или отсутствия патологического очага в определенной области костей;
• дифференциальная диагностика между воспалительными процессами и злокачественными новообразованиями;
• определение точного вида злокачественного новообразования благодаря идентификации атипичных клеток;
• определение предрака или рака, что влияет на выбор тактики лечения (например, в первом случае достаточно консервативных методов, во втором – может потребоваться хирургическое вмешательство и химиотерапия);
• дифференциальная диагностика доброкачественного и злокачественного новообразования;
• оценка клеточного состава, в котором определяют соотношение остеобластов, остеоцитов и иных элементов;
• оценка лечения в процессе применение различных методик, а также после полного завершения терпи (при качественном эффекте объем атипичных клеток значительно уменьшается или полностью устраняется);
• оценка динамики развития заболевания, которое проходит последовательные стадии – острый, хронический период, ремиссия или выздоровление;
• отслеживание периода ремиссии у пациентов после завершения злокачественного процесса, если в биоматериале находят хотя бы небольшое количество атипичных клеток, повторно начинают терапию.

Назначение на исследование получают у терапевта, ортопеда, онколога или иного специалиста, который заподозрил отклонения. В случае обнаружения злокачественных клеток дальнейшее лечение подбирает онколог. Без прохождения цитологического анализа невозможно определить точный диагноз и назначить правильные методы терапии.

Когда делают анализ?

Проведение цитологического исследования микропрепарата костной ткани необходимо при:

• установлении истинного характера патологического процесса в костной ткани;
• оценивания распространенности опухоли в близлежащие ткани;
• дифференциальной диагностике первичных новообразований кости от вторичных.

Исследование требует проведения биопсии, это болезненная процедура, поэтому ее назначают лишь в крайних случаях, при наличии показаний:

• подозрение на одно из отклонений в структуре костной ткани – бактериальная или грибковая инфекция, аутоиммунный процесс, опухоль доброкачественного или злокачественного типа;
• оценка эффективности терапии, если другие исследования не дают точных результатов.

Чаще всего исследование используют именно при подозрении развития опухоли костей. Только с его помощью можно оценить наличие или отсутствие атипичных клеток, а также возможность развития доброкачественной опухоли.

Методика проведения анализа

Подготовка препарата

После завершения процедуры биопсии изъятый биоматериал наносят на 3-4 предметных стекла. Важно сделать несколько препаратов, так как один образец может не показать наличия патологического образования, хотя оно уже развивается в костях. Содержащиеся клетки быстро размножаются и подвергаются некрозу, поэтому их важно зафиксировать. Так как клетки в исходном виде не видимы и прозрачны, их невозможно увидеть под микроскопом. Поэтому цитологи проводят окрашивание стекол. Тогда каждый элемент приобретает красный, фиолетовый, розовый оттенок. Тщательное окрашивание содержимого позволит идентифицировать разновидность клеток и качество развития внутренних органоидов.

Действия проводят по следующим этапам:

• на препарат с отпечатком клеток капают спиртом, который фиксирует их в исходном состоянии, не дает видоизменяться и отмирать;
• распределяют стекла по рельсам, под которыми устанавливают емкости для сбора лишней жидкости;
• наносят выбранный краситель (его предварительно разводят до требующейся консистенции, так как в большинстве случаев его поставляют в концентрированном виде), который распределяют по всему предметному стеклу;
• ожидают 20 – 40 минут, чтобы красить проник во внутреннее содержимое каждой клетки и окрасил все элементы;
• смывают краску проточной водой, использовать дистиллированную воду или физраствор не требуется, так как воздействие посторонних элементов уже не сможет повлиять на образец.

Для надежной фиксации краски требуется дождаться, пока биоматериал просохнет. Для этого стекла достаточно оставить на рельсах под открытым воздухом. Использовать приборы с повышенной температурой или прямые солнечные лучи недопустимо.

Микроскопия

Окрашенные препараты доставляют в кабинет цитолога, где их микроскопируют по следующим этапам:

• устанавливают стекло на предметном столе под окулярами микроскопа, фиксируют держателем;
• настраивают окуляр с дальним изображением, который вплотную приближают к стеклу, затем начинают постепенно отводить назад до появления четкой картинки;
• оценивают общую структуру и расположение клеток, в норме костные ткани должны быть однородными, без посторонних включений;
• наносят на окрашенную часть каплю лабораторного масла, сверху устанавливают покровочное стекло;
• выбирают окуляр с максимальным приближением, настраивают его в том же порядке;
• оценивают состояние клеток во всех участках препарата, так как при наличии злокачественного процесса на ранних стадиях может содержаться небольшое количество атипичных клеток.

В перечисленном порядке рассматривают содержимое каждого стекла. Все выявленные данные заносят в лабораторный бланк. Дополнительно указывают любые выявленные отклонения. Если нарушена морфология клеток, выявляют точное строение мембраны, ядра, органелл, объема цитоплазмы. Выявляют небольшое количество или обширное распространение атипичных клеток при их наличии.

После завершения микроскопии стекла не выбрасывают, особенно если в них выявлены участки патологии. Их сохраняют до следующего исследования, чтобы сравнивать с новыми данными. Так цитолог сможет отследить динамику развития болезни.

Расшифровка анализа