Цитологическое исследование пузырной жидкости на эозинофилы

Цитологическое исследование проводится для диагностирования и клинического разграничения воспалительно-аллергических (ангиитов) и буллезного (аутоиммунной пузырчатки) дерматозов.

Характеристики исследования:

Тип биоматериала: Пузырная жидкость на эозинофилы
Синонимы (rus): Мазок на эозинофилы отделяемого слизистых оболочек
Синонимы (eng): Eosinophil smear for the diagnosis of allergic and non-allergic diseases
Методы исследования: Цитологическое исследование

Эозинофилы представляют собой клетки нейтрофильного ряда, основная функция которых заключается в участии в тканевых реакциях. Реагируя на влияние хемотаксических белков, они быстро направляются в патологический очаг и наводят в нем порядок:

захватывают гистамин – биологически активное вещество, участвующее в развитии аллергической реакции;
фагоцитируют иммунные комплексы, производимые иммуноглобулинами изотипа Е;
уничтожают «захваченные» ими чужие клеточные структуры;
продуцируют профермент плазмина (играющего важную роль в фибринолизе) и ангиостатина (подавляющего рост сосудов).

В последние годы большое распространение имеют ангииты (или васкулиты) кожи – дерматозы, развивающиеся при воспалении сосудистых стенок. Практикующие специалисты насчитывают около 50 форм этого недуга, его этиологические причины до настоящего времени не установлены. Предполагают, что васкулиты кожных покровов развиваются в результате повреждающего воздействия на стенки кровеносных сосудов иммунных комплексов.

Буллезный дерматоз развивается в результате возникновения аутоиммунных антител к чужеродным патогенам межклеточного вещества, который связывает слои эпителия. Это явление провоцирует потерю связи между кератиноцитами (основными клетками эпидермиса) и образование внутри-эпидермальных пузырей.

Важность исследования

Выделяют большое разнообразие заболеваний, которые приводят к образованию участков воспаления и пузырьков на коже. Внутри появляется экссудат с клетками. При помощи цитологического исследования пузырной жидкости на эозинофилы врач-лаборант сможет идентифицировать разные типы дерматозов, что поможет с точностью установить диагноз и начать своевременную терапию.

После проведения теста у врача и пациента появляются следующие преимущества:

дифференциальная диагностика дерматоза с другими патологиями, проявляющимися схожей симптоматикой;
своевременное выявление патологии до развития осложнений;
подбор терапии, которая поможет полностью восстановить состояние кожных покровов;
оценка динамики развития заболевания, которое может проходить разные стадии – начало, острый и хронический период, выздоровление;
отслеживание состояния кожи и слизистых оболочек пациентов, у которых наблюдается периодическое обострение дерматоза с целью своевременного выявления повторного развития болезни;
оценка качества методов терапии (местные средства, физиопроцедуры) в процессе их применения или после полного завершения курса.

Без исследования невозможно с точностью выявить содержимое жидкости внутри пузырьков. Обнаружение эозинофилов свидетельствует о воспалении, которое чаще всего формируется под влиянием различных аллергенов или аутоимунных комплексов. Эти образования цитолог просматривает под микроскопом. Также в его деятельность входит оценка морфологической структуры найденных иммунных клеток, которые он описывает на бланке исследования.

Когда делают анализ?

Проведение цитологического исследования необходимо при наличии у пациента:

отягощенного аллерго-анамнеза;
пузырчатых высыпаний с серозным содержимым на кожных покровах туловища, конечностей, волосистой части головы и слизистых оболочках ротовой полости, носоглотки, вокруг естественных отверстий;
увеличении секреции слюнных желез.

Подготовка пациента

Перед забором биоматериала важно пройти этапы подготовки, чтобы результаты теста получились достоверными.

Необходимо придерживаются следующих рекомендаций:

отсутствие употребления антибиотиков, гормонов, антигистаминных, иных лекарственных средств, которые могут повлиять на результаты анализа (за 2 недели до теста);
отсутствие нанесения местных препаратов на пузырьки, так как действующие вещества могут проникнуть в экссудат, изменив его состав;
сохранение пузырьков в целостности, отсутствие повреждения кожи, чтобы сохранить экссудат для его забора медсестрой.

Лучше всего пройти исследование для определения диагноза до назначения любых методов терапии. Тогда лекарства не смогут повлиять на полученные данные.

Методика проведения анализа

Взятие биологического материала для цитологических исследований проводится в условиях клинико-диагностического центра квалифицированным специалистом. Мазок пузырной жидкости готовится на предметном стекле с соблюдением таких условий, чтобы его края имели вид следа от тонкой щетки. Это позволит:

равномерно распределить клеточные элементы;
хорошо просмотреть все участки образца биоматериала;
исключить наличие «толстых» участков, которые содержат трудно просматриваемые под микроскопом скопления клеток.

Полученные образцы маркируют и в ближайший срок после их взятия вместе с направлением доставляют в лабораторию для микроскопического исследования.

Окрашивание препарата

Как только клеточные элементы были распределены по предметному стеклу, его сразу отправляют в лабораторию для окрашивания и дальнейшей микроскопии. Приготовление препарата осуществляют по этапам:

мгновенное нанесение спирта, чтобы не допустить деления или некроза клеток, сохранить их в первозданном виде;
распределение стекол по рельсам, которые устанавливают над емкостью, чтобы туда стекала лишняя жидкость;
нанесение красителя по всей области предметного стекла, его оставляют на 20-40 минут в зависимости от выбранной методики окрашивания;
смывание красителя по истечению времени, для этого достаточно использовать обычную проточную воду, так как посторонние вещества и бактерии больше не повлияют на препарат (его содержимое зафиксировано).

Далее стекла отправляют на микроскопию к врачу цитологу, который тщательно изучает содержимое.

Микроскопия

Цитолог приступает к исследованию окрашенных препаратов после получения. Микроскопию проводят по этапам:

установка окрашенного стекла под микроскопом, фиксация специальным держателем для предотвращения сдвигов при исследовании;
нанесение капли лабораторного масла по центру окрашенного фрагмента;
установка покровочного стекла;
использование окуляра с дальним просмотром, чтобы оценить общую структуру и расположение клеток;
применение окуляра с максимальным приближением, при помощи которого тщательно изучают морфологию клеток, оценивая ядро, органеллы, мембрану иммунных клеток или комплексов.

Если изучать содержимое при помощи обычного окуляра, невозможно с точностью рассмотреть морфологию клеток. Поэтому в этих целях применяют масло, которое многократно увеличивает изображение в микроскопе.

Цитолог заносит в лабораторный бланк информацию о наличии или отсутствии эозинофилов, их количестве, нормальной или измененной структуре, содержании иммунных комплексов. Исследование считается полуколичественным, так как врач подсчитывает количество иммунных клеток, но с точностью определить их невозможно.

Особенности анализа

Цитологическое исследование пузырной жидкости на эозинофилы характеризуется следующими особенностями:

самостоятельно забор биоматериала проводить невозможно, этим занимается медсестра, сохраняя условия стерильности;
отпечаток клеток на предметном стекле делают мгновенно, чтобы не допустить попадания посторонних бактерий и веществ;
для исследования рекомендовано делать не один препарат, а сразу 2-3, чтобы рассмотреть как можно больше объема биоматериала;
после завершения диагностики стекла сохраняют, чтобы сравнивать с результатами повторного анализа, отслеживать динамику развития заболевания;
все этапы исследования проводят вручную, автоматические анализаторы не применяют;
благодаря исследованию цитолог сможет определить количество, морфологию и другие особенности эозинофилов, что поможет в постановке диагноза, дифференциальную диагностику можно определить только в комплексе с данными от других лабораторно-инструментальных тестов;
расшифровкой занимается только лечащий врач (терапевт, дерматолог, педиатр), так как он учитывает одновременно информацию от цитологического исследования, анамнеза, выявленных симптомов, жалоб пациента и других сведений.

В процессе диагностики цитолог изучает не какие-либо отдельные фрагменты окрашенного биоматериала, а весь образец в комплексе. Так он не пропустит ни одной иммунной клетки, а также отклонение от нормы.

Расшифровка анализа

В норме количество эозинофилов в составе пузырной жидкости не должно превышать 5%. Увеличение их количества наблюдается при наличии у пациента различных типов дерматозов.

Заключение цитологического исследования содержит информацию об особенностях изменения ядра эозинофила и его цитоплазмы, образованиях клеточных комплексов.

Цитология: пузырная жидкость на эозинофилы