Иммунохроматографическое экспресс-исследование кала на токсины A и B клостридий (Clostridium difficile)

Кошурин Дмитрий Валерьевич
Кошурин Дмитрий Валерьевич Врач КДЛ, Главный врач,

Исследование на токсин А и В Clostridium difficile

Иммунохроматографический экспресс-тест кала на Clostridium difficile – метод лабораторного исследования, проводимый с целью диагностики антибиотикоассоциированной диареи.

Клостридиум диффициле входит в состав нормальной микрофлоры кишечника. У взрослых людей количество данной бактерии находится на уровне 0,01%, в то время как у новорожденных оно достигает 15%. Однако при проведении терапии на основе антибиотиков концентрация клостридий может увеличиться до 40%, что вызывает появление ряда патологических симптомов. Проводимое иммунохроматографическим методом экспресс-исследование кала необходимо для диагностики антибиотик-ассоциированного колита, установление природы диарейного синдрома у пациентов всех возрастных категорий.

Clostridium difficile: определение и общая информация

Clostridium difficile: Иммунохроматографическое экспресс-исследование кала на токсины A и B клостридийClostridium difficile представляет собой анаэробную, спорообразующую, грамположительную бактерию, вызывающую псевдомембранозный колит и инфекционную диарею. Инфицированию подвержены преимущественно лица старше 65 летнего возраста, проходящие лечение в условиях стационара и проходящие курс антибактериальной терапии. У данной категории пациентов снижение иммунитета к клостридиям вызвано возрастными особенностями, сопутствующими болезнями и изменением микрофлоры кишечника, вызванной воздействием медикаментов.   Патологический процесс может развиться после приема любых антибиотиков, но чаще всего его возникновение связывают с ампициллином, клиндамицином, цефалоспоринами. В некоторых случаях достаточно однократного приема лекарственного средства.

Антибиотикоассоциированная диарея рассматривается как преимущественно внутрибольничная инфекция. Длительное пребывание пациента в условиях стационара, в особенности при частом контакте с носителями Clostridium difficile, выступает дополнительным фактором риска.

Выделяют токсигенные и нетоксичные штаммы клостридий. Первые и являются причиной развития заболевания. Патогенность Clostridium difficile зависит от наличия токсинов А и/или В, которые вызывают гибель клеток кишечника, провоцируют течение воспалительной реакции, вызывает диарейный синдром и псевдомембранозный колит. В составе всех токсигенных штаммов отмечается токсин В, в то время как токсин А может как присутствовать, так и отсутствовать.

Клиническая картина псевдомембранозного колита включает в себя диарею (в каловых массах могут присутствовать примеси крови или слизи), болевые ощущения в брюшной полости, подъем температуры тела до 40 градусов. По результатам общего анализа крови устанавливается высокое содержание лейкоцитов.

Особенностью патологического процесса являются его частые рецидивы, которые отмечаются в 25% случаев. После проведенного лечения и наступления полного выздоровления пациента, по прошествии примерно недели вновь возникают идентичные исходным проявления заболевания. Это обусловлено присутствием в кишечнике спор Clostridium difficile.

Показания для анализа

Проведение экспресс-исследование кала на Clostridium difficile показано в следующих случаях:

  • Диарея: симптомы клостридииразвитие диареи на фоне приема антибиотиков у пациентов, находящихся на стационарном лечении;
  • диагностика причин диареи у пациентов, получающих амбулаторное лечение, развившейся в течение двух месяцев после прохождения курса терапии на основе антибиотиков;
  • диагностика псевдомембранозного колита пациентов, входящих в группу повышенного риска (длительный период госпитализации, возраст более 65 лет, онкологические больные, лица, страдающие воспалительными патологиями толстой кишки, почечной недостаточностью, пациенты после недавно перенесенных оперативных вмешательств или химиотерапии);
  • дифференциальная диагностика болезней, характерными клиническими проявлениями которых выступает диарея, лихорадочный синдром, абдоминальные боли, рвота, тошнота, судороги;
  • скрининговые обследования для выявления природы диареи в отсутствии причини инфекционного или неинфекционного характера.

Подготовка к анализу

Проводить анализ на антигены бактерий в кале рекомендуется сразу после появления патологических симптомов. При подготовке к анализу необходимо учитывать, что за трое суток до забора биологического материала требуется исключить:

  • употребление алкоголя;
  • прием препаратов слабительного действия;
  • прием лекарственных средств, оказывающих влияние на перистальтику кишечника;
  • прием медикаментов, способных изменить окрас кала (висмут, железо, сернокислый барий);
  • ректальное введение свечей, масел.

Для сбора биоматериала необходимо приобрести в аптеке специальный контейнер, оснащенный фиксированной к крышке ложечкой. Емкость является абсолютно стерильной, в связи с чем не нужно ее мыть или дезинфицировать. При сборе кала следует следовать следующим рекомендациям:

  • не дотрагиваться руками нижней части ложки, встроенной в контейнер;
  • перед сбором кала провести гигиенические процедуры без применения антибактериальных, ароматизированных средств;
  • предварительно помочившись, на дно судна или унитаза следует положить пластиковую одноразовую посуду и затем произвести акт дефекации;
  • сбор кала производится специальной, вмонтированной в крышку контейнера, ложкой, при этом собирать кал нужно из разных мест каловой массы;
  • не допустимо попадание в контейнер примесей мочи, крови, фрагментов непереваренной пищи;
  • контейнер заполняется биоматериалом на треть его объема.

Не рекомендуется проводить экспресс-тест кала женщинам в дни менструации.

Метод исследования

Иммунохроматографический экспресс-тест кала на Clostridium difficileСобранный биологический материал – образец кала, пациенту необходимо доставить в лабораторию в максимально короткие сроки. Исследование кала проводится иммунохроматографическим методом, чувствительность которого находится в пределах 75-95%, а специфичность составляет 83-98%. Получение недостоверных результатов может быть вызвано:

  • нарушением правил по подготовки к сбору биоматериала;
  • нарушением методики сбора образца кала;
  • нарушением условий или сроков хранения биологического материала.

Расшифровка результатов

Результаты экспресс-тестирования выдаются в качественном формате. Положительный результат, выдаваемый в случае обнаружения в исследуемом образце биологического материала токсинов А и/или В к Clostridium difficile указывает на инфицирование обследуемого или носительство. В случае загрязнения пробы примесями крови велика вероятность получения ложноположительного результата. Положительные итоговые значения не исключают наличия иных патогенных микроорганизмов в микрофлоре кишечника.

Отрицательный результат анализа не во всех случаях указывает на отсутствие заражения Clostridium difficile. Он может быть вызван также прерывистым процессом выделения токсинов или же тем, что их уровень слишком низок и находится вне пределов детекции. При подозрении на протекание инфекционного процессов рекомендуется проведение дополнительного тестирования, объектом исследования в котором будет выступать новая проба.

Полученные результаты экспресс-исследования кала должны расшифровываться с учетом состояния пациента, предъявляемых им жалоб, общей клинической картины и иных методов лабораторной или инструментальной диагностики.

Важные дополнения

Экспресс-тестирование кала на токсины Clostridium difficileЭкспресс-тестирование кала на токсины Clostridium difficile не проводится в отношении детей, возраст которых не превышает 1 года. Это связано с высокой вероятностью получения ложноположительных результатов, что делает исследование неинформативным и лишенным лабораторной диагностической ценности.

Анализ кала не целесообразно также проводить с целью мониторинга терапии и оценки ее эффективности. Данный факт объясняется тем, что даже после полного клинического выздоровления в кале пациентов еще на протяжении длительного периода времени может обнаруживаться Clostridium difficile.

По прошествии недели с момента инфицирования концентрация токсинов А и В Clostridium difficile в кале существенно снижается. В этой связи для получения достоверного результата образцы кала необходимо собрать не позднее, чем в течении 7 дней после появления характерных проявлений патологии.