Антигенный латексный тест на Норовирус

Антигенный латексный тест на Норовирус (Norovirus) – это лабораторное исследование кала, проводимое с целью диагностики диареи, вызванной вирусным возбудителем заболевания.

Норовирус (Norwalk virus) относится к семейству РНК-содержащих вирусов Caliciviridae. После инфицирования микроорганизм локализуется на стенках кишечника, проникает в его клетки, нарушает адсорбцию жидкости и функционирование желудочно-кишечного тракта. Механизм действия вируса не изучен, но установлено, что благодаря структуре капсида, он избегает атаки иммунных клеток организма. Выявлено 5 генетических групп и 31 подгруппа норовируса. Контагиозность (количество частиц, способное привести к инфицированию) – до 10. Наибольшая активность вируса прослеживается в осенне-зимне-весенний период.

Характеристики исследования:

Тип биоматериала: кал
Синонимы (rus): антиген норовируса
Синонимы (eng): Norovirus Ag
Методы исследования: иммуномикробиологический анализ
Сроки выполнения: 1 день

Микроорганизм продолжительное время (28 суток) устойчив во внешней среде, сохраняет жизнеспособность при замораживании, высыхании, воздействии температур до 60 °С и спиртосодержащих моющих средств. Инактивировать вирус могут дезинфицирующие средства, содержащие хлор.

Пути передачи и симптомы норовирусной инфекции

Наиболее распространенным способом передачи вируса является контактно-бытовой. Возможно инфицирование через воду или пищу (особенно морепродукты) и респираторно. Источниками норовируса могут быть как больные люди, так и носители, поскольку после терапии и исчезновения симптомов заболевания, частицы возбудителя выводятся из организма еще на протяжении 1 – 2 месяцев. Известно, что восприимчивость организма к вирусу зависит от группы крови, наиболее чувствительны люди с группой О.

Период инкубации может длиться от 10 до 48 часов. Заболевание сопровождается болями в брюшной полости, рвотой (чаще у детей) и /или диареей (наблюдается у взрослых). Также наблюдается общая слабость, небольшое повышение температуры тела, бледность кожных покровов, сонливость. Длительность заболевания – до 60 часов. Поскольку вирус вызывает нарушение всасывания жидкости, если своевременно не принять меры по борьбе с обезвоживанием, возможен летальный исход.

Наибольшей опасности заражения норовирусом подвержены люди с низким иммунитетом и престарелого возраста, дети. Достаточно быстро инфекция распространяется в каких-либо коллективах или на ограниченном пространстве (детских садах, общежитиях, в рабочих кабинетах). Выработанный постинфекционный иммунитет сохраняется непродолжительно, поэтому через некоторое время возможно повторное заражение.

Важность анализа

При заражении норовирусом появляется кишечная инфекция. У пациента наблюдается сильная диарея, повышение температуры тела. Все это приводит к выведению обильного количества жидкости из организма, развитию обезвоживания. Состояние чревато неврологическими расстройствами, у детей могут появиться судороги, серьезное повреждение нервных клеток головного мозга. Именно поэтому важно провести определение антигенов норовируса в образцах фекалий сразу после появления первых симптомов патологии.

Это предоставит врачу и пациенту ряд преимуществ:

быстрое обнаружение точной причины проявляющихся симптомов, так как анализ выполняют в течение одного дня;
дифференциальная диагностика с другими вирусами и бактериями, способными вызвать кишечную инфекцию;
назначение правильных методов терапии с отсутствием приема недействующих препаратов, которые могут вызвать побочные реакции;
предотвращение осложнений;
оценка качества проведенного лечения, тест поможет выявить даже малейшее количество вируса при рецидиве, если назначенных препаратов было недостаточно.

Чем раньше провести исследование, тем выше шанс на полное выздоровление с отсутствием риска осложнений для ЖКТ, нервной, сердечно-сосудистой системы. Важно помнить, что после исследования требуется проводить не только патогенетическую терапию противовирусными средствами, но также и симптоматическое лечение. В основном оно направлено на устранение обезвоживания.

Показания к сдаче антигенного теста на норовирус

Большинство вирусных кишечных инфекций схожи между собой по симптоматике. Определение антигенов норовирусов в образцах фекалий рекомендуется выполнять при появлении следующих признаков:

общие симптомы недомогания – повышение температуры тела, миалгия, озноб, слабость, артралгия;
першение в горле, кашель, ринит;
тошнота, ухудшение аппетита, рвота, боль в животе в области пупка;
изменение характера стула – жидкий, слизистый, частый;
обезвоживание – сухость во рту, постоянная жажда, уменьшение тургора кожи, сухость слизистых оболочек, уменьшение объема выделенной мочи.

Если своевременное лечение отсутствует или оно было проведено неправильно, появляются осложнения. К ним относят судороги, потерю сознания. Важно пройти анализ до появления этих отклонений, чтобы провести своевременное лечение, предотвратить резкое ухудшение самочувствия. Особенно важно назначить исследование для детей, так как обезвоживание в их организме может вызвать необратимые изменения центральной и периферической нервной системы.

Подготовка, сбор, хранение и транспортировка биоматериала

Для получения точных, достоверных данных требуется правильно подготовиться к тесту. Врач предупреждает о следующих правилах:

за 7-10 дней не употребляют антибактериальные, противовирусные, фунгицидные средства;
покупают стерильный контейнер из аптеки с крышкой, так как посторонние емкости использовать нельзя из-за риска проникновения посторонних бактерий и вирусов в образец.

Как только этапы подготовки пройдены, приступают к сбору образца фекалий по правилам:

в стерильный контейнер собирают свежий образец фекалий;
если в кале присутствуют частицы крови, гноя и слизи, обязательно размещают их в контейнер;
плотно закручивают крышкой, чтобы внутрь не просачивались посторонние микроорганизмы и вещества.

Собранный биоматериал хранят по правилам:

максимальный период хранения составляет не более 2 часов;
если образец не доставляют в лабораторию сразу же, его оставляют на дверце холодильника при температуре 4-5° (замораживание не допустимо);
недопустимо распространение прямых солнечных лучей на образец, это вызовет размножение содержащихся микроорганизмов, процессы гниения.

После сбора биоматериал рекомендовано сразу же транспортировать в лабораторию. Во время его перемещения температура окружающей среды не должна превышать 22-23°. Контейнер устанавливают в затемненном месте при отсутствии попадания солнечных лучей.

Ход анализа

Как только лаборатория приняла образец фекалий, сразу же приступают к его анализу.

Действия проводят по этапам:

Подготовка. На столе устанавливают лабораторный планшет с лунками. Подготавливают контрольный образец. Обычно с этой целью используют культуру бактерий, смешанную с гомологичным латексным диагностикумом. После смешивания он становится положительным, с ним можно сравнить данные от анализа пациента.
Добавление в пустую лунку латексной суспензии, которая используется в качестве антитела, связывающегося с норовирусом при его наличии.
Добавление образца биоматериала пациента, который смешивают с латексной суспензией. Рекомендовано тщательное перемешивание под разными углами при помощи стеклянной палочки. Так комплексы антиген-антитело сформируются быстрее.
Ожидание результатов. На это может уйти 2-3 минуты, пока антитела и антигены не будут взаимодействовать. Если внутри образца фекалий содержится норовирус, возникнет взаимосвязь, из-за чего проявится агглютинация. На темном фоне появятся мелкие белые точки или хлопья. Если же результат будет отрицательным, никаких изменений не возникнет, фон под образцом лабораторного анализа останется темным.

На наличие норовируса указывает появление агглютината именно через 2-3 минуты. Если же он образовался спустя 7-10 минут, реакция неспецифична. То есть внутри могут содержаться какие-либо антигены, но это не обязательно норовирус. Внутри будут присутствовать вирусы, относящиеся к другим разновидностям.

Тест считается полуколичественным, так как по объему образовавшегося осадка можно судить о степени размножения вирусных частиц. Если их немного, значит, заражение только произошло или микроорганизм уже стал уничтожаться. В случае острой стадии инфекции и обильного размножения норовируса будет появляться большое количество белых точек, которые начнут сливаться между собой.

Методика латексного теста на норовирус

Основным реагентом, используемым при тестировании, является полистирольная латексная суспензия. Частицы латекса по структуре напоминают эритроциты и выступают в роли носителей антител. Если в исследуемом образце присутствуют антигены норовируса появляются иммунные агрегаты, которые благодаря реакции агглютинации можно увидеть невооруженным глазом. Латексный тест относится к полуколичественным методам.

Интерпретация результатов

Положительный результат свидетельствует о заражении вирусом. Но в любом случае окончательный диагноз ставит врач на основе комплекса анализов.

Тест на Норовирус

Кошурин Дмитрий Валерьевич