Определение амплификации гена HER2 методом хромогенной гибридизации in situ (CISH)

Кошурин Дмитрий Валерьевич
Кошурин Дмитрий Валерьевич Врач КДЛ, Главный врач,

Анализ амплификации гена HER2

Анализ амплификации гена HER2Молекулярно-биологическое исследование образца опухолевой ткани, которое выполнено методом CISH (хромогенной гибридизации in situ) и позволяет определить амплификацию гена HER2, проводится для оценивания вероятности развития злокачественной патологии.

Ген HER2 кодирует синтез мембранного белка, который является вторым рецептором фактора роста эпидермиса. В здоровых тканях он передает сигналы регуляции процессов дифференцировки клеток. При усилении экспрессии гена HER-2 либо амплификации (многократном увеличении числа его копий в геноме отдельных клеток) происходит их злокачественная трансформация.

Гиперэкспрессия HER2 наблюдается при злокачественной опухоли железистой ткани грудной железы – избыточная концентрация кодируемого им белка указывает на высоко-агрессивную форму онкопатологии. Открытие этого явления потребовало от практикующих специалистов поиска новых подходов к лечению рака молочной железы, отличающимся метастатическим потенциалом и неблагоприятным прогнозом. 

На сегодняшний день было установлено, что у каждой пятой пациентки опухоль груди является HER-2-положительной. Для определения HER2-статуса используется инновационная лабораторная методика – хромогенная in situ гибридизация, основанная на обнаружении меченных фрагментов ДНК с помощью иммуно-пероксидазной реакции.

Когда делают анализ амплификации гена HER2?

Молекулярно-генетический анализ амплификации гена HER2  проводят при:

  • оценивании HER2-позитивного статуса пациента;
  • выборе адекватной тактики лечения злокачественной патологии;
  • определении целесообразности применения таргетных и гормональных препаратов.

Как подготовиться к анализу?

Биоматериал для исследования – образец опухолевой ткани (свежезамороженный либо запаянный в парафиновый блок). Подготовительные мероприятия к его отбору определяет лечащий врач. 

Для составления грамотного заключения необходимо предоставить иммуно-гистохимический и гистологический протоколы. 

Расшифровка анализа амплификации гена HER2

Микроскопический анализВ основе метода хромогенной гибридизации лежит пероксидазное окрашивание, позволяющее под световым микроскопом изучить морфологическую структуру опухолевой ткани и определить наличие либо отсутствие амплификации гена HER2. Срезы тканевых образцов с проведенным на них анализом могут храниться при комнатной температуре в обычных условиях в течении длительного времени.

При оценивании итоговых данных методом CISH (хромогенной гибридизации in situ)  учитывают:

  • расположение хромогенных меток – при обнаружении их количества от 6 до 10 в 50% клетках, подсчитывают 30 опухолевых клеток;
  • среднее количество точечных меток, крупных кластеров и сигналов от датчика HER-2 – при выявлении среднего значения метки от 5 до 6 в 30-ти клетках, дополнительно подсчитывают 30 клеток и оценивают все 60.

Результаты молекулярно-биологического исследования интерпретируются в комплексе с данными инструментального обследования и дополнительных лабораторных тестов.