Вирус гепатита А, РНК, ПЦР (плазма)

ПЦР анализ РНК вируса гепатита А в сыворотке крови

Определение РНК вируса гепатита A (Hepatitis A virus) в крови методом ПЦР представляет собой информативный способ лабораторного исследования, который проводится для раннего обнаружения инфицирования вирусным гепатитом А. Генетический материал вируса гепатита А появляется в крови задолго до возникновения характерного для данной патологии симптомокомплекса. Это в свою очередь обеспечивает возможность своевременного проведения лечебных мероприятий и не допущение развития осложнений. Кроме того, анализ позволяет провести дифференциальную диагностику гепатитов и желтух.

Характеристики исследования:

• Тип биоматериала: венозная кровь
• Синонимы (rus): определение РНК вируса болезни Боткина
• Синонимы (eng): Hepatitis A Virus, RNA
• Метод исследования: полимеразная цепная реакция

Гепатит А, являясь наиболее распространенным типом вирусного гепатита, представляет собой инфекционное заболевание, возбудителем которого выступает специфический РНК-содержащий энтеровирус – HAV.  Вирус характеризуется устойчивостью во внешней среде – его стремительная гибель наступает вследствие термообработки и кипячения, в то время как при замораживании, воздействии кислот или хлора HAV сохраняет свою жизнеспособность. В условиях комнатной температуры вирус гепатита А может существовать на протяжении нескольких недель, при +4 – до нескольких месяцев, а при температуре -20 – в течении нескольких лет.

Источником инфекции выступает больной, инфицированный человек. Распространение вируса происходит посредством фекально-орального пути (чаще всего, через зараженную воду, пищевые продукты, соприкосновения с поверхностями, контаминированными вирусом, через немытые руки). Пик заболевания приходится на летний и осенний периоды времени.

Продолжительность инкубационного периода может варьировать от 2-х недель до 50 суток, в среднем же она составляет порядка 4-х недель. Вирусный гепатит А сначала, как правило, сопровождается общей слабостью, недомоганием, головной болью, подъемом температуры, расстройством пищеварения. Ввиду указанной симптоматики, зачастую на данном этапе гепатит А ошибочно воспринимается за кишечную инфекцию или ОРВИ. По прошествии некоторого времени (от 2-х до 10-ти суток) наблюдается желтуха, по результатам лабораторных исследований отмечаются изменения показателей функций печени, происходит увеличение данного органа и снижение температуры тела. В так называемый желтушный период больные жалуются на снижение аппетита, тошноту, изменение цвета мочи (потемнение) и кала (осветление), ощущение тяжести в области правого подреберья.

Средняя продолжительность заболевания составляет 2-3 недели, при этом процесс полного восстановления организма может доходить до полугода.

В некоторых случаях отмечается бессимптомное течение гепатита А, в том числе отсутствие желтушного периода. Исход заболевания расценивается как благоприятный, развитие осложнений происходит крайне редко. Носительство вируса, а также переход заболевания в хроническую форму не характерны для гепатита А.

Исследование крови посредством метода ПЦР позволяет обнаружить в организме РНК вируса гепатита А по прошествии 2-х недель после заражения, примерно за 14 дней до появления первых клинических симптомов и на протяжении первых трех недель острой фазы болезни. Генетический материал вируса появляется в крови ранее чем антитела IgM класса, что позволяет на начальном этапе начать терапию и исключить распространение инфекции.

Когда назначают ПЦР анализ на вирус гепатита A

Проведение исследования на определение в крови РНК вируса гепатита А могут назначать квалифицированные педиатры, терапевты, врачи-инфекционисты, гастроэнтерологи и гепатологи. Анализ назначают в следующих случаях: 

• при наличии клинической картины, типичной для вирусного гепатита А; 
• при выявленных отклонениях по результатам лабораторного исследования функции печени;
• при контакте или подозрении на возможный контакт обследуемого с пациентом, страдающим гепатитом А;
• при обследовании населения при вспышках инфекции.

Подготовка к анализу

Пациент в преддверии проведения анализа получает от врача важные рекомендации относительно подготовки к исследованию, которые обеспечивают достоверность результата и являются обязательными к соблюдению. Так за несколько дней до лабораторной диагностики следует:

• не допускать пищевых перегрузов, не употреблять жареную пищу и жирные продукты;
• воздержаться от употребления алкогольных напитков;
• контролировать эмоциональный фон, избегать стресса, всплесков эмоций;
• минимизировать физическую активность, отказаться от тяжелых физических нагрузок (в т.ч. не ходить в спортзал, не выполнять подъем тяжестей);
• не употреблять лекарственные препараты, в особенности антибиотики (с момента последнего приема антибактериальных средств должно пройти не меньше 2-х недель);
• не проходить УЗИ, рентген-диагностику, физиолечение или массаж (после данных манипуляций до исследования должно проходить не менее 5 дней).

Для проведения процедуры забора крови обследуемый должен прийти в медицинское учреждение в утреннее время, наиболее оптимально – в промежутке между 8 и 11 часами.  Явка должна осуществляться только натощак. Между забором крови и приемом пищи должен пройти временной промежуток не менее 8-ми часов. Рекомендуется ужинать перед лабораторным исследованием максимально легкими, быстроусвояемыми продуктами, которые не оказывают нагрузку на работу пищеварительной системы. В день анализа нужно воздержаться от курения.

Методика проведения ПЦР анализа

Для получения образца крови для исследования квалифицированный медработник выполняет пункцию из локтевой вены. Манипуляция не вызывает болезненности, ощущается лишь небольшой дискомфорт. В ходе процедуры неуклонно соблюдаются правила и требования асептики и антисептики. Полученная кровь, содержащаяся в шприце, переносится в пробирку. Далее выполняется центрифугирование, что позволяет не применять для исследования не имеющие ценности форменные элементы крови.

Кровь поступает в лабораторию, где незамедлительно проводится ее тщательное изучение посредством методики полимеразной цепной реакции. Данный способ обеспечивает возможность выделения из биологического материала необходимого участка РНК вируса гепатита А, который несет в себе генную информацию и произвести его многократное копирование. Благодаря этому, из единичных, отдельных клеток получают необходимый объем РНК, что позволяет опровергнуть или подтвердить наличие в исследуемой крови вируса гепатита А.   Тест обладает высокой чувствительностью, которая практически достигает 100%. В этой связи результаты исследования являются достоверными и точными, обладают высокой информативностью и медицинской значимостью.

Расшифровка анализа

Результаты исследования выдаются пациенту, при этом их интерпретацию должен проводить только врач. В норме по итогу анализа РНК вируса гепатита А не должен быть обнаружен в крови. Такой результат считается отрицательным, однако он не может на 100% гарантировать отсутствие в организме обследуемого данного вируса. 

Так, причинами отрицательного результата также могут явиться:

• начальный, инкубационный этап вируса гепатита А, до попадания в кровь генетического материала вирусных частиц;
• период выздоровления.

В этой связи, для того чтобы достоверно исключить инфицирование вирусом гепатитом А рекомендуется при получении отрицательного результата по прошествии 2-х недель провести исследование повторно.

Положительный результат лабораторного исследования может свидетельствовать об:

• остром периоде вируса гепатита А;
• завершающем этапе инкубационного периода вируса (за 10-14 дней до появления клинических проявлений);
• период выздоровления, когда РНК вируса еще до сих пор присутствует в русле крови.

Результаты анализа квалифицированный специалист соотносит с клинической картиной, анамнезом пациента, наличием контакта с больными вирусом гепатита А, после чего осуществляет постановку диагноза и назначает требуемые лечебные мероприятия. Самодиагностика категорически не допустима, равно как и самостоятельное назначение лечения на основе результатов анализа.