Фотофиксация

Фотофиксация гистологического материала

Перевод образцов гистологического материала в цифровое изображение – услуга «Фотофиксация препарата» позволяет перевести изображение патоморфологического исследования в электронный вид и проводится для упрощения дистанционной консультации.

Фотофиксация препарата (биологического, химического, подготовленного особым способом для исследования образца патологической ткани) представляет собой фотографирование гистологических микропрепаратов цифровой фотокамерой. Изображение, которое наблюдает пато-морфолог при изучении предметных стекол с нанесенными на них срезами прижизненно изъятых из человеческого организма клеток или тканей, может быть отсканировано на цифровом носителе или распечатано на бумаге. Данная услуга с заключением врача-морфолога необходима для использования в дальнейших диагностических целях.

Когда делают фотофиксацию?

Перевод образцов биологического материала, полученного при биопсии или оперативном вмешательстве, необходим для:

• передачи изображения предметного стекла, которое квалифицированный специалист-морфолог наблюдает при микроскопическом исследовании, в личное пользование пациента – при проведении дистанционных консультаций;
• выполнения патоморфологического исследования;
• подготовки лекций или научных статей врачом, проводившим гистологический анализ, в качестве иллюстрационного материала.

Важность исследования

Для изучения клеточного состава патологического очага назначают гистологический анализ изъятых тканей, чтобы в точности изучить их клеточную структуру. Ни один другой тест не предоставляет схожую информацию, на основании которой можно установить дифференциальный диагноз. Только через создание гистологического материала можно подтвердить или опровергнуть следующие патологии:

• доброкачественная или злокачественная опухоль;
• распространение метастазов из первоначального очага злокачественного процесса;
• хроническое воспаление, приводящее к атрофии тканей с последующей дегенерацией;
• аутоиммунное заболевание с антителами, поражающими собственные клетки и ткани;
• инфекционное заражение бактериями и грибами;
• разрастание соединительной ткани, то есть фиброз;
• язвенный процесс.

На основании теста можно не только выявить первичное развитие какой-либо патологии, но и отследить ее параметры. Например, степень распространения поражения, эффективность терапии и многое другое. Если не провести гистологический анализ, разовьются осложнения первичной болезни. Например, из очага опухоли появятся метастазы в других тканях, аутоиммунные антитела приведут к обильному воспалению.

В данном случае применяют не только гистологический анализ, но и последующую фотофиксацию. Это означает, что выявленный патологический очаг фотографируют посредством видеокамеры, установленной в новейших микроскопах. Создание фотографий необходимо при появлении хронических патологических процессов. Например, если гистологический анализ периодически повторяют, у врача сохраняются фотографии патологического очага на разных этапах развития болезни. Он может сравнить эти сведения между собой, выявив следующие данные:

• степень увеличения патологического очага;
• возможность развития осложнений (например, первоначальная эрозия на поверхности слизистой оболочки желудка может трансформироваться в язву, что видно в процессе гистологии тканей);
• переход патологического процесса в период выздоровления с постепенным восстановлением нормальной структуры тканей.

Важно помнить, что повторное назначение теста проводят лишь по строгим показаниям, так как для изъятия биоматериала необходимо проведение инвазивной процедуры.

Для чего необходим анализ

Гистологическое исследование с фотофиксацией необходимо для получения следующей информации:

• наличие или отсутствие патологических очагов в структуре тканей (воспаление, аутоиммунный процесс, инфекция, атипичные клетки, фиброз, обильное отложение белка и другое);
• причины визуальных дефектов тканей, которые выявлены в ходе проведения других диагностических исследований или хирургических вмешательств;
• степень увеличения или уменьшению патологического очага со временем;
• подбор оптимальных терапевтических тактик, а также отслеживание их эффективности в процессе применения или после полного завершения (в случае недостаточного результата врач сможет своевременно откорректировать методики, чтобы добиться выздоровления или ремиссии);
• оценка структуры клеток у пациентов в ремиссии в случае, если наблюдается повторная негативная симптоматика или выявление обострения патологии по другим лабораторно-инструментальным тестам.

Если в процессе диагностики была произведена фотофиксация, образцы окрашенных тканей можно не сохранять. Достаточно открыть файл, чтобы повторно просмотреть его.

Особенности анализа

Для создания гистологического материала с последующей фотофиксацией характерны следующие особенности:

• для подготовки микропрепаратов необходим забор кусочков тканей или аспирация жидкостей, причем сбор осуществляют из разных участков патологического процесса, чтобы оценить сразу большое количество клеток и не упустить любых изменений;
• для изучения тканей под микроскопом необходимо предварительное создание микропрепаратов, то есть нанесение образцов на стерильные стекла, которые затем фиксируют и окрашивают, чтобы в такой форме рассмотреть клетки под микроскопом;
• для фотофиксации не требуется дополнительного оборудования, оно уже встроено в корпус микроскопа, поэтому в случае обнаружения любых дефектов можно создать видео или фотоизображение;
• для гистологического анализа создают минимум 3 микропрепарата, причем изучают каждую клетку в образце, это значительно повышает возможность идентификации болезни при ее наличии;
• через гистологическое исследование с фотофиксацией можно обнаружить различные патологии даже на ранних этапах развития, когда визуально ткани еще не подвергнуты дефекту, а также клиническая симптоматика отсутствует.

Подготовку биоматериала осуществляет врач-лаборант, саму оценку гистологических образцов и фотофиксацию проводит врач-цитолог.

Создание микропрепаратов

Изъятые образцы тканей обезвоживают, затем обрабатывают парафином, чтобы их структура осталась в первоначальной форме, не изменялась при хранении и транспортировке. Биоматериал отправляют в лабораторию, где из него создают микропрепараты по следующим условиям:

• устранение парафина с поверхности образца;
• нарезание ткани тонкими слоями, которые в таком виде размещают на поверхности стерильного лабораторного стекла (на его поверхности не содержатся микроорганизмы и вещества благодаря автоклавированию);
• нанесение небольшого количества спирта, который затем смывают дистиллированной водой;
• нанесение разных видов красителей последовательно, каждый из которых выдерживают 20-30 минут, затем смывают водой;
• просушивание каждого образца на открытом воздухе при комнатной температуре, исключая влияние высоких температур и прямых солнечных лучей.

Каждый микропрепарат подписывают данными пациента, затем сразу же отправляют к цитологу с последующей идентификацией под микроскопом.

Микроскопия

Врач-цитолог просматривает каждый созданный микропрепарат. Для этого применяют микроскоп, в котором устанавливают стекло, выполняют фиксацию, затем изучают при помощи микроскопа через разные окуляры.

1. Окуляр с дальним приближением. Изучают общую структуру клеток, локализацию очага поражения, расположение клеток, включение посторонних элементов.
2. Окуляр с максимальным приближением. Изучают структуру каждой клетки, оценивая степень дифференцировки. Так можно оценить накопление белка, патогенные микроорганизмы, фиброз и многие другие структуры. Это максимальное приближение, через которое оценивают строение клеток. А именно изучают мембрану, цитоплазму, органеллы, ядро, ядрышки. Чаще всего оценку клеточной структуры необходимо проводить для определения дифференцировки, чтобы выявить возможность появления атипичных клеток.

В процессе изучения микропрепарата можно создавать неограниченное количество снимков через фотофиксацию. Каждый из них будет сохранен в отдельный файл, который можно открывать по необходимости. Благодаря созданию подобных фотографий данные может изучить не только цитолог, но и многие другие врачи для уточнения диагноза.

Как проводится фотофиксация?

Для гистологического анализа могут быть использованы образцы любого биологического материала, отчужденного у пациента из патологических очагов – при бронхо-, гастро-, колоно-, риноскопии и пр. Прижизненно изъятые из организма человека кусочки ткани подвергаются обезвоживанию и пропитке парафином (для формирования гистологических блоков). Для получения тонких срезов, толщина которых составляет 3 мкм, используют специальное оборудование – микротом. Полученные образцы помещают на предметные стекла и выполняют окрашивание, позволяющее оценить под микроскопом состояние клеточной структуры тканей и различить элементы их межклеточного вещества.

Морфологическое исследование является обязательным при окончательном диагностировании онкологических патологий. От его итоговых данных зависит дальнейшая тактика медикаментозного либо хирургического лечения.

Современные микроскопы оснащены третьим тубусом с установленной видеокамерой. Подготовленные для морфологического исследования образцы с точечно выделенными проблемными участками измененный ткани переводят в цифровое изображение и выдают пациенту на электронном носителе.

Лабораторный центр предоставляет своим клиентам дополнительные услуги, в которые входит фотофиксация либо фотосканирование гистологических микропрепаратов – мазков, тонких срезов биоптатов, отпечатков органов, окрашенных специальными красителями.